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上周我們向大家介紹了病毒RNA用于m6A甲基化研究的樣本的提取和純化方法,這周將為大家?guī)韒6A甲基化研究相關(guān)的產(chǎn)品。
一 病毒RNA m6A甲基化研究流程
上周給大家說了病毒RNA的提取和純化,如果大家的樣本是細(xì)胞或者組織,就參考流程圖的右邊部分。關(guān)于組織和細(xì)胞的m6A甲基化研究大家應(yīng)該都很清楚,那么病毒RNA m6A研究有什么不同呢?

上面這個(gè)流程算是總結(jié)版本的。一般我們研究m6A逃不過三大方面:m6A RNA的定量; m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶和去甲基化酶活性分析;m6A RNA富集、RNA特異性甲基化分析和文庫建立。
1.病毒RNA m6A定量檢測:
RNA甲基化是一種可逆的翻譯后修飾,對(duì)大量的生物過程產(chǎn)生表觀遺傳學(xué)影響,這些都可以發(fā)生在病毒和非病毒衍生的RNA中。其中最常見的是m6A甲基化,占所有RNA甲基化的80%以上,其次是5-mC甲基化,它可以發(fā)生在各種RNA分子中。如果您的研究打算研究RNA中m6A或5-mC的全球甲基化水平,我們推薦的比色法和熒光法試劑盒可以幫助提供快速、準(zhǔn)確的總體水平定量。然而,也必須知道,如果使用病毒起始材料,這個(gè)過程會(huì)略有變化。如果是這種情況,您需要確保可以提高所產(chǎn)生的總RNA的產(chǎn)量,因?yàn)閺牟《酒鹗疾牧鲜占牡土客停瑹o法用于下游。 我們建議參考我們最近的公告文章的各種方法的病毒純化的想法(有需要的小伙伴可聯(lián)系小艾喲),如何確保總RNA的質(zhì)量,在您的實(shí)驗(yàn)流程的后期使用。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
| cat# P-9005 | EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit (Colorimetric) | 在3h 45min內(nèi)對(duì)RNA中的N6-甲基腺苷(m6A或6mA)進(jìn)行比色定量。 |
| cat# P-9008 | EpiQuik m6A RNA Methylation Quantification Kit (Fluorometric) | 在3h 45min分鐘內(nèi)熒光定量RNA中的N6-甲基腺苷(m6A或6mA) |
| cat# P-9015 | MethylFlash Urine N6-methyladenosine (m6A) Quantification Kit (Colorimetric) | 使用抑制性競爭性ELISA在4小時(shí)內(nèi)對(duì)尿液中的m6A進(jìn)行比色定量。 |
2.m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶和去甲基化酶活性分析
如果您計(jì)劃研究RNA甲基化酶或去甲基化酶的活性/抑制,我們建議使用我們強(qiáng)大的核提取試劑盒,它速度快,確保分離后酶活性保持不變。一旦收集到核提取液,就可以進(jìn)入有助于測量甲基化酶或去甲基化酶活性/抑制的檢測。我們的比色ELISA試劑盒允許對(duì)提取的核樣品進(jìn)行高通量或手動(dòng)通量分析,并進(jìn)行了優(yōu)化,以確保背景信號(hào)保持在較低水平,因此測量是準(zhǔn)確和可靠的。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
| cat# P-9013 | Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric) | 基于ELISA的5小時(shí)內(nèi)FTO、ALKBH5等活性/抑制的定量分析。 |
| cat# P-9019 | Epigenase m6A Methylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric) | 基于酶聯(lián)免疫吸附法的METTL3、METTL14等在5小時(shí)內(nèi)對(duì)多種物種的活性/抑制性進(jìn)行定量。 |
3.m6A RNA富集和文庫建立
一旦工作流程中的其他步驟完成,一項(xiàng)研究可能最終會(huì)尋求富集基因組中存在m6A的部分,并通過構(gòu)建文庫為下一代測序準(zhǔn)備這些片段。我們下面列出的檢測試劑盒都允許富集m6A RNA,而EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq試劑盒為同時(shí)構(gòu)建文庫提供了額外的功能。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
| cat# P-9018 | EpiQuik CUT&RUN m6A RNA Enrichment Kit | 基于CUT&RUN的MeRIP,增加特異性和信號(hào)。 |
| cat# P-9016 | EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq Kit | 基于CUT&RUN的一體化MeRIP和NGS文庫制備。 |
4.m6A RNA抗體
如前所述,m6A是最豐富的mRNA修飾,因此,通常是研究表觀遺傳RNA修飾的研究人員感興趣的主題。此類研究通常包含單克隆抗體和多克隆抗體,以驗(yàn)證結(jié)果并幫助了解一旦宿主感染后這種特定修飾如何影響病毒的發(fā)展和疾病的影響。 我們的抗體已在所有列出的應(yīng)用中得到驗(yàn)證,并為希望在大批量購買之前嘗試嘗試想法的實(shí)驗(yàn)室提供試驗(yàn)規(guī)模。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品描述 |
| cat# A-1801 | N6-methyladenosine (m6A) Polyclonal Antibody | 經(jīng)過驗(yàn)證的應(yīng)用。DB、ELISA、ICC、IP、MeRIP、核苷酸陣列。 |
| cat#A-1802 | N6-methyladenosine (m6A) Monoclonal Antibody [2H6] | 經(jīng)過驗(yàn)證的應(yīng)用。DB, ELISA, IF, IP, MeRIP, 核苷酸陣列。 |
看到上面這兩種抗體的應(yīng)用很多,基本涵蓋我們實(shí)驗(yàn)可能應(yīng)用到的實(shí)驗(yàn)類型,但是呢有個(gè)非常常見的應(yīng)用卻沒有,沒錯(cuò),就是WB。很多小伙伴問我們的這個(gè)抗體可以做WB不?每次都很遺憾的說不可以。但是,現(xiàn)在我們有了可以做WB的m6A抗體!!!為了彌補(bǔ)小伙伴們的遺憾,我們最近簽約代理了一個(gè)新的品牌——Synaptic Systems(SySy),SySy是德國著名的品牌,專注于研發(fā)和生產(chǎn)針對(duì)突觸和神經(jīng)科學(xué)相關(guān)抗體,以及用于細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)和高分辨率顯微鏡的各種抗體,他們的抗體被諸多高分文章引用,產(chǎn)品獨(dú)特且專業(yè)。他們的家的m6A抗體信息如下:
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品應(yīng)用/適用物種 | 品牌 |
| cat# 202-003 | m6A - 202 003 | WB / IP / ICC / IHC-P / ELISA 人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物 | Synaptic Systems |
| cat#202-011 | m6A - 202 011 | WB 人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物 | Synaptic Systems |
| cat# 202-111 | m6A - 202 111 | WB / IP / ELISA 人 / 大鼠 / 小鼠 / 真核生物 / 原核生物 | Synaptic Systems |
| 這三個(gè)產(chǎn)品的參考文獻(xiàn)也非常多喲,各位小伙伴想要了解的可咨詢小艾喲! | |||
最后的最后,總結(jié)一下病毒RNA m6A研究流程與普通的組織和細(xì)胞樣本的區(qū)別:其實(shí)沒啥區(qū)別,用的試劑盒基本都一樣,方法也是一樣的,但是區(qū)別在哪呢?就是病毒RNA的量和純度問題,這個(gè)會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程,所以為了更好地完成實(shí)驗(yàn)課題,各位小伙伴要制備好的病毒RNA樣本哦!
作為一家具有高端的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!
艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、Caisson Labs、Cayman Chemical、Cell Biolabs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Demeditec、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、Synaptic Systems(SySy)、US Biological等,可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
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