【前情回顧】Abnova實力上新–靶向新冠病毒S蛋白的中和抗體

重磅！Abnova新冠病毒中和抗體ELISA檢測試劑盒上新啦

      新冠病毒(COVID-19)有四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白：刺突蛋白（Spike protein，S蛋白），核衣殼蛋白（Nucleocapsid，N蛋白），膜蛋白（Membrane protein，M蛋白），包膜蛋白（Envelope protein，E蛋白）。刺突蛋白S蛋白有兩個亞基：S1和S2，其中受體結(jié)合位點（RBD）位于S1亞基上。COVID-19通過RBD與ACE2的結(jié)合介導進入細胞內(nèi)部，因此阻斷病毒RBD和人ACE-2的特異性結(jié)合是潛在重要的治療方向之一 !說到這里就又不得不提到中和抗體了。

      新冠病毒中和抗體可以特異性識別并且結(jié)合新冠病毒的RBD位點，搶先阻止病毒與人ACE-2結(jié)合，直接阻斷病毒的進一步感染。

      Abnova全新推出的COVID-19中和抗體ELISA檢測試劑盒利用競爭法ELISA原理，當樣本中存在中和抗體時與刺突RBD蛋白結(jié)合，從而阻止了RBD與預包被板底的ACE2蛋白的結(jié)合，用于新冠病毒中和抗體的定量檢測。

       實驗步驟：

      1.將100ul2 ug/ml ACE2加入至每孔，4℃孵育過夜；

      2.第二天，50 ul稀釋好的樣本+50ul 刺突RBD蛋白混合后，室溫孵育2h；

      3.包被后，移除孔中的ACE2蛋白，加入稀釋好的封閉液，室溫封閉1h；

      4.移除孔中的封閉液，用200ul wash buffer洗滌一次；

      5.將孵育好的樣本+刺突RBD蛋白混合液100ul加入孔中，37℃孵育2h；

      6.移除孔中的樣本-刺突RBD蛋白混合液，用200ul wash buffer洗滌，洗4次；

      7.每孔中加入100ul稀釋好的HRP標記的抗兔Fc標簽二抗，37℃孵育1h（由于刺突RBD蛋白是帶有兔Fc標簽的，所以可以備該二抗特異性識別并結(jié)合）；

      8.移除孔中的二抗，用200ul wash buffer洗滌，洗4次；

      9.向每孔加入100ul TMB顯色液，輕輕混合，室溫孵育5min，每孔加入100ul終止液，輕輕混合，在450 nm波長下檢測吸光度。

       標準曲線僅用于說明目的，不應用于計算未知數(shù)。每次檢測時均應做標準曲線。
（競爭法ELISA，微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈負相關(guān)）

        實驗結(jié)果展示：

用COVID-19中和抗體ELISA檢測試劑盒（Cat＃KA6111）進行對新冠病毒單克隆抗體（7F5、4E10和7F7）的中和測定

用COVID-19中和抗體ELISA檢測試劑盒（Cat＃KA6111）對DNAx免疫的新冠病毒多克隆抗體進行中和測定。

用COVID-19中和抗體ELISA檢測試劑盒（Cat＃KA6111）對SAM免疫的多克隆抗體進行中和測定。

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