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Reddot Biotech豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒試劑制備方案

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2023-02-22     
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豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒是夾心酶免疫測定法,用于體外定量測量豬血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解物,細胞培養(yǎng)上清液和其他生物體液中的TRY。  



作為Reddot Biotech全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Reddot Biotech熱銷產品豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情
豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒RDR-TRY-p查看


豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒:

貨號RDR-TRY-p
檢測范圍1.56-100ng/毫升
敏感性0.58克/毫升
檢測長度1-3小時
方法三明治
存儲所有組件均可在 -20°C 下儲存長達 16 個月
即用型預稀釋的檢測試劑和增強的穩(wěn)定性
樣品類型血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解物、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物體液。


樣本采集和存儲: 

血清-使用血清分離管,讓樣品在室溫下凝結2小時或在4°C過夜,然后以約1000×g離心20分鐘。立即測定新鮮制備的血清或將樣品等分保存在-20°C或-80°C以備后用。避免反復凍融循環(huán)。  

血漿-使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。收集后30分鐘內,在2-8°C下以1000×g離心樣品15分鐘。立即取出血漿并進行檢測,或將樣品等分保存在-20°C或-80°C以備后用。避免反復凍融循環(huán)。 

組織勻漿-組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。對于該測定,應在冰冷的PBS(0.01mol/L,pH7.0-7.2)中沖洗組織以徹底除去過量的血液并在均質化之前稱重。將組織切成小塊,并在冰上用玻璃勻漿器在5-10ml PBS中將其勻漿(Micro Tissue Grinders也起作用)。所得懸浮液應用超聲波細胞破碎器超聲處理或進行2次冷凍/解凍循環(huán)以進一步破壞細胞膜。然后,以5000×g離心勻漿5分鐘。取出上清液并立即測定或等分并儲存在≤-20°C。   


細胞裂解物-在根據以下方向進行測定之前,必須裂解細胞。

  • 貼壁細胞應與胰蛋白酶分離,然后離心收集(懸浮細胞可直接離心收集)。

  • 在冷PBS中洗滌細胞3次。

  • 將細胞重懸于PBS(1×)中并使細胞超聲處理4次(或在≤-20℃冷凍細胞。輕輕混合解凍細胞。重復冷凍/解凍循環(huán)3次)。

  • 在2-8℃下以1500×g離心10分鐘以除去細胞碎片。

  • 細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體-以1000×g離心樣品20分鐘。立即去除顆粒并進行分析,或將樣品等分保存在-20°C或-80°C。避免反復凍融循環(huán)。

注意:

  • 5天內使用的樣品可以儲存在4°C,否則樣品必須儲存在-20°C(≤1個月)或-80°C(≤2個月),以避免生物活性和/或污染。

  • 明顯的溶血會影響抗體-抗原反應。具有任何溶血跡象的樣品不可用于該測定。

  • 進行測定時,將樣品置于室溫。


豬胰蛋白酶 (TRY) ELISA試劑盒試劑制備:

  • 使用前將所有試劑盒組分和樣品置于室溫(18-25°C)。

  • 標準品-用1.0 mL標準稀釋劑重新配制標準品,在室溫下保持10分鐘,輕輕搖動(不要泡沫)。 儲備溶液中標準品的濃度為100ng/mL。準備7個含有0.5 mL標準稀釋劑的試管,并根據下圖所示使用稀釋的標準品生產雙稀釋系列。在下一次轉移之前徹底混合每個管。準備7分的稀釋系列;例如:100 ng/mL,50 ng/mL,25 ng/mL,12.5 ng/mL,6.25 ng/mL,3.125 ng/mL,1.562 ng/mL,最后一個帶有標準稀釋劑的EP管為空白0 ng/mL。

  • 檢測溶液A和檢測溶液B-檢測溶液A和B已經處于正確的濃度,不需要進一步稀釋。

  • 洗滌液-用580 mL去離子水或蒸餾水稀釋20 mL洗滌液濃縮液(30×)以制備600 mL洗滌液(1×)。

  • TMB底物-用無菌吸頭吸取所需劑量的溶液。不要將殘留的溶液傾倒回小瓶中。

注意:

  • 不要直接在孔中進行連續(xù)稀釋。

  • 在進行測定后15分鐘內準備標準品。

  • 按照說明小心重構標準品,避免起泡并輕輕混合直至晶體完全溶解

  • 重組標準只能使用一次。

  • 如果在洗滌液濃縮液(30×)中形成晶體,則溫熱至室溫并輕輕混合直至晶體完全溶解。

  • 試劑制備過程中使用的任何污染水或容器都會影響檢測結果。


Reddot Biotech是由一支擁有35年醫(yī)療管理經驗團隊創(chuàng)辦的加拿大本土品牌,其已在ELISA產品線上深耕7個年頭,并且仍在不斷前進中。產品的質量保證也讓其越來越多被“收納進”文獻當中,產品線包括ELISA試劑盒、抗體、少量生化試劑,其中ELISA試劑盒超過6000+,物種類型較多:人;大鼠;小鼠;犬科類;牛科;魚;雞;豬;兔;山羊;綿羊;猿;馬;豚鼠等,像激素類指標促卵泡素(FSH)、促黃體激素(LH),新冠相關病毒受體ACE2、ACE以及腫瘤免疫相關的指標精氨酸酶(ARG)等已是熱門應用指標。  


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