Phalloidin是一種從致命的鵝膏菌中分離出來的毒素。它是一種與F-肌動(dòng)蛋白特異性結(jié)合的雙環(huán)肽（1）。這是一個(gè)非常方便的研究用熒光染料標(biāo)記時(shí)F-肌動(dòng)蛋白分布的工具。Phalloidin在半胱氨酸和色氨酸之間含有一個(gè)不尋常的硫醚橋形成內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu)的殘留物。在升高的pH下，這種硫醚被裂解并且毒素失去了對(duì)肌動(dòng)蛋白的親和力。CF?染料是Biotium開發(fā)的一系列下一代熒光染料在亮度、光穩(wěn)定性和水溶性方面具有綜合優(yōu)勢(shì)與其他熒光染料相比。熒光標(biāo)記鬼筆色素染色F-肌動(dòng)蛋白在納摩爾濃度下（1,3）。標(biāo)記的鬼筆苷對(duì)兩者具有相似的親和力大小細(xì)絲，以約一個(gè)鬼筆肽的化學(xué)計(jì)量比結(jié)合來自不同物種的肌肉和非肌肉細(xì)胞中每個(gè)肌動(dòng)蛋白亞單位的分子植物和動(dòng)物。   

與抗體不同，鬼筆肽的結(jié)合親和力在不同物種之間，肌動(dòng)蛋白沒有顯著變化。非特定染色可以忽略不計(jì)，染色和未染色區(qū)域之間的對(duì)比度非常大。Phalloidin使單體/聚合物的平衡向聚合物，將聚合的臨界濃度降低30倍(3,4). Phallotoxins還通過抑制引起的解聚來穩(wěn)定F-肌動(dòng)蛋白通過細(xì)胞松弛素、碘化鉀和升高的溫度。因?yàn)楣砉P肽偶聯(lián)物較小，直徑約為12-15?分子量＜2000道爾頓，多種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，包括肌球蛋白、原肌球蛋白和肌鈣蛋白在用鬼筆色素。更重要的是，鬼筆肽標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲仍然存在功能的標(biāo)記的甘油化肌纖維仍然收縮，標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲仍然在固相肌球蛋白底物上移動(dòng)（5，6）。熒光鬼筆素也可用于量化細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白的量（7，8）。   

作為Biotium全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Biotium熱銷產(chǎn)品鬼筆環(huán)肽，CF 647。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

儲(chǔ)備溶液的制備：

CF?染料鬼筆肽偶聯(lián)物：將凍干固體溶解在甲醇或水中（對(duì)于300U尺寸為1.5mL或?qū)τ?0U尺寸為0.25mL）以產(chǎn)生200 U/mL。   

其他熒光鬼筆肽綴合物：將300 U凍干固體溶于1.5 mL以產(chǎn)生200U/mL（約6.6uM）的儲(chǔ)備溶液。生物素XX鬼筆肽：將100U凍干固體溶解在1mL甲醇中，得到100U/mL（約10uM）的儲(chǔ)備溶液。熒光鬼筆肽的一個(gè)單位（U）定義為所用材料的量對(duì)一張固定細(xì)胞的顯微鏡載玻片進(jìn)行染色。對(duì)于熒光鬼筆素，一個(gè)單位是相當(dāng)于在200μL的總?cè)旧w積中的5μL的200 U/mL儲(chǔ)備溶液。對(duì)于生物素XX鬼筆肽，一個(gè)單位相當(dāng)于10 uL的100 U/mL儲(chǔ)備溶液總?cè)旧w積為200微升。

圖：CF?488A與FITC相比的相對(duì)光穩(wěn)定性。HeLa細(xì)胞用CF?488A或FITC鬼筆肽偶聯(lián)物染色并連續(xù)暴露在使用汞弧燈顯微鏡的100X物鏡下。圖片為在t=0和t=5秒的光漂白下捕獲   

文獻(xiàn)參考：

• 1) Springer-Verlag New York. 47(1986);

• 2) J Muscle Res Cell Motil. 9, 370(1988);

• 3) Methods Enzymol. 85, 514(1982);

• 4) Eur J Biochem. 165, 125(1987);

• 5)Nature. 326, 805(1987);

• 6)Proc Natl Acad Sci USA. 83, 6272(1986);

• 7) Blood. 69,945(1987);

• 8) Anal Biochem. 200, 199(1992);

• 9) J Cell Biol 105. 1473(1987);

• 10)Proc Natl Acad Sci USA. 77, 980(1980);

• 11) Nature. 284, 405(1980);

• 12) CRC Crit Rev Biochem. 5, 185(1978);

• 13) J Cell Biol. 106, 1229(1988);

• 14) J Cell Biol. 103,265a(1986);

• 15) Eur J Cell Biol. 24, 176(1981);

• 16) Proc Natl Acad Sci USA. 74,5613(1977).

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Biotium公司是一家在熒光技術(shù)領(lǐng)域獨(dú)樹一幟的生物技術(shù)公司，公司位于美國(guó)加利福尼亞的BAY AREA------中外知名首要的生物科技中心。該公司一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)用于生物醫(yī)學(xué)研究的熒光指示劑及其他特殊生化產(chǎn)品。其產(chǎn)品被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生 物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液流動(dòng)檢測(cè)及大規(guī)模藥物篩選等眾多領(lǐng)域。Biotium公司專利產(chǎn)品眾多，包括已經(jīng)被廣泛使用的實(shí)時(shí)PCR定量熒光染料EvaGreen、具有劃時(shí)代意義的凝膠核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq熱啟動(dòng)酶和CF系列蛋白質(zhì)標(biāo)記染料等。 目前，Biotium已將其許多專利技術(shù)授權(quán)給一些主要的國(guó)際生物技術(shù)公司，包括安捷倫、BD生物科學(xué)、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。