釋放包涵體蛋白，您需要一個包涵體蛋白純化試劑盒

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時間：2019-06-06

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細(xì)菌被廣泛用于表達(dá)不同的蛋白質(zhì)。然而，通過重組技術(shù)在細(xì)菌中表達(dá)的70-80%的蛋白通常包含在不溶性包涵體中（即蛋白質(zhì)聚集體）中。由于折疊錯誤，在這些亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)通常是無活性的。包涵體中重組蛋白的產(chǎn)率始終高于可溶性蛋白。這背后的原因被認(rèn)為是不溶性蛋白質(zhì)對細(xì)胞酶的蛋白水解的抗性。此外，不溶性重組蛋白在包涵體中的分離要比可溶性蛋白容易得多。這些因素有利于使用細(xì)菌發(fā)酵來擴(kuò)大高價值蛋白質(zhì)的獲取。

包涵體蛋白

什么是包涵體？

重組蛋白在宿主系統(tǒng)中高水平表達(dá)時，很容易形成不可溶、無生物活性的蛋白聚集體--包涵體。包涵體須經(jīng)過變性溶解后，在適當(dāng)條件下復(fù)性形成天然的構(gòu)象，才能得到有生物活性蛋白。目前，大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是生產(chǎn)重組蛋白最常用的表達(dá)體系，其重組蛋白的表達(dá)量可達(dá)細(xì)胞蛋白的50%，其他成分主要有一些雜蛋白（如 RNA聚合酶、核糖體組分、外膜蛋白等）、質(zhì)粒 DNA、RNA 片斷和脂質(zhì)、肽聚糖、脂多糖等成分。

生物活性蛋白

如何從誘導(dǎo)的細(xì)菌培養(yǎng)物中分離和純化包涵體蛋白？艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商，為您推薦Norgen Biotek品牌的包涵體蛋白純化試劑盒。

產(chǎn)品名稱及描述	貨號	規(guī)格	產(chǎn)品展示
ProteoSpin™ Inclusion Body Isolation Micro Kit	10300	20次分析
ProteoSpin™ Inclusion Body Isolation Maxi Kit	17700	4次分析

ProteoSpin™包涵體分離純化試劑盒有助于篩選表達(dá)在大腸桿菌克隆的包涵體中的重組蛋白。該試劑盒包含特殊配方的試劑，可使用以下三個過程實(shí)現(xiàn)包涵體蛋白的快速和高質(zhì)量純化：

1、裂解細(xì)菌細(xì)胞以釋放固體形式的包涵體；

2、純化的包涵體的溶解；

3、使用旋轉(zhuǎn)柱色譜法純化重組蛋白。

包涵體蛋白純化試劑盒特色與優(yōu)勢：

1、操作快速簡便。

2、包涵體蛋白分離和純化的一體化解決方案。

3、完整的試劑盒包含細(xì)胞裂解液，包涵體溶解試劑，緩沖液和旋轉(zhuǎn)柱用以純化蛋白質(zhì)。

4、純化的重組蛋白質(zhì)可用于SDS-PAGE ，2D凝膠，Western blots，質(zhì)譜分析和其他應(yīng)用。

包涵體蛋白純化試劑盒，廠家測試：

貨號：10300	酸性蛋白分離：分離重組50kDa嵌合蛋白。
貨號：10300	堿性蛋白分離：分離重組RNaseA。
貨號：17700	分離堿性蛋白質(zhì)時蛋白質(zhì)沒有損失：分離重組30kDa堿性蛋白質(zhì)。1）是上樣，第2道是上樣后的流通道，3）是洗滌，4）是第一次洗脫，5）是第二次洗脫。
貨號：17700	分離酸性蛋白質(zhì)時沒有蛋白質(zhì)損失：分離重組70kDa酸性蛋白質(zhì)。 1）是上樣，第2道是上樣后的流通道，3）是洗滌，4）是第一次洗脫，5）是第二次洗脫。

樣品使用量與產(chǎn)出數(shù)據(jù)參考：

試劑盒參數(shù)比較	貨號10300	貨號17700
培養(yǎng)物最大體積	1.5 mL	100 mL
最小洗脫體積	30 µL	4 mL
產(chǎn)量	1.5 mL培養(yǎng)物產(chǎn)量2 - 50 µg	100 mL培養(yǎng)物產(chǎn)量高達(dá)12 mg
純化時間	純化12個樣品需1小時	純化1個樣品需1小時

精彩文章鑒賞：

CP40 from Corynebacterium pseudotuberculosis is an endo-β-N-acetylglucosaminidase.BMC Microbiology. 2016.

Proteome of Human Calcium Kidney Stones.Urology.2010.

Norgen Biotek成立于1998年，公司總部位于加拿大，是一家著名全球化生物技術(shù)公司，生產(chǎn)基于專利技術(shù)的核酸和蛋白質(zhì)純化及富集產(chǎn)品用于研究和診斷。Norgen Biotek 在2003年獲得加拿大國家研究委員會頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎，是一家致力于樣品制備并獲得ISO 9001（產(chǎn)品質(zhì)量）、ISO 13485（產(chǎn)品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設(shè)備，包括用于體外診斷領(lǐng)域）和ISO 15189（可用于臨床檢測機(jī)分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)能力）認(rèn)證的生物科技公司。目前該公司的產(chǎn)品多達(dá)700余種，提供一流的樣品制備試劑盒，應(yīng)用于基因組和蛋白組等不同的領(lǐng)域。

艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等，可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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