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食品安全檢測,Elisa試劑盒怎么選?

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2020-07-15     
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      前情回顧:食品真菌毒素檢測的那些事

 

      Elisa生物檢測是一種敏感度高,同時特異性強,重復(fù)性好的實驗檢測方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

 

      目前市面上的Elisa試劑盒檢測原理主要有以下四種:直接法,間接法,夾心法,競爭法。

 

Elisa試劑盒

 

      四種Elisa檢測方法由于其檢測原理各有優(yōu)劣:

 


優(yōu)點缺點
直接法1.操作簡便
2.消除了二抗交叉反應(yīng)
1.一抗由于添加標(biāo)簽免疫活性降低
2.標(biāo)記一抗耗時且昂貴
3.沒有產(chǎn)生信號放大
間接法1. 一抗的最大免疫反應(yīng)性得以保留
2. 高靈敏度,信號放大
1. 二級抗體可能發(fā)生交叉反應(yīng),產(chǎn)生非特異性信號
2. 需要額外的孵育步驟
夾心法1.特異性,靈敏度高
2.適合復(fù)雜的樣本
1.檢測時間,反應(yīng)時間增加
2.步驟繁瑣
競爭法1. 通過觀察預(yù)期信號輸出中的干擾來測量樣本中抗原(或抗體)的濃度。
2. 最常用于分析物較小,不能同時跟兩種不同的抗體結(jié)合。
1.計算不太直觀
2.總體敏感性和特異性較低。

 

      通常我們在購買我們所需要的Elisa試劑盒時主要會從以下幾個方面進(jìn)行選擇:

 

       Elisa試劑盒選擇原則:

 

指標(biāo)選項
樣本類型人,小鼠,大鼠
檢測指標(biāo)的類別•多表位的大蛋白:夾心ELISA
•小分子:競爭ELISA
檢測需求定性或定量
靈敏度低濃度的物質(zhì)需選擇高靈敏度檢測方式
樣本體積珍貴的樣本用少量的體積
回收率和線性•靈敏度
•動態(tài)范圍
•標(biāo)準(zhǔn)曲線
檢測系統(tǒng)比色法,熒光法,發(fā)光法
其他優(yōu)勢協(xié)議簡單,操作方便,實驗時間短

 

      我們購買的Elisa試劑盒質(zhì)量到底怎樣?檢測結(jié)果的可信度高不高?

 

       Elisa試劑盒評價標(biāo)準(zhǔn):

 

      ① 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,應(yīng)大于等于0.9900。

      ② 靈敏度:反應(yīng)試劑盒的最低檢測濃度

      ③ 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

      ④ 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)

      ⑤ 回收率:判斷實驗的準(zhǔn)確性和特異性

 

       Elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線:

 

      標(biāo)曲R值是幾個9才合格?

 

      實驗室應(yīng)按檢測標(biāo)準(zhǔn)(方法)的要求使用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。所用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標(biāo)準(zhǔn)(方法)如無具體的要求,至少使用5個標(biāo)樣(除空白外)建立線性標(biāo)準(zhǔn)曲線,每個點重復(fù)測定1-3次,對于篩選方法,線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98,對于確證方法,相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。

 

      其實,大于0.99是判斷是否為線性相關(guān)的一個標(biāo)準(zhǔn),實際應(yīng)用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監(jiān)測結(jié)果只用接近最高濃度一半(中間濃度)的位置才比較準(zhǔn)確,如果線性大于0.999的話,在整個線性范圍內(nèi)都會有一個比較滿意的結(jié)果。

 

      如果檢測的線性不好,可以減少標(biāo)準(zhǔn)的覆蓋范圍,將標(biāo)準(zhǔn)的濃度調(diào)整到待測樣品濃度附近,這樣結(jié)果也是非常準(zhǔn)確的。例如,樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,但線性非常不理想,這時可以將標(biāo)準(zhǔn)范圍調(diào)整到15~25ppb之間,作五個標(biāo)準(zhǔn)。

 

      在這里,我們給大家?guī)砻绹纳餀z測工具供應(yīng)商Biovision開發(fā)了一系列的我們準(zhǔn)確性高,靈敏度高,特異性好,重復(fù)性好,可以檢測檢測各類食品,飼料,組織及生物液體中真菌毒素、抗生素、食品添加劑以及其他細(xì)菌蛋白的ELISA試劑盒:

 

      1.抗生素類:

 

      檢測食品中抗生素的殘留

      樣本類型:組織、血清、牛奶、雞蛋和其他生物樣本

 

指標(biāo)貨號靈敏度樣本
氨芐青霉素E43502.5 ng/ml血清,尿液,牛奶,組織
氯霉素K42300.025 ng/ml組織,牛奶,蜂蜜,記蛋
慶大霉素(血清/尿液)K43150.3 ng/ml血清,尿液,牛奶,組織
慶大霉素K42060.3 ng/ml牛奶,組織
異煙肼K47650.1μg/ml血清
卡那霉素K42100.5 ng/ml組織,牛奶,奶粉
喹諾酮E45300.12 ng/ml血清,尿液,牛奶
鏈霉素E42720.1 ng/ml組織,蜂蜜,牛奶,奶粉
四環(huán)素E42730.05 ng/ml組織,蜂蜜,雞蛋
萬古霉素E460512.8 ng/ml血清,尿液

 

 

慶大霉素

以 慶大霉素 (serum/urine) ELISA Kit(K4315)為例

 

      2.真菌毒素:

 

      真菌毒素是真菌產(chǎn)生的低分子量次級代謝產(chǎn)物

      樣品類型:玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

 

指標(biāo)貨號靈敏度樣本
赭曲霉毒素A(OTA)E47460.1 ppb飼料、谷物
總黃曲霉毒素E47470.02 ppb酒、醬油、醋、谷物、花生、
配方飼料、食用油
T-2毒素E47480.05 ppb玉米、大米、豆類、花生、燕麥、飼料
伏馬菌素B1E47490.5 ppb谷物、花生、飼料
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇E47503 ppb大米、小米、面粉和其他作物/飼料
黃曲霉毒素M1E45660.02 ppb牛奶、奶粉
黃曲霉毒素B1(AFB1)K42080.05 ppb食用油、大米、花生、玉米
玉米赤霉烯酮(ZEN)E42760.3 ppb谷類及復(fù)合飼料

 

      3.食品添加劑:

 

      食品受到生物和環(huán)境污染物的污染發(fā)生在生產(chǎn)和加工的幾個階段

      樣品類型:牛奶、肉類、玉米、谷物、花生、大米、大豆,等。

 

指標(biāo)貨號靈敏度樣本
沙丁胺醇K42090.1 ppb豬尿、組織、飼料
磺胺單甲氧嘧啶E47740.05 ppb組織、血清、尿液、蜂蜜、牛奶
磺胺甲氧基二嗪E47750.5 ppb組織,血清,尿液,蜂蜜,牛奶
呋喃妥因(AHD)E42750.05 ppb奶粉,牛奶,紙巾,雞蛋,肝臟,蜂蜜,魚,蝦
磺胺喹惡啉E47730.05 ppb組織,血清,尿液,蜂蜜,牛奶,飼料

 

 

     

     4.宿主細(xì)胞蛋白:

 

      表達(dá)蛋白經(jīng)過幾個純化步驟后,宿主細(xì)胞蛋白仍然可以以較高濃度存在,甚至?xí)c原料藥一起純化和濃縮

      樣品類型:細(xì)胞裂解液、其他生物液

 

指標(biāo)貨號檢測范圍樣本
CHO 宿主細(xì)胞蛋白E45370.1-100ng/ml細(xì)胞裂解液,其他生物液體
大腸桿菌蛋白E44511.5-160ng/ml血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)樣品、生物液體
BSAE44666.25-400ng/ml人血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,組織勻漿和其他生物液體

 

QuickDetectTM BSA ELISA Kit

QuickDetectTM BSA ELISA KitE4466

 

      5.其他毒素:

 

      雙酚A和三聚氰胺

 

指標(biāo)貨號檢測范圍樣本
雙酚A(BPA)E47220.4-30 ppb細(xì)胞裂解液,其他生物液體
三聚氰胺E42742-162 ppb奶粉、牛奶、紙巾、飼料、雞蛋、血清

 

雙酚A和三聚氰胺

雙酚A ELISA Kit(E4722)

 

       作為一家具有高端的技術(shù)實力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)團隊-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

 

      艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

 


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