每天做實(shí)驗(yàn)小心翼翼，時(shí)時(shí)擔(dān)心提取的DNA被污染、被降解。終于，廢了九牛二虎之力，好不容易提取到高質(zhì)量的DNA，然而PCR仍然P不出來(lái)?xiàng)l帶。是試劑加漏了嗎？是酶失活了嗎？換上新試劑，冰上重來(lái)一次，然并卵，不僅P不出來(lái)，更重要的是也不知道為啥P不出來(lái)，貝多芬都彈不出我的悲傷！

       算了，悲傷往事不再提，今天小編就總結(jié)教訓(xùn)，帶你啃一啃PCR的這個(gè)硬骨頭吧！PCR擴(kuò)增不出來(lái)?xiàng)l帶的原因有很多，諸如引物設(shè)計(jì)有誤，DNA模板已降解，酶失活或者有雜酶污染，緩沖液條件不當(dāng)，模板DNA的GC含量太高等等。大部分原因可以通過(guò)換試劑得到解決，但是對(duì)于高GC含量的樣本，往往束手無(wú)策。

      在DNA（A、T、C、G）4種堿基中，鳥嘌呤（G）和胞嘧啶（C）所占的比率稱為GC含量。因?yàn)镚、C之間形成三對(duì)氫鍵，解鏈所需能量較高，所以模板很難打開，高GC含量（G+C≥60%）模板擴(kuò)增中所面臨的主要困難是模板中容易形成穩(wěn)定的二級(jí)結(jié)構(gòu)妨礙DNA聚合酶在模板上的推進(jìn)，而且模板上可能存在多個(gè)非特異性的引物復(fù)性位點(diǎn)，導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，甚至很多時(shí)候擴(kuò)增不出靶基因。高GC含量的DNA序列廣泛存在于不同物種的基因組中。人類高GC含量的DNA序列雖然只占了全基因組的3%，但有28%的基因位于這些區(qū)域內(nèi)。此外，包括啟動(dòng)子和增強(qiáng)子在內(nèi)的許多基因重要調(diào)控區(qū)域也大都由高GC含量的DNA序列組成。

      目前，研究學(xué)者建立了各種不同的方法來(lái)解決高GC含量DNA模板擴(kuò)增困難的問(wèn)題，包括降落PCR、添加增強(qiáng)劑（如DMSO）等。雖然這些方法和手段的單獨(dú)使用都獲得了一定的效果，但是對(duì)于引物和模板的要求普遍過(guò)于苛刻，適用范圍也比較局限，并不具有普遍適用性，而且往往經(jīng)過(guò)多次摸索和嘗試，也不易得到較好的結(jié)果。

      所以您還在為高GC含量PCR煩惱嗎？您還在為擴(kuò)增不出來(lái)結(jié)果而焦心嗎？PCR試劑領(lǐng)軍品牌Solis BioDyne可以為您輕松解決這個(gè)難題，可同時(shí)提供適合高GC含量PCR的預(yù)混液以及添加劑：

      艾美捷科技有限公司，通過(guò)提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈管理，為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。我們的企業(yè)的核心價(jià)值觀：“激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越”。激發(fā)我們內(nèi)在的創(chuàng)造力，提供有競(jìng)爭(zhēng)力的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品和服務(wù)，持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值是我們的企業(yè)使命。我們的企業(yè)愿景是成為受人尊重、世界一流的生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)品及服務(wù)供應(yīng)商。

      作為一家具有尖端的技術(shù)實(shí)力、一流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)，總部位于武漢光谷國(guó)家級(jí)高新技術(shù)開發(fā)區(qū)，服務(wù)面向全國(guó)。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案，及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶，公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心，進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段，將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國(guó)內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

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                       三點(diǎn)：

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                      艾美捷定位：通過(guò)提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系、便利的客戶關(guān)系和供應(yīng)鏈，為生命科學(xué)研究工作者提供整體打包方案。

                   六觀：

                   價(jià)值觀：激情、敬業(yè)、學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、合作、卓越。