前情回顧：PK Mito——諾獎學(xué)者點(diǎn)贊&PNAS封面文章的超分辨線粒體探針  

由于固定探針的可用性有限，線粒體超微結(jié)構(gòu)的超分辨率激發(fā)發(fā)射耗盡(STED)成像主要是用活細(xì)胞進(jìn)行的。 

一種線粒體探針的開發(fā)，既具有光學(xué)優(yōu)勢，又能在固定后保持強(qiáng)熒光信號，這將進(jìn)一步使線粒體研究的超分辨率成像技術(shù)大眾化。為了解決這一挑戰(zhàn)，艾美捷代理品牌Genvivo的科學(xué)家們采用了一種新興的生物偶聯(lián)策略來開發(fā)一種可醛固定的線粒體探針PK Mito Orange FX (PKMO FX)，它可以在固定前后進(jìn)行納米級STED成像。

化學(xué)固定標(biāo)本的熒光標(biāo)記技術(shù)，尤其是免疫標(biāo)記技術(shù)，在超分辨率成像中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，它為線粒體等細(xì)胞結(jié)構(gòu)或生物分子的分布提供了一種方便、精細(xì)的方法。   

盡管各個供應(yīng)商開發(fā)了各種不同的探針，可以對活細(xì)胞中的線粒體進(jìn)行超分辨受激發(fā)射耗盡(STED)成像，但大多數(shù)這些膜電位依賴性熒光團(tuán)在化學(xué)固定后不能很好地保留在線粒體中。缺乏合適的線粒體探針限制了線粒體對活細(xì)胞樣本的STED成像。 Genvivo引入了一種線粒體特異性探針PK Mito Orange FX (PKMO FX)，它具有固定驅(qū)動的交聯(lián)基序，并在線粒體內(nèi)膜中積累。它在化學(xué)固定后具有高熒光保留率，在775 nm處有效耗盡，可以在醛固定前后進(jìn)行納米級成像。 

目前Genvivo證明了該探針與常規(guī)免疫標(biāo)記和其他常用的固定樣品熒光標(biāo)記策略的兼容性。此外，我們發(fā)現(xiàn)PKMO FX促進(jìn)了相關(guān)的超分辨率光學(xué)和電子顯微鏡，使多色熒光圖像和透射電鏡圖像通過線粒體模式的相關(guān)性。我們的探針進(jìn)一步擴(kuò)展了線粒體工具包，用于納米分辨率的多模態(tài)顯微鏡。  

成像結(jié)果賞析：

目前PKMITO?系列主要供應(yīng)3款不同顏色的探針：

參考文獻(xiàn)： 

1、Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging in fixed cells." Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.