癌癥轉(zhuǎn)移是癌癥致死的主要原因，然而當(dāng)前的治療方法并未專門針對(duì)轉(zhuǎn)移性癌細(xì)胞。抗體基治療在癌癥治療中展現(xiàn)出巨大潛力，通過精確靶向癌細(xì)胞表面的特異性表位，結(jié)合有效載荷或招募細(xì)胞毒性免疫細(xì)胞，提高癌癥治療效果。例如，針對(duì)HER2的曲妥珠單抗顯著改善了HER2陽(yáng)性乳腺癌患者的預(yù)后，并抑制了癌癥復(fù)發(fā)。

Cadherin蛋白通過同型相互作用在細(xì)胞間形成黏附連接，對(duì)維持上皮結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。在癌癥中，Cadherin蛋白經(jīng)常失調(diào)，表現(xiàn)為細(xì)胞遷移和侵襲性增加。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）伴隨E-Cadherin（CDH1）下調(diào)和N-Cadherin、OB-Cadherin（CDH11）等間質(zhì)Cadherin上調(diào)。

Douglas等人制備上皮E-Cadherin（CDH1）和間質(zhì)OB-Cadherin（CDH11）的雙特異性抗體23C6，發(fā)現(xiàn)它能有效克服腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性，相關(guān)結(jié)果發(fā)表在PNAS上《Targeting breast and pancreatic cancer metastasis using a dual-cadherin antibody》

方法

1. 抗體生成與特性分析：

來源：23C6抗體源自針對(duì)CDH11細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的雜交瘤。

序列分析：通過測(cè)序抗體可變區(qū)并建模潛在結(jié)合位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)高度保守的結(jié)合位點(diǎn)，分別與CDH1和CDH11具有高親和力。

Western blot驗(yàn)證：23C6抗體能特異性識(shí)別重組人CDH11、人及鼠CDH1蛋白。

2. 模型驗(yàn)證與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：

小鼠模型：使用同基因小鼠乳腺癌模型（4T1細(xì)胞）和異種移植模型（MDA-MB-231和PDAC9細(xì)胞），通過腹腔注射23C6抗體進(jìn)行治療。

療效評(píng)估：監(jiān)測(cè)原發(fā)腫瘤生長(zhǎng)、肺轉(zhuǎn)移負(fù)荷、循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）數(shù)量及抗體毒性。

3. 毒性評(píng)估：

正常組織毒性：在免疫健全小鼠中評(píng)估23C6抗體對(duì)腎臟、肝臟、結(jié)腸等正常器官的影響。

組織學(xué)分析：通過HE染色和免疫組化評(píng)估組織損傷、細(xì)胞死亡和免疫細(xì)胞浸潤(rùn)。

4. 抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）制備：

偶聯(lián)方法：使用CellMosaic廠家的PerKit Antibody SN38 Conjugation Kit(Cat# CM11408x1)將23C6抗體與SN-38（伊立替康的活性代謝產(chǎn)物）偶聯(lián)。

效果評(píng)估：通過HPLC確認(rèn)偶聯(lián)成功，并在PDAC9小鼠模型中評(píng)估ADC的抗腫瘤效果。

實(shí)驗(yàn)

1. Cadherin表達(dá)異質(zhì)性分析：

RNA-Seq數(shù)據(jù)：分析TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中不同癌癥類型的Cadherin家族成員表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)上皮癌中CDH1高表達(dá)，而其他Cadherin成員表達(dá)存在異質(zhì)性。

CTC分析：通過單細(xì)胞RNA-Seq分析轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的CTCs，發(fā)現(xiàn)CTCs中Cadherin表達(dá)具有高度異質(zhì)性。

2. 23C6抗體對(duì)原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移的影響：

原發(fā)腫瘤生長(zhǎng)：在4T1和MDA-MB-231模型中，23C6抗體治療對(duì)原發(fā)腫瘤生長(zhǎng)無顯著影響。

肺轉(zhuǎn)移抑制：在切除原發(fā)腫瘤后，23C6抗體顯著減少4T1和MDA-MB-231模型中的肺轉(zhuǎn)移負(fù)荷。

CTCs減少：在PDAC9模型中，23C6抗體治療導(dǎo)致循環(huán)中CTCs數(shù)量顯著減少。

3. 毒性評(píng)估結(jié)果：

組織毒性：23C6抗體治療未導(dǎo)致小鼠正常器官的組織損傷、細(xì)胞死亡或免疫細(xì)胞浸潤(rùn)增加。

體重與活動(dòng)：抗體治療小鼠的體重、活動(dòng)量和器官重量與對(duì)照組無顯著差異。

4. ADC的抗腫瘤效果：

細(xì)胞凋亡：在PDAC9模型中，23C6-SN38 ADC治療導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡顯著增加，相比裸抗體和SN-38單體效果更佳。

結(jié)論

1. 23C6抗體的抗轉(zhuǎn)移效果：

有效性：23C6抗體通過靶向CTCs中的Cadherin蛋白，有效抑制乳腺癌和胰腺癌模型的血液傳播轉(zhuǎn)移，而不影響原發(fā)腫瘤生長(zhǎng)或正常組織。

機(jī)制：抗體可能通過減少CTCs在血液循環(huán)中的存活和/或外滲來抑制轉(zhuǎn)移。

2. 安全性與耐受性：

無毒性：23C6抗體在正常小鼠中未表現(xiàn)出明顯毒性，表明其具有良好的安全性。

3. 臨床應(yīng)用前景：

輔助治療：在圍手術(shù)期或寡轉(zhuǎn)移性疾病中，23C6抗體可能作為輔助治療手段，減少手術(shù)或標(biāo)準(zhǔn)治療后的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。

抗體藥物偶聯(lián)：23C6-ADC展示了增強(qiáng)的抗腫瘤效果，未來可進(jìn)一步優(yōu)化以提高治療效果和安全性。

4. 未來研究方向：

機(jī)制研究：深入探討23C6抗體在CTCs和早期轉(zhuǎn)移灶中的作用機(jī)制。

臨床應(yīng)用：開展臨床試驗(yàn)評(píng)估23C6抗體在不同癌癥類型中的安全性和有效性。

Cell Mosaic的ADC偶聯(lián)試劑盒的作用與價(jià)值

推動(dòng)抗體藥物偶聯(lián)技術(shù)：

增強(qiáng)療效：23C6-ADC展示了比裸抗體更強(qiáng)的抗腫瘤效果，為抗體藥物偶聯(lián)技術(shù)的發(fā)展提供了新的范例。

未來潛力：通過進(jìn)一步優(yōu)化ADC的設(shè)計(jì)和制造，有望進(jìn)一步提高治療效果和患者生存率。

綜上所述，Cell Mosaic品牌的PerKit Antibody SN38 Conjugation Kit(Cat# CM11408x1)，在癌癥轉(zhuǎn)移治療中展現(xiàn)了巨大的潛力和價(jià)值。其精準(zhǔn)靶向治療、良好的安全性和廣泛的適用性為癌癥患者帶來了新的治療希望，并有望推動(dòng)個(gè)性化醫(yī)療和抗體藥物偶聯(lián)技術(shù)的發(fā)展。

其他相關(guān)產(chǎn)品推薦：

1. Perkit 抗體偶聯(lián)試劑盒

PerKit抗體偶聯(lián)試劑盒可用實(shí)現(xiàn)抗體IgG ab或F(ab)2和小分子酸，Doxorubicin, Methotrexat, MMAE MMAF, SN38, Deruxtecan的偶聯(lián)，且試劑盒中含有純化試劑，最終可產(chǎn)出1-3mg的ADC產(chǎn)物，產(chǎn)物純度可達(dá)到90%以上，整體實(shí)驗(yàn)流程可由實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)室中，一天內(nèi)完成，且操作時(shí)間少于2h。

2. PerKit蛋白藥物偶聯(lián)試劑盒

PerKits蛋白偶聯(lián)試劑盒可將小分子酸，DM1， MMAE，SN38，Deruxtecan通過蛋白表面的氨基，實(shí)現(xiàn)任意的偶聯(lián)，以此實(shí)驗(yàn)最多可產(chǎn)出20nmol的蛋白藥物偶聯(lián)產(chǎn)物。試劑盒中含有純化試劑，純化后的產(chǎn)物純度可達(dá)到90%以上。整體實(shí)驗(yàn)流程可由實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)室中，一天內(nèi)完成，且操作時(shí)間少于2h。