細胞外囊泡（EV）是從細胞分泌的膜結(jié)合的小顆粒，被認(rèn)為是細胞使者，將貨物從一個細胞攜帶到另一個細胞。細胞外囊泡的幾種亞型的功能，貨物和尺寸都不同，直徑約為30-1000 nm。EV的最小類型是外泌體，大小約為30-150 nm。細胞外囊泡源于一個稱為多泡小體(MVB)的細胞室內(nèi)，該室本身源自內(nèi)含體的內(nèi)陷。當(dāng)MVB與質(zhì)膜融合并釋放運輸物時，囊泡就會釋放。

在生物醫(yī)學(xué)研究中，EV及其運輸物被用作癌癥和其他疾病的診斷生物標(biāo)志物。可以使用超速離心，PEG沉淀和免疫捕獲珠等技術(shù)從血液或其他生物流體中分離出囊泡。

EV膜攜帶跨膜蛋白來自起源細胞的質(zhì)膜，該蛋白通常包括四疊蛋白酶家族的蛋白質(zhì)（例如CD9，CD63和CD81）。在內(nèi)部，EV包含細胞質(zhì)成分，例如蛋白質(zhì)和RNA。可以使用RNASEQ，Western印跡和流式細胞儀等方法分析EV組分。為了通過流式細胞儀進行表征，研究人員可以使用染色的染料，這些染料像膜和核酸這樣的染料，以及與四疊腺苷或其他感興趣的蛋白質(zhì)結(jié)合的抗體。

Biotium開發(fā)的ExoBrite? Annexin EV染料旨在克服外泌體檢測的一些挑戰(zhàn)，特別是在流式細胞術(shù)中。ExoBrite? Annexin EV染色劑是Annexin V的獨特配方綴合物，Annexin是一種35-36kDA的鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白，對磷脂酰絲氨酸（PS）具有高親和力。由于大多數(shù)EV膜上存在PS，Annexin V偶聯(lián)物已被用于檢測EV。

ExoBrite? Annexin EV染色是為了克服EV檢測的一些挑戰(zhàn)，特別是在流式細胞術(shù)中。例如，通常用于染色EV的親脂性膜染料可以形成與外泌體或EV大小相似的聚集體，從而混淆分析。相反，ExoBrite? Annexin EV染色劑是專門配制的，可最大限度地減少流式細胞術(shù)中的聚集，使EV能夠在最小背景下通過明亮的染色進行鑒定。此外，ExoBrite? Annexin EV染色劑旨在提供從不同來源分離的EV的廣泛覆蓋范圍。我們測試了來自9個細胞系和ExoBrite? Annexin EV染色顯示對所有細胞都有強染色。

EV通常通過使用靶向一種或多種四跨膜蛋白CD9、CD63和CD81的熒光抗體來檢測。ExoBrite? EV膜染色劑可與抗體染色結(jié)合使用，用于多參數(shù)分析。Biotium還提供經(jīng)驗證的可用于外泌體染色的CD9和CD81單克隆抗體，可提供純化或與大量明亮和可溶性 CF? 染料偶聯(lián)的抗體。

檢測結(jié)果賞析：

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

Biotium公司是一家在熒光技術(shù)領(lǐng)域獨樹一幟的生物技術(shù)公司，公司位于美國加利福尼亞的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。該公司一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)用于生物醫(yī)學(xué)研究的熒光指示劑及其他特殊生化產(chǎn)品。其產(chǎn)品被廣泛應(yīng)用于細胞生 物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液流動檢測及大規(guī)模藥物篩選等眾多領(lǐng)域。Biotium公司專利產(chǎn)品眾多，包括已經(jīng)被廣泛使用的實時PCR定量熒光染料EvaGreen、具有劃時代意義的凝膠核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq熱啟動酶和CF系列蛋白質(zhì)標(biāo)記染料等。   

目前，Biotium已將其許多專利技術(shù)授權(quán)給一些主要的國際生物技術(shù)公司，包括安捷倫、BD生物科學(xué)、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。   寶天生物科技(BTProbes)由美國知名熒光試劑企業(yè)Biotium公司于2007年在華成立，是一家專注于生物熒光試劑研發(fā)的高科技企業(yè)，是多家歐美企業(yè)長期供貨商，產(chǎn)品被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)各個領(lǐng)域。目前寶天可提供超過100款熱賣的熒光蛋白(PE, APC)，其他熒光原料（FITC），用于PCR熒光原料（5-FAM，6-TAMRA）等。 

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