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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(EC 1.6.5.3),也稱為NADH-CoQ還原酶或NADH脫氫酶,存在于廣泛的生物體中,包括動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中。它是線粒體內(nèi)膜中最大的蛋白復(fù)合物之一。該酶催化將一對電子從NADH傳遞給CoQ,并同時將O2還原生成O2-。因此,它是呼吸電子傳遞鏈中產(chǎn)生O2-的主要部位。測定該酶的活性不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)的狀態(tài),還可以反映活性氧(ROS)的產(chǎn)生狀態(tài)。
EZMeta? 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性檢測試劑盒(微量法)是一種用于檢測生物體內(nèi)線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性的試劑盒。其原理是利用線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(簡稱復(fù)合物I)催化NADH的脫氫反應(yīng),生成NAD+。通過測定在340 nm波長下NADH的氧化速率,可以計算出復(fù)合物I的活性水平。該試劑盒適用于測定動物、植物組織和細(xì)胞樣本中的復(fù)合物I活性。它提供了一種方便和可靠的方法來評估線粒體功能和氧化應(yīng)激狀態(tài)。

【產(chǎn)品基本信息】
特點(diǎn)&優(yōu)勢:
測定植物組織、動物組織、細(xì)胞等樣品中復(fù)合體Ⅰ的酶活性檢測。
提供了詳細(xì)的樣品制備和結(jié)果計算方法。
貨號:D-AKC1850
規(guī)格:48T / 96T
適用樣本:動植物組織和細(xì)胞
儲存:-20℃,避光保存6個月
【使用中注意事項】
不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
混合或復(fù)溶組分時,避免產(chǎn)生氣泡。
勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
實驗開始前,確保所有的組分及設(shè)備處于合適的溫度。
為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取 1-2 個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于 1.5)或ΔA大于 0.4,可用Reagent Ⅱ稀釋樣本后再測定,計算結(jié)果時注意乘以稀釋倍數(shù)。若ΔA 偏小,則可以通過增加加入的樣本體積來提高靈敏度。
樣本蛋白濃度需自行測定。
【常見問題(FAQ)】
該試劑盒操作步驟中的勻漿這一步可以用超聲儀超聲破碎代替嗎?
可以超聲破碎,參考超聲條件為:冰浴超聲波破碎 5 min(功率20%,超聲3 s,間隔7 s,重復(fù)30次)。
這個產(chǎn)品中的的檢測板必須要用96孔UV板嗎?
是的,需要用96孔紫外板,因為要測的波長340 nm不是可見光,是紫外的,所以要用紫外板測。
若在實驗過程中,取出來的沉淀線粒體來不及測, 要怎么保存呢?
將上清和沉淀一起保存至負(fù)80度,注意分裝,避免反復(fù)凍融。建議盡量使用新鮮樣本進(jìn)行實驗。
該試劑盒的檢測原理是什么?
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,直接讀取340nm下NADH的氧化速率從而計算出該酶活性的大小。
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