DSHB于1986年由國(guó)家兒童健康與人類發(fā)展研究所建立，自1997年起設(shè)在愛(ài)荷華大學(xué)，其使命是作為國(guó)際研究界的抗體資源。目標(biāo)始終不變：為科學(xué)進(jìn)步儲(chǔ)存雜交瘤和單克隆抗體。

產(chǎn)品形式說(shuō)明

上清液（-s）

由雜交瘤細(xì)胞條件培養(yǎng)基構(gòu)成，主要成分為無(wú)動(dòng)物源成分（ADCF）的單克隆抗體生長(zhǎng)培養(yǎng)基。雜交瘤培養(yǎng)初期殘留的胎牛血清（FBS）濃度低于1.5-2.0%，且未添加牛血清白蛋白（BSA）作為抗體穩(wěn)定劑。

濃縮液（-c）

通過(guò)50kD超濾膜制備，雖非純化抗體，但免疫球蛋白含量為上清液的10倍。換算關(guān)系為：100ul濃縮液≈1ml上清液的抗體量。推薦僅用于需高濃度小體積抗體的實(shí)驗(yàn)（如免疫沉淀、顯微注射或抗體偶聯(lián)）。常規(guī)免疫染色/印跡實(shí)驗(yàn)建議優(yōu)先選用上清液。

純化單抗（-y）

供應(yīng)量有限，具體推薦稀釋比例詳見(jiàn)網(wǎng)站各抗體頁(yè)面的提交者注釋。產(chǎn)品標(biāo)簽標(biāo)注抗體濃度，技術(shù)資料可從官網(wǎng)下載。

例如：

凍存細(xì)胞（-f）

每管1ml凍存液含5×10⁶至1×10⁷個(gè)細(xì)胞，干冰運(yùn)輸。接收后需立即復(fù)蘇培養(yǎng)或轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存。

活細(xì)胞（-g）

由單支凍存管復(fù)蘇擴(kuò)增而來(lái)，含2×10⁷至4×10⁷個(gè)活細(xì)胞。經(jīng)質(zhì)檢確認(rèn)生長(zhǎng)狀態(tài)良好后，以T25培養(yǎng)瓶（含65ml培養(yǎng)基）形式運(yùn)輸。收貨后需立即轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

關(guān)鍵生物參數(shù)說(shuō)明

FBS殘留量：<2%的濃度設(shè)計(jì)既保留必要生長(zhǎng)因子（如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白），又最大限度降低動(dòng)物源成分干擾

超濾標(biāo)準(zhǔn)：50kD截留分子量確保有效富集IgG類抗體（分子量~150kD）

細(xì)胞活率保障：凍存細(xì)胞采用程序降溫（-1℃/min）結(jié)合90%FBS+10%DMSO凍存液，活細(xì)胞運(yùn)輸時(shí)培養(yǎng)基含15%特級(jí)胎牛血清（經(jīng)70項(xiàng)質(zhì)控檢測(cè)）

（注：實(shí)際應(yīng)用中建議對(duì)濃縮液進(jìn)行Bradford法蛋白定量驗(yàn)證，活細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需維持37℃、5%CO₂的恒溫恒濕環(huán)境）

產(chǎn)品儲(chǔ)存建議

最佳儲(chǔ)存確保抗體活性隨時(shí)間保持。對(duì)于立即使用，建議在4°C下短期儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)兩周。如需長(zhǎng)期保存，應(yīng)將溶液分裝成不小于20ul的體積，在-20°C或-80°C冷凍。小體積的等分液應(yīng)能提供足夠的試劑供短期使用。應(yīng)避免凍融循環(huán)。對(duì)于濃縮物或生物反應(yīng)器產(chǎn)品，可在冷凍前加入等量的甘油（一種冷凍保護(hù)劑）。

產(chǎn)品使用建議

每種應(yīng)用的最佳免疫球蛋白（Ig）濃度因物種和抗體親和力而異。對(duì)于每種產(chǎn)品，最終用戶實(shí)驗(yàn)室必須針對(duì)每種應(yīng)用優(yōu)化抗體滴度。使用小鼠 Ig 進(jìn)行免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫熒光（IF）和免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）時(shí)，良好的起始濃度為 2 - 5 ug/ml。對(duì)于蛋白質(zhì)印跡（WB），推薦的小鼠 Ig 濃度范圍為 0.2 - 0.5 ug/ml。通常，兔抗體具有更高的親和力，在初始測(cè)試時(shí)使用的 Ig 濃度要低得多。兔 Ig 的推薦濃度為：0.2 - 0.5 微克/毫升（IF、IHC 和 ICC）和 20 - 50 ng/ml（WB）。