前期回顧：SARS-CoV-2靶向檢測試劑盒相關(guān)研究

       光陰似箭，日月如梭，時間箭矢從過去“嗖”的一下來到了中國農(nóng)歷2020年的年末，想想還有半個月就要過年了，大家是否在期待“爆竹聲中辭舊歲”呢？雖然現(xiàn)在禁止放煙花爆竹~~~不過，就今年而言，我想現(xiàn)在大家更多的是想爆竹聲中病毒除吧——新冠病毒。雖然該病毒從未完全消滅過，但是現(xiàn)在的卷土而來，并且來勢洶洶導(dǎo)致很多人都沒有辦法回到老家與家人團圓，同時也限制了我們的出行和吃穿方面，小編過年是要回老家的，回家就要做核酸檢測，昨天在網(wǎng)上預(yù)約核酸檢測，很多檢測機構(gòu)到7號都預(yù)約滿了，心累。也真心希望在牛年里，病毒能夠真的被除去了。

      說到病毒，拿我們現(xiàn)在賊討厭的新冠病毒COVID-19: SARS-coV-2來舉例，它的遺傳物質(zhì)是RNA。如果SARS-CoV-2大流行給我們帶來了任何啟示，那么對RNA修飾的研究現(xiàn)在比以往任何時候都更加重要。 這是否意味著要研究病毒RNA本身以更多地了解不同的改變和表觀遺傳學(xué)變化如何使這些病毒更具彈性和更具感染力，或者研究從細(xì)胞和組織中收集的RNA以了解這些不同病原體對宿主細(xì)胞功能的影響，這項研究努力幾乎是無盡的。RNA m6A的原理和概念我今日就不再贅述，今天就開門見山的聊聊病毒 RNA m6A.

      一 m6A修飾對RNA病毒生命周期的影響

      已知表觀遺傳修飾會影響人冠狀病毒等RNA病毒的生命周期。據(jù)報道，像N6-甲基腺苷(m6A)這樣的修飾腺苷通過調(diào)節(jié)病毒帽結(jié)構(gòu)、病毒基因表達(dá)、病毒子代、先天性感應(yīng)途徑和先天性免疫反應(yīng)來影響特定RNA病毒的生存能力。m6A的獲得或喪失可導(dǎo)致RNA病毒發(fā)生顯著的功能變化，改變宿主細(xì)胞的融合/進入、復(fù)制、傳播、病原體強度和免疫逃避。宿主細(xì)胞的m6A表型組在宿主抵抗力中起著重要作用，病毒感染后也可發(fā)生改變。SARS-CoV-2基因組長度超過29800個核苷酸，根據(jù)RNA甲基化酶復(fù)合物METTL3/14對m6A修飾的特定序列座的存在，包括GGACU(T)、GGACA和GGACC，包含50多個潛在的m6A位點。因此，SARS-CoV-2 RNA中>0.64%的腺苷，或0.18%的堿基可能是m6A。因此，總RNA中m6A的定量和全轉(zhuǎn)錄組m6A圖譜的繪制對于研究m6A相關(guān)的病毒功能和相應(yīng)的機制，以及確定新的抗病毒治療靶點至關(guān)重要。

      二 病毒RNA提取

      無論您是從細(xì)胞，組織還是病毒的樣品開始，有效的RNA分離通常是成功進行實驗的第一步。對于病毒：另一方面，當(dāng)涉及病毒樣品時，諸如病毒滴度低和污染性宿主核酸的高存在之類的挑戰(zhàn)需要使用補充技術(shù)來確保產(chǎn)量和純度符合下游要求。在我們最近的公告文章中，我們概述了可以完成此操作的10種方法（欲知更多詳情，請咨詢小艾獲取喲），因此您可以將其應(yīng)用到最適合您的學(xué)習(xí)的方法中。一種方法是接種細(xì)胞培養(yǎng)物進行病毒擴增，然后收集擴增的病毒體，以與EpiGentek的病毒RNA提取試劑盒一起使用。注意：對于直接從臨床標(biāo)本中提取的病毒RNA，在m6A RNA富集之前，需要額外的處理以去除共提取的宿主DNA和rRNA污染物。

      三 病毒RNA提取試劑盒

      病毒RNA提取產(chǎn)品我們主要有2種：RNA穩(wěn)健的旋轉(zhuǎn)柱和磁性試劑盒我們的每一個試劑盒都是為了提取高質(zhì)量的RNA而設(shè)計的，除了用于RT-PCR之外，還可以用于其他下游應(yīng)用。我們的試劑盒在提取方法以及通量選項（高/手動）的類型上有所不同，因此無論您的實驗室需要什么，我們的試劑盒都可以幫助您獲得隨時可用的純化病毒RNA。我們的各種磁珠和自旋柱試劑盒可以從不同的樣品來源（鼻腔/鼻咽拭子、細(xì)胞/組織）和物種（病毒、哺乳動物）中分離RNA。洗滌劑和潮解鹽用于裂解細(xì)胞和滅活RN酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)使RNA堿基與磁珠結(jié)合到自旋柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時污染物被有效地洗去。純核酸用水緩沖液洗脫，不需要苯酚提取或酒精沉淀。具體操作流程如下：

      產(chǎn)品：

      結(jié)果：

      P-9107

      p-9108：

      p-9109：

      以上便是本期全部內(nèi)容，大家想要了解更多病毒RNA提取和純化方面的信息，請咨詢小艾喲！

      下期為大家?guī)?strong>病毒RNA m6A甲基化研究方面的產(chǎn)品和信息，敬請期待~~

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