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眾所周知,目前已發(fā)現(xiàn)的RNA修飾存在超過(guò)100種,而最常見的修飾類型就是m6A(N6-腺苷酸甲基化)。(當(dāng)然DNA中也存在m6A的修飾。)

【簡(jiǎn)介】
甲基腺嘌呤(m6A)是目前發(fā)現(xiàn)的真核生物mRNA上含量最多的化學(xué)修飾,同時(shí)也廣泛存在于多種細(xì)菌和RNA病毒中。在動(dòng)物或植物體內(nèi),m6A可以被一系列甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基酶和結(jié)合蛋白進(jìn)行修飾、去修飾和識(shí)別。m6A可以通過(guò)影響RNA加工代謝從而調(diào)控多種生物學(xué)功能。例如在脊椎動(dòng)物snRNAsU2、U4、U6中,在病毒和真核生物的mRNAs中,以及在大腸桿菌的16SrRNA中。最近的研究發(fā)現(xiàn),mRNA主要是在終止密碼子和長(zhǎng)的內(nèi)部外顯子處進(jìn)行m6A修飾,這在小鼠和人類之間是保守的。所謂的RNA甲基組可能在基因表達(dá)的調(diào)控中起著重要作用。在大腸桿菌中,Dam甲基酶在DNA水平上引入5'-GATC-3'的m6A修飾。這使得細(xì)胞在錯(cuò)配修復(fù)過(guò)程中能夠區(qū)分親本鏈和子鏈。m6A甲基化的異常跟許多疾病,腫瘤,病毒感染均有關(guān)聯(lián),其研究也因此備受矚目!
【m6A抗體應(yīng)用】
研究靠得住,抗體第一步!目前檢測(cè)RNA的m6A修飾所采用的方法為m6A高通量檢測(cè)技術(shù)與基于抗體特異性檢測(cè)的技術(shù)。兩者的共同點(diǎn)在于,為避免細(xì)胞中大量rRNA與tRNA的干擾,必須將m6A修飾的RNA富集出來(lái)。而采取特異性抗體富集便是常用的方法,但是,目前所用的m6A抗體依舊存在靈敏度不強(qiáng)的缺陷,難以進(jìn)行各類實(shí)驗(yàn);同時(shí),在大量干擾RNA的存在下將m6A修飾的RNA進(jìn)行富集非常困難。
【單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)】
1、特異性:?jiǎn)慰寺】贵w克隆單一純度高的抗體,特異性強(qiáng),可單一控制病變;
2、多樣性:可以針對(duì)不同抗原做不同種的單克隆抗體,種類多;
3、定向性:結(jié)合力較單向,運(yùn)用單克隆抗體定向運(yùn)送到定向部位,控制病變。

【產(chǎn)品性能】
| 艾美捷貨號(hào) | SYS-202-111 |
| Cat. No. | 202 111 |
| 名稱 | n6 -甲基腺苷m6A 抗體 |
| 規(guī)格/抗體類型 | 100ug/單克隆抗體 |
| 應(yīng)用類型 | Dot blot IP ELISA |
| 免疫原 | n6 -甲基腺苷與牛血清白蛋白融合 |
| 反應(yīng) | 人類,大鼠,小鼠,真核生物,原核生物 |
| 特異性 | 特異性n6-甲基腺苷(m6A)與m6Am有一定交叉反應(yīng) |

用m6A小鼠單克隆抗體(No.202 111)和兔多克隆抗體(No.202 003)檢測(cè)了含有m6A和對(duì)照寡核苷酸的數(shù)量。

A:不同m6A量的ELISA定量。小鼠抗m6a(克隆212B11)作為捕獲抗體,生物素化寡核苷酸作為抗原。低聚物由24個(gè)核苷酸組成,包括5個(gè)n6 -甲基-2-脫氧腺苷(m6A oligo BT)或脫氧腺苷(陰性對(duì)照oligo BT),并在其3'端生物素化。以鏈霉親和素偶聯(lián)HRP為檢測(cè)器。

B:釋放抗體結(jié)合的m6A。小鼠抗m6A(克隆212B11)被用作捕獲抗體,并被生物素化的m6A寡核苷酸飽和。加入不同數(shù)量的游離m6A (Sigma)與結(jié)合寡核苷酸競(jìng)爭(zhēng)。以鏈霉親和素偶聯(lián)HRP為檢測(cè)器。
【相關(guān)產(chǎn)品】
多克隆抗體是來(lái)自同一物種的抗體分子的混合物,它們針對(duì)同一靶標(biāo),但可變靶標(biāo)識(shí)別序列不同。單克隆抗體是共享恒定序列和可變序列的相同抗體分子。(m6A - 202 003、m6A - 202 011),這兩種抗體被諸多高分文章引用。
| 艾美捷貨號(hào) | m6A - 202 003 | m6A - 202 011 |
| Cat. No. | 202 003 | 202 011 |
| 名稱 | n6 -甲基腺苷m6A 抗體 | |
| 規(guī)格/抗體類型 | 50ug/多克隆抗體 | 100ug/單克隆抗體 |
| 應(yīng)用類型 | DOTBLOT、IP、ELISA | WB、Dot Blot、IP |
| 免疫原 | n6 -甲基腺苷與牛血清白蛋白融合 | |
| 反應(yīng) | 人類,大鼠,小鼠,真核生物,原核生物 | |
| 特異性 | n6-甲基腺苷(m6A)與m6Am有一定交叉反應(yīng) | |
【引文賞析】
【Dot blot】
N6-methyladenosine (m6A) RNA methylation mediated by methyltransferase complex subunit WTAP regulates amelogenesis.
Xie F, Zhu X, Liu X, Chen H, Wang J
The Journal of biological chemistry (2022) : 102715. 202 111 Dot blot
Enterotoxigenic Escherichia coli infection promotes enteric defensin expression via FOXO6-METTL3-m6A-GPR161 signalling axis.
Zong X, Wang H, Xiao X, Zhang Y, Hu Y, Wang F, Wang Y, Lu Z
RNA biology (2020) : 1-11. 202 111 Dot blot, IP; tested species: pig
Direct RNA sequencing enables m6A detection in endogenous transcript isoforms at base specific resolution.
Lorenz DA, Sathe S, Einstein JM, Yeo GW
RNA (New York, N.Y.) (2019) : . 202 111 Dot blot; tested species: human
Epitranscriptomic m6A Regulation of Axon Regeneration in the Adult Mammalian Nervous System.
Weng YL, Wang X, An R, Cassin J, Vissers C, Liu Y, Liu Y, Xu T, Wang X, Wong SZH, Joseph J, et al.
Neuron (2018) 972: 313-325.e6. 202 111 Dot blot; tested species: mouse
Transcriptional Dysregulation in Postnatal Glutamatergic Progenitors Contributes to Closure of the Cortical Neurogenic Period.
Donega V, Marcy G, Lo Giudice Q, Zweifel S, Angonin D, Fiorelli R, Abrous DN, Rival-Gervier S, Koehl M, Jabaudon D, Raineteau O, et al.
Cell reports (2018) 2210: 2567-2574. 202 111 Dot blot
【IP】
Identification and comparison of m6A modifications in glioblastoma non-coding RNAs with MeRIP-seq and Nanopore dRNA-seq.
Krusnauskas R, Stakaitis R, Steponaitis G, Almstrup K, Vaitkiene P
Epigenetics (2023) : 1-14. 202 111 IP; tested species: human
HBV/Pregenomic RNA Increases the Stemness and Promotes the Development of HBV-Related HCC Through Reciprocal Regulation With Insulin-Like Growth Factor 2 mRNA-Binding Protein 3.
Ding WB, Wang MC, Yu J, Huang G, Sun DP, Liu L, Zhang JN, Yang Y, Liu H, Zhou WP, Yang F, et al.
Hepatology (Baltimore, Md.) (2021) 743: 1480-1495. 202 111 IP; tested species: human
Localization of METTL16 at the Nuclear Periphery and the Nucleolus Is Cell Cycle-Specific and METTL16 Interacts with Several Nucleolar Proteins.
Stixová L, Kom?rková D, Svobodová Kova?íková A, Fagherazzi P, Bártová E
Life (Basel, Switzerland) (2021) 117: . 202 111 IP; tested species: mouse
Enterotoxigenic Escherichia coli infection promotes enteric defensin expression via FOXO6-METTL3-m6A-GPR161 signalling axis.
Zong X, Wang H, Xiao X, Zhang Y, Hu Y, Wang F, Wang Y, Lu Z
RNA biology (2020) : 1-11. 202 111 Dot blot, IP; tested species: pig
NOseq: amplicon sequencing evaluation method for RNA m6A sites after chemical deamination.
Werner S, Galliot A, Pichot F, Kemmer T, Marchand V, Sednev MV, Lence T, Roignant JY, K?nig J, H?bartner C, Motorin Y, et al.
Nucleic acids research (2020) : . 202 111 IP; tested species: human,drosophila
【IC】
N6-Adenosine Methylation in RNA and a Reduced m3G/TMG Level in Non-Coding RNAs Appear at Microirradiation-Induced DNA Lesions.
Svobodová Kova?íková A, Stixová L, Kova?ík A, Kom?rková D, Legartová S, Fagherazzi P, Bártová E
Cells (2020) 92: . 202 111 ICC; tested species: mouse
Synaptic Systems(SySy)品牌成立于德國(guó),專注于研發(fā)和生產(chǎn)針對(duì)突觸和神經(jīng)科學(xué)相關(guān)抗體,以及用于細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)和高分辨率顯微鏡的各種抗體,除此之外,還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產(chǎn)品組合,全方面滿足客戶的各種需求。抗體產(chǎn)品線主要有:突觸活性區(qū)域相關(guān)抗體、突觸后蛋白相關(guān)抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關(guān)抗體、Alzheimer's相關(guān)抗體、細(xì)胞骨架、離子通道相關(guān)抗體等。 作為SySy在中國(guó)的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供最全面的SySy產(chǎn)品。
作為一家具有高端的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國(guó)。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國(guó)內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!
艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國(guó)際知名品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、Caisson Labs、Cayman Chemical、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等,可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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