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Flag標(biāo)簽抗體在免疫沉淀IP&免疫熒光IF中的應(yīng)用

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2010-03-13     
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Flag標(biāo)簽系統(tǒng)是已被公認(rèn)的用于表達(dá)、純化以及檢測(cè)融合蛋白的表達(dá)系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于Western blotting、免疫細(xì)胞組化、免疫共沉淀、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個(gè)研究領(lǐng)域。Flag標(biāo)簽是一個(gè)與重組蛋白相融合的由8個(gè)親水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)組成的多肽片斷。FLAG標(biāo)簽只有8個(gè)氨基酸組成,因此它不會(huì)占據(jù)其他表位與結(jié)合域,避免導(dǎo)致融合蛋白的功能、分泌性以及轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生改變。由于它的親水性特點(diǎn),F(xiàn)LAG標(biāo)簽傾向于定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶酶解。

由于Flag標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,這一系統(tǒng)已用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母和哺乳細(xì)胞。由于Flag標(biāo)簽系統(tǒng)的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號(hào)#A02010)可以用于檢測(cè)和Flag標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測(cè)Flag融合表達(dá)蛋白等。比如在免疫熒光IF的實(shí)驗(yàn)里,同時(shí)配合Abbkine的Dylight 549熒光二抗,使用該抗體可以準(zhǔn)確的定位出Flag融合表達(dá)蛋白在細(xì)胞內(nèi)的位置(如圖紅色顯示部分)。另外,做融合表達(dá)分析前,通過免疫共沉淀技術(shù)獲得Flag融合表達(dá)蛋白也是非常重要的一步,因此選擇一個(gè)合適的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag標(biāo)簽抗體也是很必要的。Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號(hào)#A02010)不僅能應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)定位的IF實(shí)驗(yàn),同樣還能應(yīng)用于IP實(shí)驗(yàn)。1:200甚至更高的IP實(shí)驗(yàn)稀釋比率,也說明了該抗體本身的具有很高的效價(jià),同時(shí),因?yàn)槭菃慰寺】贵w,因此特異性也很高。高效價(jià)所對(duì)應(yīng)的高稀釋比率也意味著超高性價(jià)比。

Flag標(biāo)簽抗體EarthOx Flag抗體用于IP及WB實(shí)驗(yàn)
Flag標(biāo)簽抗體(#A02010)用于IF免疫熒光實(shí)驗(yàn)Flag標(biāo)簽抗體(#A02010)用于WB實(shí)驗(yàn)(Line 4為1:10000稀釋)

產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號(hào)產(chǎn)品說明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

除了上面所說的IP和IF實(shí)驗(yàn),F(xiàn)lag標(biāo)簽抗體的基本應(yīng)用還包括WB實(shí)驗(yàn),Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號(hào)#A02010)在該應(yīng)用中同樣表現(xiàn)優(yōu)異。說明書的推薦起始稀釋比例是1:1000,但在如上圖所示的實(shí)驗(yàn)中,在1:10000的稀釋比率下也表現(xiàn)優(yōu)異(Abbkine也進(jìn)行了50000次以后的稀釋,仍然顯示出很好的條帶顯示,沒有在說明書里列出)。因此Abbkine的Flag標(biāo)簽抗體不但能通過WB實(shí)驗(yàn)很好的滿足融合蛋白表達(dá)量的分析,并且在免疫熒光IF、免疫沉淀IP的試驗(yàn)中也有很好的表現(xiàn),能滿足Flag標(biāo)簽融合蛋白的細(xì)胞內(nèi)定位以及純化的需要,而且其高效價(jià)和特異性,遠(yuǎn)遠(yuǎn)比其他Flag抗體具有更高的性價(jià)比。更多該抗體的信息,請(qǐng)點(diǎn)擊查看:Abbkine Flag標(biāo)簽抗體

更多Flag標(biāo)簽抗體以及其他如His、HA、Myc、GST、GFP(如EGFP、EYFP)等其他標(biāo)簽抗體,請(qǐng)電話垂詢。美國(guó)Abbkine致力于為生命科學(xué)研究和醫(yī)療發(fā)展提供最新的產(chǎn)品和技術(shù),艾美捷將其引入中國(guó),作為其中國(guó)區(qū)域代理,將為客戶提供最具性價(jià)比的常規(guī)免疫學(xué)試劑,如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測(cè)底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家國(guó)際知名品牌的的中國(guó)代理或區(qū)域代理,能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。

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