人體的ATP有95%為線粒體所提供，合成的ATP通過線粒體內(nèi)膜ADP/ATP載體與細胞質(zhì)中的ADP交換進入細胞質(zhì)，參與細胞的各種需能過程，因此線粒體與細胞維持正常功能密切相關。線粒體在呼吸氧化過程中，將所產(chǎn)生的能量以電化學勢能儲存于線粒體內(nèi)膜，在內(nèi)膜兩側(cè)造成質(zhì)子及其他離子濃度的不對稱分布而形成線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential，MMP)。正常的MMP是維持線粒體進行氧化磷酸化、產(chǎn)生三磷酸腺苷的先決條件, MMP的穩(wěn)定有利于維持細胞的正常生理功能。

      近年來研究發(fā)現(xiàn)多種細胞在不同因子作用下發(fā)生凋亡時均伴有MMP的下降，線粒體氧化磷酸化過程中起偶聯(lián)作用的MMP在細胞凋亡早期病理變化以前就開始下降，該過程早于DNA片段化，目前線粒體膜電位下降被廣泛認為是細胞凋亡過程中最早發(fā)生的事件之一。

      常見研究線粒體膜電位的熒光探針有：

      1.JC-1

      JC-1也稱CBIC2(3)，是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以產(chǎn)生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時JC-1為單體(monomer)，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。JC-1單體可采用488或514nm激光激發(fā)，發(fā)出綠色熒光波長為529nm左右；JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激發(fā)波長為585nm，發(fā)出紅色波長為590nm。

      2.Rhodamine 123

      Rhodamine 123（羅丹明123）是一種可透過細胞膜的陽離子熒光染料，在正常細胞中能夠依賴線粒體跨膜電位進入線粒體基質(zhì)，熒光強度減弱或消失。在細胞凋亡發(fā)生時，線粒體膜完整性破壞，線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔開放，引起線粒體跨膜電位(ΔΨm) 的崩潰，Rh123 重新釋放出線粒體，從而發(fā)出強黃綠色熒光，通過熒光信號的強弱來檢測線粒體膜電位的變化和凋亡的發(fā)生，可用于培養(yǎng)的細胞或從組織中提取出的線粒體的膜電位檢測。

      3.TMRM

      Tetramethylrhodamine, methyl ester (TMRM)也是一種可透過細胞膜的陽離子熒光染料，單激光激發(fā)和單熒光發(fā)射峰。可用543nm激光激發(fā)，發(fā)射橙紅色熒光波長在580nm左右。相對其他熒光探針，TMRM具有許多優(yōu)點如染料在線粒體積累僅源于膜電位變更；相對毒性更小；和細胞器結合率低；適合做線粒體膜電位的定量分析等。

      今天給大家介紹一類超好用的線粒體膜電位檢測工具——Cell Meter 線粒體膜電位（MMP）測定試劑盒，這類熒光測定法使用我們專有的陽離子線粒體探針檢測線粒體膜電位變化。 在正常細胞中，當線粒體探針在線粒體中積累時，紅色熒光強度增加。 然而，在凋亡細胞中，線粒體染料的熒光強度在MMP降低后降低。

      線粒體膜電位的降低與線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的開放一致，導致細胞色素C釋放到細胞質(zhì)中，進而引發(fā)細胞凋亡級聯(lián)中的其他下游事件。 這些試劑盒經(jīng)過單獨優(yōu)化，可兼容流式細胞儀，熒光顯微鏡或熒光酶標儀，對細胞凋亡激活劑和抑制劑進行篩選。

       特色產(chǎn)品

      圖1.用Cell Meter 線粒體膜電位測定試劑盒*適合流式細胞儀 橙色熒光*（貨號：22804）檢測FCCP誘導的線粒體膜電位變化

      圖2.使用Cell Meter NIR線粒體膜電位檢測試劑盒檢*適合微孔板檢測 （貨號：22803）測FCCP誘導的線粒體膜電位變化

       產(chǎn)品推薦：

      作為一家具有高端的技術實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)，總部位于武漢光谷高新技術開發(fā)區(qū)，服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案，及優(yōu)質(zhì)的物流服務。為了更好的服務客戶，公司組建了一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)團隊-艾美捷生物技術中心，進入研發(fā)生產(chǎn)階段，將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領域的同仁們!

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