I型糖尿病是一種自身免疫性疾病，導(dǎo)致胰島β細(xì)胞被破壞，患者需終身依賴(lài)外源性胰島素治療。胰島細(xì)胞移植作為一種潛在的治療方法，可以通過(guò)提供功能性的胰島細(xì)胞來(lái)恢復(fù)患者的胰島素分泌功能，從而達(dá)到控制血糖的目的。然而，傳統(tǒng)的胰島移植存在供體胰島細(xì)胞稀缺、免疫排斥反應(yīng)以及移植部位限制等問(wèn)題。

近年來(lái)，多能干細(xì)胞（PSC）技術(shù)的發(fā)展為解決這些問(wèn)題提供了新的途徑。通過(guò)化學(xué)誘導(dǎo)方法將體細(xì)胞重編程為化學(xué)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（CiPSC），并進(jìn)一步分化為胰島樣細(xì)胞，為胰島細(xì)胞移植提供了無(wú)限的細(xì)胞來(lái)源。此外，選擇合適的移植部位對(duì)于提高移植胰島細(xì)胞的存活率和功能至關(guān)重要。

由王樹(shù)森等人撰寫(xiě)，發(fā)表在《Cell》雜志上的這篇題為“Transplantation of chemically induced pluripotent stem-cell-derived islets under abdominal anterior rectus sheath in a type 1 diabetes patient”的文章，主要報(bào)道了一項(xiàng)I期臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果，該研究旨在評(píng)估利用化學(xué)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（CiPSC）衍生的胰島細(xì)胞在I型糖尿病患者中進(jìn)行自體移植的安全性和有效性。

方法

1. CiPSC的生成與分化：從患者的脂肪組織中獲取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（ADSCs），通過(guò)化學(xué)重編程方法將其誘導(dǎo)為CiPSC。采用四步化學(xué)重編程方案，不使用基因操作方法，將ADSCs轉(zhuǎn)化為CiPSC。利用之前建立的六階段分化協(xié)議，將CiPSC分化為胰島樣細(xì)胞（CiPSC-islets）。

2. CiPSC-islets的質(zhì)量控制：通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光染色檢測(cè)胰島內(nèi)分泌細(xì)胞標(biāo)志物（如NKX6.1、C-peptide、Glucagon等）的表達(dá)，確保細(xì)胞的純度和活性。通過(guò)數(shù)字液滴PCR（dd-PCR）檢測(cè)潛在殘留的PSC細(xì)胞，以評(píng)估細(xì)胞的致瘤性風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，進(jìn)行全基因組測(cè)序（WGS）和全外顯子組測(cè)序（WES）以檢測(cè)基因突變。通過(guò)葡萄糖刺激胰島素分泌（GSIS）實(shí)驗(yàn)評(píng)估CiPSC-islets的功能性。

3. 移植手術(shù)：選擇腹部前直肌鞘下作為移植部位，該部位具有微創(chuàng)、易于監(jiān)測(cè)和成像等優(yōu)點(diǎn)。在超聲引導(dǎo)下，將CiPSC-islets注射到前直肌鞘下。

4. 移植后監(jiān)測(cè)與評(píng)估：通過(guò)連續(xù)血糖監(jiān)測(cè)（CGM）和糖化血紅蛋白（HbA1c）檢測(cè)評(píng)估患者的血糖控制情況。通過(guò)檢測(cè)空腹和餐后C-peptide水平、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）以及BETA-2評(píng)分等方法評(píng)估胰島功能。通過(guò)超聲和磁共振成像（MRI）監(jiān)測(cè)移植部位的情況，檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物以評(píng)估致瘤性風(fēng)險(xiǎn)。

實(shí)驗(yàn)

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，使用了ALPCO的人C肽酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（human C-peptide ELISA kit，貨號(hào)：ALP-80-CPTHU-E10）在檢測(cè)C-peptide水平中的應(yīng)用。

該ELISA試劑盒用于定量檢測(cè)人血清或血漿中的C-peptide水平。C-peptide是胰島素原在轉(zhuǎn)化為胰島素過(guò)程中產(chǎn)生的一種連接肽，與胰島素以等摩爾量分泌。因此，檢測(cè)C-peptide水平可以間接反映胰島素的分泌情況，是評(píng)估胰島功能的重要指標(biāo)之一。

評(píng)估胰島移植效果：通過(guò)檢測(cè)移植前后患者的空腹和餐后C-peptide水平變化，可以評(píng)估CiPSC-islets移植后胰島功能的恢復(fù)情況。

監(jiān)測(cè)胰島功能：在移植后的長(zhǎng)期隨訪中，定期檢測(cè)C-peptide水平有助于監(jiān)測(cè)胰島功能的穩(wěn)定性和持久性。

安全性評(píng)估：高C-peptide水平可能提示存在內(nèi)源性胰島素分泌，有助于排除胰島細(xì)胞移植后的致瘤性風(fēng)險(xiǎn)。

文章詳細(xì)描述了使用ALPCO human C-peptide ELISA kit檢測(cè)患者移植前后C-peptide水平的變化。結(jié)果顯示，移植后患者的C-peptide水平顯著升高，并在移植后75天達(dá)到胰島素獨(dú)立狀態(tài)，表明CiPSC-islets成功恢復(fù)了患者的胰島功能。

結(jié)論

  本研究利用人CiPS細(xì)胞制備的胰島，建立了糖尿病的細(xì)胞治療新途徑，實(shí)現(xiàn)了臨床功能性治愈糖尿病。更為重要的是，化學(xué)重編程技術(shù)制備的功能細(xì)胞在臨床治療疾病的成功，表明了化學(xué)重編程有望成為高效制備各種功能細(xì)胞類(lèi)型的通用底層技術(shù)，為細(xì)胞治療在重大疾病治療上的廣泛應(yīng)用開(kāi)辟了一條新的途徑。