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品牌專題在 ELISpot 實驗中,96 孔板常用的膜有兩種:硝酸纖維素(NC)膜和聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。NC膜板一經(jīng)上市,大多數(shù)實驗室便立即采用。后來PVDF膜的96孔板問世,研究者改用PVDF,因為PVDF膜提供了更大的膜表面積,從而增加了可以結(jié)合的捕獲抗體的量,這一特性對于成功的ELISpot實驗至關(guān)重要。

PVDF膜在高倍放大鏡下類似海綿
Mabtech可提供兩種類型的ELISpot培養(yǎng)板:MSIP和MAIPSWU
1. MSIP--ELISpot培養(yǎng)板
MSIP培養(yǎng)板底部附有塑料保護墊,是用于保護實驗中的PVDF膜,以及避免在操作過程中液體對PVDF膜的污染。MSIP培養(yǎng)板有透明(貨號3654-TP-10)和白色(貨號3654-WP-10)兩種形式可供選擇。這兩種顏色的板子在ELISpot讀板儀中呈現(xiàn)略有不同的外觀,但并不會影響實驗結(jié)果。MSIP板的一個關(guān)鍵特征是它在左上角有一個“切角”。MSIP板在使用過程中,有如下兩點需要注意:
A. 向每個孔中加入20 ul乙醇(35%)。乙醇在孔中停留時間不超過1分鐘。
B. 在終止顯色時,用去離子水/自來水洗滌各實驗孔前,小心地拆卸底部的保護墊(例如,使用鉗子)。
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MSIP白色板 |
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用鉗子拆保護墊 |
2. MAIPSWU--ELISpot培養(yǎng)板
MAIPSWU培養(yǎng)板是白色形式(貨號3654-EP-10)的。它沒有底部保護墊,但是底部有一個可拆卸的托盤。MAIPSWU培養(yǎng)板的一個關(guān)鍵特點是它在頂部和底部的右上角有兩個“切角”。MAIPSWU板在使用過程中,有如下兩點需要注意:
A. 每孔中加入50?L 70%,乙醇在孔中停留的時間不超過2min。
B. 在洗滌步驟中,可以將培養(yǎng)板從托盤中取出,但在操作過程中要避免液體反滲入PVDF膜的背部和托盤中,從而導(dǎo)致PVDF膜的泄漏或污染。
MAIPSWU 板子 |
乙醇活化PVDF膜 |
培養(yǎng)板從托盤中取出 |
經(jīng)常會遇到客戶糾結(jié)時選擇白色板子還是透明的板子,其實這只是個人喜好的問題。白色和透明版在酶聯(lián)免疫斑點讀板儀上的外觀略有不同,但對點位計數(shù)沒有影響的。
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