受傷組織啟動(dòng)了一系列復(fù)雜而有結(jié)構(gòu)的事件，以修復(fù)受損區(qū)域。這些事件可能包括通過血管生成因子增加血管化、增加細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)沉積，以及炎癥免疫細(xì)胞的浸潤，作為破壞壞死組織的過程的一部分。創(chuàng)傷愈合過程開始時(shí)，細(xì)胞極化朝向創(chuàng)傷，發(fā)起突出、遷移并關(guān)閉創(chuàng)傷區(qū)域。這些過程反映了單個(gè)細(xì)胞以及整個(gè)組織復(fù)雜的行為。 

多年來，研究人員一直使用創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)來研究細(xì)胞極化、組織基質(zhì)重塑和細(xì)胞增殖遷移速率。這些實(shí)驗(yàn)還揭示了Rho家族GTP酶、微管、高爾基體在細(xì)胞極性和肌動(dòng)蛋白骨架結(jié)構(gòu)調(diào)控中的作用，以及p53在細(xì)胞遷移中的重要性。然而，傳統(tǒng)的"劃痕創(chuàng)傷"實(shí)驗(yàn)存在一些缺點(diǎn)：缺乏定義的創(chuàng)傷表面積和細(xì)胞間隙，導(dǎo)致結(jié)果不一致和孔板間的變異；同時(shí)，創(chuàng)傷邊緣的細(xì)胞損傷可能阻礙細(xì)胞遷移到創(chuàng)傷部位進(jìn)行愈合。

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實(shí)驗(yàn)原理：

CytoSelect? 24孔創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)試劑盒包含2個(gè)24孔板，每個(gè)板上有12個(gè)專有處理的塑料插入物。這些插入物創(chuàng)建了一個(gè)具有0.9毫米定義間隙的創(chuàng)傷區(qū)域，用于測量細(xì)胞的遷移和增殖速率。遷移的細(xì)胞能夠伸出突起，最終侵入并關(guān)閉創(chuàng)傷區(qū)域。可以使用手動(dòng)固定和顯微鏡成像來確定細(xì)胞的增殖和遷移速率。提供了一種固定溶液，用于在特定時(shí)間點(diǎn)停止細(xì)胞的活動(dòng)。還提供了細(xì)胞染色和DAPI染色，以便使用光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡觀察結(jié)果。

結(jié)果示例： 以下圖示展示了使用CytoSelect? 24孔創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)試劑盒的典型結(jié)果。這些數(shù)據(jù)不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

圖2：MEF/STO細(xì)胞的閉合百分比。使用CytoSelect? 24孔創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)試劑盒對STO細(xì)胞進(jìn)行了測試。細(xì)胞培養(yǎng)了24小時(shí)，直到形成單層，然后移除插入物開始創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)。使用相差顯微鏡（未顯示）、DAPI標(biāo)記和細(xì)胞染色來監(jiān)測細(xì)胞的閉合百分比（0%、50%、75%和100%）。   

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