CAR-T和TCR-T是目前腫瘤免疫治療技術(shù)的熱點，不管是CAR-T技術(shù)還是TCR-T技術(shù)，T細(xì)胞的體外培養(yǎng)都可以使用CD3單抗和CD28單抗，刺激T細(xì)胞使其激活和擴(kuò)增。  

Biogradetech的Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）是專為人類T細(xì)胞的分離和體外擴(kuò)增而設(shè)計的，無需飼養(yǎng)層細(xì)胞即可活化T細(xì)胞。這些磁珠廣泛應(yīng)用于各種T細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，包括CAR-T細(xì)胞療法。借助與磁珠結(jié)合的抗人CD3和抗人CD28抗體，Human T-Activator CD3/CD28 Beads為分離和擴(kuò)增人類T細(xì)胞提供了一種簡單而有效的方法。  

產(chǎn)品信息

• 貨號：C-BETA2001

• 反應(yīng)性：人類

• 濃度：2 × 108 beads/mL

• 粒徑：5 μm

• 內(nèi)毒素：1 EU/mL

• 用途：體外T細(xì)胞激活和擴(kuò)增，適用于富集的T細(xì)胞或外周血單個核細(xì)胞（PBMCs）

• 配方：含有人血清白蛋白（HSA）的磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），pH 7.4

• 穩(wěn)定性：2年

所需材料

1. 人類T細(xì)胞培養(yǎng)基。

2. 用于最佳擴(kuò)增的人類細(xì)胞因子，如IL-2、IL-7、IL-15等。

操作步驟

1. 洗滌Human T-Activator CD3/CD28 Beads

• 將珠子懸浮于管中，輕輕振蕩或傾斜旋轉(zhuǎn)以確保充分混合。

• 將所需體積的珠子轉(zhuǎn)移到新的管中。

• 加入等體積的含有1% HSA的PBS進(jìn)行懸浮。

• 將管放置在磁架上1分鐘，廢棄上清液。

• 從磁架上取下管子，用相同體積的含有1% HSA的PBS重新懸浮珠子。

2. 分離CD3+ T細(xì)胞

• 輕輕懸浮Ficoll分離的PBMCs于含有1% HSA的PBS中，并調(diào)整細(xì)胞密度。

• 將洗滌過的珠子以適當(dāng)?shù)谋壤尤隤BMCs中。

• 旋轉(zhuǎn)樣品并在室溫孵育。

• 使用T細(xì)胞培養(yǎng)基或含有1% HSA的PBS稀釋珠子和細(xì)胞的混合物，并將管子放置在磁架上。

• 去除上清液，并在含有IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基中懸浮混合物。

3. T細(xì)胞激活和擴(kuò)增

• 每天從第3天開始計數(shù)T細(xì)胞的數(shù)量。

• 在細(xì)胞擴(kuò)增的后期，通過輕輕吹氣細(xì)胞懸浮液來解離珠子和細(xì)胞。

• 當(dāng)CD3+ T細(xì)胞超過1 × 106 cells/mL時，使用含有IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞。

• 在培養(yǎng)結(jié)束時（第9-14天），計數(shù)細(xì)胞并使用磁架去除珠子。

產(chǎn)品數(shù)據(jù)展示

圖1 通過磁珠分離CD3+ T細(xì)胞。將PBMCs與Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）以3個珠子與每個細(xì)胞的比例孵育30分鐘，并通過流式細(xì)胞術(shù)分析陽性（分離）細(xì)胞的分離效率。  

圖2 純化的人類CD3+T細(xì)胞擴(kuò)增。使用Human T-Activator CD3/CD28 Beads（貨號：C-BETA2001）刺激純化的人類CD3+ T細(xì)胞。細(xì)胞在含有300 IU/mL IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基中擴(kuò)增。激活后的細(xì)胞在高細(xì)胞存活率下擴(kuò)增了13天。   

Biogradetech是全球生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合，包括細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到全球生物研究機(jī)構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧，他們以高質(zhì)量、可靠性和服務(wù)而聞名。