1.取 100ul感受態(tài)細(xì)胞于冰浴上融化。

2. 加入 1ul純質(zhì)粒或連接產(chǎn)物，輕輕吹打混勻，冰浴 30 min。

3. 將菌液放入 42℃水浴中熱激 90 秒，立即放入冰浴中 2 min。

4. 加入 0.9ml SOC，于 37℃恒溫?fù)u床上 200rpm×1hr 溫育。

5. 將菌液 4000rpm/min 離心 3min，留 200ul上清將菌體打散，均勻涂布于含適當(dāng)

抗生素的瓊脂平板表面，平板于 37℃倒置培養(yǎng)過(guò)夜。

i.

注：新倒的平板可于 37℃培養(yǎng)箱中預(yù)先放置數(shù)小時(shí)至過(guò)夜干燥。

ii.

當(dāng)轉(zhuǎn)化的是 TA 克隆連接產(chǎn)物時(shí)可在菌液中加入 8ul 1M IPTG 和 40ul20mg/ml X-gal 以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。