血管生成（Angiogenesis）是指從已有的毛細(xì)血管或毛細(xì)血管后靜脈發(fā)展而形成新的血管。無(wú)論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長(zhǎng)直徑超過(guò)1~2mm，都會(huì)有血管生成。這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長(zhǎng)因子，誘導(dǎo)血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長(zhǎng)迅速。因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到重要作用。體外的血管生成實(shí)驗(yàn)?zāi)芎芎玫哪M腫瘤的血管發(fā)生過(guò)程，并且適合研究藥物對(duì)這一過(guò)程的影響實(shí)驗(yàn)。

在血管生成過(guò)程中，內(nèi)皮細(xì)胞破壞周?chē)幕啄ぃ蜓苌纱碳の镞w移，增殖形成新的血管，并重組以形成必要的三維血管結(jié)構(gòu)。在存在血管生成劑或抗血管生成劑的情況下，體外檢測(cè)被廣泛用于研究這些功能。目前，對(duì)于血管生成的研究，已建立有多個(gè)體內(nèi)（in vivo）模型。如雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型，基質(zhì)膠塞分析（Matrigel Plug Assay）、角膜血管再生分析（Corneal Angiogenesis Assay）等模型均能很好的評(píng)估血管生成應(yīng)答和再生能力。然后這些體內(nèi)模型都具有共同的缺陷：耗時(shí)耗力，并且需要成熟的技術(shù)和試驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)。

Cell Biolabs開(kāi)發(fā)出的Endothelial Tube Formation Assay Kit內(nèi)皮血管生成試劑盒以EHS腫瘤細(xì)胞分離的基質(zhì)ECM組分膠作為三維培養(yǎng)基質(zhì)，能讓血管內(nèi)皮細(xì)胞在18小時(shí)內(nèi)形成血管。這種快速的檢測(cè)血管再生能力的方案較真實(shí)的模擬了細(xì)胞生長(zhǎng)和血管再生的環(huán)境，因此可用于血管再生能力的檢測(cè)及血管生成抑制劑的快速篩選等。

在ECM膠上生成人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)血管：左圖-組織培養(yǎng)板上HUVEC細(xì)胞；右圖-ECM膠上血管生成

Cell Biolabs的內(nèi)皮血管生成劑盒提供了一個(gè)自動(dòng)化的體外血管生成能力的方案。試劑盒內(nèi)提供了ECM基質(zhì)膠、熒光染料及緩沖液等。其操作步驟是將細(xì)胞鋪設(shè)在基質(zhì)ECM組分膠上，培養(yǎng)4-18小時(shí)后在光學(xué)顯微鏡下觀察管道生成情況，包括管道的長(zhǎng)度和節(jié)點(diǎn)數(shù)等。另外，試劑盒內(nèi)還提供了熒光染料，可快速對(duì)細(xì)胞和新生管進(jìn)行熒光顯色觀察和分析。

常見(jiàn)問(wèn)題：

Q1. 這個(gè)試劑盒可以用于HUVECs之外的細(xì)胞嗎？

A1. 該試劑盒可用于任何內(nèi)皮細(xì)胞

Q2. 試劑盒中ECM膠溶液的組分是什么？

A2. ECM 凝膠溶液與基質(zhì)膠相同，是從EHS小鼠肉瘤中分離得到的一類(lèi)ECM，含有主成分層粘連蛋白以及IV型膠原蛋白、肝素硫酸鹽糖蛋白、巢蛋白和其他次要成分。 它確實(shí)含有生長(zhǎng)因子，但含量未知。

Q3. 該測(cè)定法是否需要血管生成介質(zhì)？

A3. 血管生成介質(zhì)對(duì)于該測(cè)定不是必需的，因?yàn)榧幢悴惶砑尤魏谓橘|(zhì)血管也能生成。由于血管是在沒(méi)有額外介質(zhì)的情況下形成的，因此該檢測(cè)方法是研究抑制血管生成的良好系統(tǒng)，但不利于研究血管生成的增強(qiáng)效應(yīng)。我們?cè)诖朔治鲈噭┖兄胁话ㄈ魏谓橘|(zhì)，但如果客戶(hù)要使用，則應(yīng)確定所用化合物的最佳濃度。良好血管形成的關(guān)鍵是每孔使用足夠健康的HUVEC細(xì)胞，例如50,000個(gè)細(xì)胞/孔。通常每孔更多的細(xì)胞比更少的細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致更好的血管形成。

Q4. 如何優(yōu)化血管生成？

A4. 1.延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至12小時(shí)或者過(guò)夜。一般過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)形成較好的血管；2.ECM凝膠在使用之前應(yīng)該完全解凍：在加入細(xì)胞培養(yǎng)孔之前，可以將凝膠在4℃條件下解凍24小時(shí)。凝膠形成需要 30分鐘到1 小時(shí)，但是如果需要，可以將平板在 37°C下孵育1小時(shí)以形成凝膠。凝膠在使用前完全凝固很重要，因?yàn)槿绻前牍腆w，細(xì)胞的尺寸將不同，細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用會(huì)減少，從而減少血管的形成；3.添加細(xì)胞后，不應(yīng)移動(dòng)培養(yǎng)板，因?yàn)檫@會(huì)干擾血管的形成。

Q5. 如何避免在培養(yǎng)孔的邊緣形成血管？

A5. 孔邊緣上的血管形成可能是由于分布在邊緣的細(xì)胞濃度較高。 這表明孔中沒(méi)有足夠的細(xì)胞，應(yīng)增加細(xì)胞數(shù)。

Q6. 你能推薦抑制血管生成的藥物嗎？

A6. 抑制劑的例子是：1. MMP抑制劑：GM6001 ; 2. PI3K抑制劑：渥曼青霉素

作為一家具有高端的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷(xiāo)售體系的生物高科技企業(yè)，總部位于武漢光谷高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)，服務(wù)面向全國(guó)。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷(xiāo)售、技術(shù)服務(wù)與合約開(kāi)發(fā)為一體的專(zhuān)業(yè)化高科技公司，為用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案，及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶(hù)，公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心，進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段，將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國(guó)內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國(guó)際知名品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理，主要包括：AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、BioVendor、Caisson Labs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等，可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。