PCR的原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解 鏈成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在實驗中 發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度 變化控制DNA的變性和復性，加入設計引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復 制。

       PCR體系和方法：PCR管加熱使模板變性, 退火使引物 與模板DNA互補,延伸需將反應溫度升至 中溫( 72℃),在Tap多聚酶的作用下,以 dNTP為原料,以引物為復制的起點,合成 新鏈。如此重復改變反應溫度,即高溫變性、 低溫退火和中溫延伸三個階段為一個循 環(huán),每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù) 放大一倍,一般樣品是經(jīng)過30次循環(huán),最終 使基因放大了數(shù)百萬倍; 將擴增產(chǎn)物進行 電泳,經(jīng)溴化乙錠染色,在紫外燈照射下肉 眼能見到擴增特異區(qū)段的DNA帶。

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