TECHNICAL COLUMN
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今天我們安利二個(gè)實(shí)用的miRNA的在線數(shù)據(jù)庫(kù)以及重點(diǎn)介紹如何通過(guò)篩選到的靶基因或者h(yuǎn)ub基因搜索與之相關(guān)的miRNAs。
1,安利數(shù)據(jù)庫(kù)miRTarBase v8.0
當(dāng)我們需要尋找miRNA時(shí)推薦使用數(shù)據(jù)庫(kù)miRTarBase v8.0非常便捷的網(wǎng)站(圖1)。點(diǎn)擊download,即可跳轉(zhuǎn)到下載頁(yè)面(圖2),可以下載經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的或者文獻(xiàn)提及存在共表達(dá)的miRNA與靶基因互作數(shù)據(jù),這里的數(shù)據(jù)是按照物種統(tǒng)計(jì)的。

圖1. miRTarBase主頁(yè)

圖2. miRTarBase下載頁(yè)面
點(diǎn)擊圖1的Statistics,還會(huì)跳轉(zhuǎn)到數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)頁(yè)面,不得不說(shuō),這個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)納入的還是非常全的,有人、小鼠、大鼠還有其他物種的;使用熒光素酶檢測(cè)的、芯片檢測(cè)的、測(cè)序檢測(cè)的還有CLIP-seq檢測(cè)的,都有(圖3)。

圖3. miRTarBase v8.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)頁(yè)面
點(diǎn)擊圖1中的Search,即可跳轉(zhuǎn)到檢索頁(yè)面。另外該數(shù)據(jù)庫(kù)還是可以基于實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行批量檢索(圖4)。

圖4. miRTarBase v8.0數(shù)據(jù)批量檢索
之后,就可以去構(gòu)建miRNAs-hub genes網(wǎng)絡(luò)圖了。
2、安利miRWalk 3.0
另外一個(gè)比較友好的在線數(shù)據(jù)庫(kù)叫miRWalk 3.0,它是一個(gè)很便捷的檢索網(wǎng)站(圖5)。中間有一個(gè)檢索框,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)種屬進(jìn)行接下來(lái)的檢索。比如檢索基因名稱XBP1,只需在Gene之后的搜索框輸入XBP1即可,就會(huì)跳轉(zhuǎn)到相關(guān)頁(yè)面(圖6)。同樣地,輸入miRNA名稱也會(huì)跳轉(zhuǎn)到相關(guān)頁(yè)面(圖7)。

圖5. miRWalk 3.0網(wǎng)站頁(yè)面

圖6. miRWalk 3.0網(wǎng)站檢索基因名稱跳轉(zhuǎn)頁(yè)面

圖7. miRWalk 3.0網(wǎng)站檢索miRNA名稱跳轉(zhuǎn)頁(yè)面
在圖5中,下半部分還有一個(gè)Target Mining,后兩個(gè)不用看,造成的假陽(yáng)性太大,只看前兩個(gè)。這個(gè)可以進(jìn)行批量上傳miRNA和基因名稱,從而可以批量獲得二者結(jié)合數(shù)據(jù)。值得注意的是,每個(gè)miRNA和基因名稱必須準(zhǔn)確,而且每行一個(gè)(圖8、圖9)。

圖8. miRNA數(shù)據(jù)挖掘批量上傳頁(yè)面

圖9. 基因名稱數(shù)據(jù)挖掘批量上傳頁(yè)面
這些數(shù)據(jù)都是可以下載,然后Excel打開的。打開之后,就可以去構(gòu)建miRNAs-hub genes網(wǎng)絡(luò)圖了。如何去構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)圖,可以使用Cytoscape進(jìn)行圖片繪制。
3、使用Cytoscape構(gòu)建miRNA-hub基因網(wǎng)絡(luò)圖
接下來(lái),我們介紹一下如何使用Cytoscape構(gòu)建miRNA-hub基因網(wǎng)絡(luò)圖。首先得有一個(gè)關(guān)于miRNA與靶基因相關(guān)聯(lián)的表格文件以及該miRNA與靶基因的屬性的表格文件,如下圖所示:

之后就可以使用Cytoscape進(jìn)行miRNA-hub基因網(wǎng)絡(luò)圖繪制了。將上述兩個(gè)表格分別導(dǎo)入Cytos cape即可。

軟件會(huì)根據(jù)導(dǎo)入的屬性表格文件信息判定哪一個(gè)是miRNA,哪一個(gè)是靶基因,所以只需要在左側(cè)的style中將二者修改為不同的格式,然后導(dǎo)出圖片就可以啦。即如下圖所示,將顏色和形狀根據(jù)attribute進(jìn)行修改,修改完成的圖片導(dǎo)出就行,另外導(dǎo)出時(shí)候像素一定要選擇最大像素,這樣可以防止組圖時(shí)候因圖片像素問(wèn)題還得返工。

看完教程miRNA-hub基因網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建是不是簡(jiǎn)單易上手,還不趕緊實(shí)操起來(lái)吧。需要軟件歡迎留言給我們哦~
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