大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫分析法，用于大鼠血清、血漿和其他生物液體中TSH的體外定量測(cè)量。  

  作為Reddot Biotech全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Reddot Biotech熱銷產(chǎn)品大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒：

樣本采集和存儲(chǔ)：

• 血清-使用血清分離管，使樣品在室溫下凝結(jié)2小時(shí)或在4°C下過(guò)夜，然后在約1000×g離心20分鐘。立即測(cè)定新鮮制備的血清，或?qū)悠穬?chǔ)存在-20°C或-80°C的等分試樣中，以備日后使用。避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

• 血漿-使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內(nèi)，在2-8°C下以1000×g離心樣品15分鐘。立即取出血漿并進(jìn)行化驗(yàn)，或?qū)悠穬?chǔ)存在-20°C或-80°C的等分試樣中，以備日后使用。避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

• 其他生物流體.在1000×g條件下離心樣品20分鐘。去除顆粒并立即測(cè)定或在-20°C或-80°C條件下將樣品儲(chǔ)存在等分試樣中。避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

  注：

• 5天內(nèi)使用的樣品可在4°C下儲(chǔ)存，否則樣品必須在-20°C（≤1個(gè)月）或-80°C（≥2個(gè)月）下儲(chǔ)存，以避免生物活性損失和/或污染。

• 明顯的溶血會(huì)影響抗體抗原反應(yīng)。有溶血跡象的樣品不可用于本試驗(yàn)。進(jìn)行分析時(shí)，將樣品置于室溫

大鼠促甲狀腺激素 (TSH) ELISA試劑盒化驗(yàn)程序：

• 確定稀釋標(biāo)準(zhǔn)、空白和樣品的孔。準(zhǔn)備7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔，1個(gè)空白孔。將100μL標(biāo)準(zhǔn)溶液（參見(jiàn)試劑制備）、空白溶液和樣品分別加入適當(dāng)?shù)目字小Ｓ冒迕芊鈩└采w。在37°C下孵育90分鐘。

• 從每個(gè)井中取出液體，不要清洗。

• 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)溶液A。用平板密封劑覆蓋后，在37°C下孵育45分鐘。

• 吸入溶液，并使用噴射瓶、多通道移液管、歧管分配器或自動(dòng)清洗機(jī)，用300μL 1×清洗溶液清洗每個(gè)孔，并靜置1-2分鐘。通過(guò)在吸水紙上輕敲板，將所有孔中的剩余液體完全清除。徹底清洗3次。最后一次洗滌后，通過(guò)抽吸或潷析去除剩余的洗滌緩沖液。翻轉(zhuǎn)盤子，用吸水紙吸住。

• 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)溶液B。用平板密封劑覆蓋后，在37°C下孵育45分鐘。

• 如步驟4所述，重復(fù)抽吸/洗滌過(guò)程共5次。

• 向每個(gè)孔中加入90μL基質(zhì)溶液。用新的板材密封劑覆蓋。在37°C下培養(yǎng)15-25分鐘（不要超過(guò)30分鐘）。避光。加入基質(zhì)溶液后，液體將變?yōu)樗{(lán)色。

• 向每個(gè)孔中加入50μL停止溶液。加入停止溶液后，液體將變黃。輕敲盤子的側(cè)面，混合液體。如果顏色變化不均勻，輕輕拍打盤子以確保充分混合。

• 去除盤子底部的水滴和指紋，并確認(rèn)液體表面沒(méi)有氣泡。運(yùn)行微板讀取器，立即在450 nm處進(jìn)行測(cè)量。

注：

• 化驗(yàn)準(zhǔn)備：為每個(gè)實(shí)驗(yàn)保留適當(dāng)數(shù)量的孔，并從微量板上移除多余的孔。剩余的井應(yīng)重新密封并儲(chǔ)存在-20°C。

• 樣品或試劑添加：請(qǐng)使用新制備的標(biāo)準(zhǔn)品。小心地向孔中加入樣品，并輕輕混合以避免起泡。不要觸摸井壁。對(duì)于程序中的每個(gè)步驟，將試劑或樣品添加到測(cè)定板的總分配時(shí)間不應(yīng)超過(guò)10分鐘。這將確保每個(gè)移液步驟的經(jīng)過(guò)時(shí)間相等，不會(huì)中斷。雖然不需要，但建議復(fù)制所有標(biāo)準(zhǔn)和試樣。為避免交叉污染，在添加標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和試劑之間更換移液管尖端。此外，對(duì)每種試劑使用單獨(dú)的容器。

• 孵育：為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果，孵育步驟中需要適當(dāng)粘附板密封劑。在培養(yǎng)步驟之間，不要讓井長(zhǎng)時(shí)間處于未覆蓋狀態(tài)。一旦試劑添加到孔條中，在測(cè)定過(guò)程中任何時(shí)候都不要讓孔條干燥。必須控制培養(yǎng)時(shí)間和溫度。

• 清洗：清洗程序至關(guān)重要。在每個(gè)步驟中完全去除液體對(duì)于良好的性能至關(guān)重要。最后一次洗滌后，通過(guò)抽吸或潷析去除剩余的洗滌液，并去除盤子底部的水滴或指紋。洗滌不足將導(dǎo)致精度差和錯(cuò)誤的吸光度讀數(shù)升高。

• 反應(yīng)時(shí)間的控制：添加TMB底物后觀察顏色的變化（例如，每10分鐘觀察一次），如果顏色太深，請(qǐng)?zhí)崆疤砑油Ｖ谷芤海员苊夥磻?yīng)過(guò)強(qiáng)，從而導(dǎo)致吸光度讀數(shù)不準(zhǔn)確。

• TMB基板對(duì)光敏感，容易被氧化劑污染。請(qǐng)保護(hù)其免受光照和潛在污染源的影響。

• 環(huán)境濕度可能影響從試劑盒獲得的結(jié)果。如果設(shè)施內(nèi)的濕度低于60%，建議使用加濕器

Reddot Biotech是由一支擁有35年醫(yī)療管理經(jīng)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)創(chuàng)辦的加拿大本土品牌，其已在ELISA產(chǎn)品線上深耕7個(gè)年頭，并且仍在不斷前進(jìn)中。產(chǎn)品的質(zhì)量保證也讓其越來(lái)越多被“收納進(jìn)”文獻(xiàn)當(dāng)中，產(chǎn)品線包括ELISA試劑盒、抗體、少量生化試劑，其中ELISA試劑盒超過(guò)6000+，物種類型較多：人；大鼠；小鼠；犬科類；牛科；魚；雞；豬；兔；山羊；綿羊；猿；馬；豚鼠等，像激素類指標(biāo)促卵泡素（FSH）、促黃體激素（LH），新冠相關(guān)病毒受體ACE2、ACE以及腫瘤免疫相關(guān)的指標(biāo)精氨酸酶（ARG）等已是熱門應(yīng)用指標(biāo)。