干擾素γ（IFN-γ）是一種二聚體可溶性細(xì)胞因子，是Ⅱ型干擾素類群中唯一的成員。IFN-γ具有抗病原體、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤特性，能夠促進(jìn)自然殺傷（NK）細(xì)胞的活性，增加抗原呈遞，激活誘導(dǎo)型一氧化氮合酶，誘導(dǎo)活化漿細(xì)胞產(chǎn)生IgG2a，并通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子T-bet促進(jìn)Th1細(xì)胞分化。鑒于該細(xì)胞因子在免疫反應(yīng)中的重要作用，已有多種定量IFN-γ的方案。其中最簡(jiǎn)單的可能是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA），該方法通過抗體捕獲細(xì)胞因子，用于檢測(cè)血清樣本和組織培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子的水平。此外，還有基于流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)方法，通過細(xì)胞通透化處理后，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)IFN-γ。通常，含有該細(xì)胞因子的細(xì)胞比例較低，且無法表明該蛋白是否具有功能、是否會(huì)分泌，也不能判斷其是否針對(duì)特定抗原或多種抗原產(chǎn)生反應(yīng)。為了檢測(cè)針對(duì)特定抗原的IFN-γ反應(yīng)，研究者開發(fā)了細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)法。在此方法中，CD4?和CD8?T細(xì)胞在抗原呈遞細(xì)胞（APC）和目標(biāo)蛋白肽段的刺激下進(jìn)行培養(yǎng)，隨后通過ELISA檢測(cè)上清液中的IFN-γ水平。

近年來，與ELISA相比，市面上出現(xiàn)了多種?基于流式細(xì)胞術(shù)的珠陣列分析方法（bead array assays），這些方法能夠更靈敏地在納克水平檢測(cè)低濃度細(xì)胞因子。然而，盡管這些檢測(cè)法能夠定量檢測(cè)分泌的總細(xì)胞因子，但無法區(qū)分是少數(shù)細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，還是大量細(xì)胞分泌少量細(xì)胞因子。分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞數(shù)量反映了針對(duì)特定免疫靶標(biāo)的細(xì)胞數(shù)量。因此，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT）檢測(cè)法是一種高靈敏度的免疫檢測(cè)法，能夠在單細(xì)胞水平檢測(cè)細(xì)胞因子分泌細(xì)胞的頻率。抗原特異性ELISPOT檢測(cè)法能夠定量檢測(cè)特定細(xì)胞類型（CD4?或CD8?T細(xì)胞）針對(duì)特定抗原分泌IFN-γ的細(xì)胞數(shù)量。

在ELISPOT檢測(cè)板上，特異性針對(duì)IFN-γ的抗體能夠在細(xì)胞分泌后立即捕獲IFN-γ，其檢測(cè)下限通常可達(dá)10萬分之一的細(xì)胞。該檢測(cè)法的高靈敏度使其特別適用于研究特量細(xì)胞群體。

Elispot研究專家Mabtech提供的爆款小鼠IFN-γ Elispot試劑盒（3321-4AST-2, ELISpot Plus: Mouse IFN-γ (ALP)）備受科研用戶者的歡迎，該ELISpot 試劑盒用于通過ELISpot檢測(cè)法計(jì)數(shù)分泌IFN-γ的小鼠細(xì)胞。

將小鼠脾細(xì)胞（15萬個(gè)細(xì)胞/孔）在不含或存在刀豆蛋白A（ConA）的條件下孵育過夜，用ELISpot分析分泌IFN-y的細(xì)胞數(shù)量。

為了方便更多研究者了解IFN-γ Elispot試劑盒（貨號(hào)3321-4AST-2和3321-4AST-10）試劑盒的原理與操作，作為Mabtech品牌中國(guó)區(qū)代理商，艾美捷科技特為您漢化翻譯3321-4AST-2和3321-4AST-10的英文操作說明書。