1956年，Pearson等人發(fā)現(xiàn)用含有熱殺死的結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，MT）顆粒的完全弗氏佐劑（Complete Freund's Adjuvant, CFA）免疫的大鼠，發(fā)展出多發(fā)性關(guān)節(jié)炎。這種被稱為佐劑誘導性關(guān)節(jié)炎（Adjuvant-Induced Arthritis, AIA）的關(guān)節(jié)炎模型，以前被用作類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）的模型。然而，由于組織學和免疫學特征上的差異，AIA是反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎而非RA的更為恰當?shù)哪Ｐ汀?/span>

佐劑誘導性關(guān)節(jié)炎(AIA)方案和預期結(jié)果

通過單次皮下注射含有10mg/ml MT（貨號#7027）的CFA（0.05-0.1ml），可以輕易地在易感大鼠品系中誘導出AIA（根據(jù)研究目的，選擇足墊或尾基部注射）。每次注射前，必須重新懸浮佐劑，因為分枝桿菌顆粒會沉淀。未能重新懸浮佐劑可能導致分枝桿菌顆粒分布不一致。

1) 足墊注射

將含有10mg/ml MT的CFA 0.05ml皮下注射到后腳的足墊中。注射后30分鐘內(nèi)將觀察到嚴重和急性炎癥。炎癥在3-4天內(nèi)達到高峰，并持續(xù)20-25天。非注射爪通常在注射后12-14天內(nèi)出現(xiàn)繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎。關(guān)節(jié)炎在發(fā)病后2-3天內(nèi)達到高峰，并持續(xù)20至25天。

2) 尾基部注射

在尾基部皮下注射含有10mg/ml MT的CFA 0.1ml。關(guān)節(jié)炎將在注射后12-14天內(nèi)出現(xiàn)在一個或所有爪子中，并持續(xù)20至25天。

圖1. 使用大鼠AIA模型評估抗炎藥物: 在第0天，通過在SD大鼠的右后爪足墊注射0.05ml CFA（10mg/ml MT），誘導了AIA。注射后爪子立即出現(xiàn)嚴重炎癥。在注射后第12-14天，左后爪足墊發(fā)展出繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎。通過比較處理和未處理大鼠的足墊體積，確定了抗炎測試化合物的效果。

Chondrex可提供含有10和20mg/ml特制熱殺死的MT的完全弗氏佐劑（CFA）（貨號#7027和7024）。然而，含有1mg/ml MT的CFA很少能有效誘導AIA。為了有效誘導，推薦使用含有10mg/ml MT的CFA，盡管含有5mg/ml MT的CFA也能夠誘導AIA。

將CFA懸浮后，將其吸入一個連接到25號針頭的1ml玻璃注射器中。建議在為每只大鼠注射前，通過在手中滾動注射器來重新懸浮CFA。

評估佐劑誘導性關(guān)節(jié)炎(AIA)

1. 臨床關(guān)節(jié)炎評分: 可以通過視覺檢查對關(guān)節(jié)炎的嚴重程度進行評分。Chondrex建議對每個爪子的關(guān)節(jié)炎進行0到4分的評分。評分建議如下，供參考。尾基部注射方法對所有四個爪子的關(guān)節(jié)炎進行評分（最高得分16分），而足墊注射方法對三個爪子的關(guān)節(jié)炎進行評分，不包括注射佐劑的爪子（最高得分12分）。

2. 爪子厚度和體積評估：可以通過測量爪子的厚度和體積，客觀確定與關(guān)節(jié)炎嚴重程度相關(guān)的足部腫脹。可以使用卡尺測量爪子厚度，而爪子體積可以使用體積描記儀進行測量。圖1提供了通過測量爪子體積來評估抗炎藥物的樣本數(shù)據(jù)。

3. 局部高溫評估：局部高溫是急性炎癥反應(yīng)嚴重程度的非常準確的指標，因其簡單和敏感性而強烈推薦。在進行這種測量時，可以使用接觸式溫度計測量每個爪子的表面溫度。

4. 細胞因子和趨化因子分析：在AIA大鼠中，血清和爪子提取物中的細胞因子和趨化因子水平可能與炎癥狀態(tài)相關(guān)，并在尤其是急性和慢性炎癥階段顯示出不同的特征。此外，抗炎治療會改變這些細胞因子和趨化因子的水平。為了評估這些動態(tài)變化，必須根據(jù)標志物在適當?shù)臅r期制備樣本。