Biosensis提供了大量已建立且特性良好的示蹤試劑，用于檢測退化神經(jīng)元（Fluoro-Jade B和C）、淀粉樣斑塊（Amylo-Glo和HQ-O）以及正常和致病的髓鞘（Black Gold II）。這些染色試劑是出色的研究工具，為研究神經(jīng)退行性疾病通路和疾病修飾藥物提供了最大的靈活性。

Biosensis 示蹤試劑具有幾個關(guān)鍵優(yōu)勢：

• 在高影響力期刊上發(fā)表過大量文章 – 質(zhì)量得到同行的驗證

• 詳細(xì)的方案 – 易于使用的試劑保證有效

• 出色的技術(shù)支持 – 確保您的實驗成功

• 靈活性 – 與各種組織類型、染色技術(shù)和現(xiàn)有抗體免疫染色方案兼容

使用 Fluoro-Jade B 和 C 鑒定退化神經(jīng)元

神經(jīng)元變性的原因和影響是各種神經(jīng)科學(xué)家的主要興趣。與這種興趣相對應(yīng)的是越來越多的適用于檢測神經(jīng)元變性的方法。Fluoro-Jade B （FJB） 和 C （FJC） 示蹤試劑可對所有退化神經(jīng)元進行染色，無論細(xì)胞死亡的具體損傷或機制如何。

左圖：老年糖尿病大鼠海馬體 CA3 區(qū)退化神經(jīng)元的Fluoro-Jade C （FJC） 染色（綠色）。藍(lán)色：DAPI 細(xì)胞核染色。圖片由 Wang 博士及其同事提供 （Wang S. et al. （2020））。

右：使用藍(lán)色和紫外線落射熒光聯(lián)合照明對暴露于紅藻氨酸的扣帶回大鼠皮層的表層進行雙重曝光。第 I 層包含明顯的 Fluoro-Jade C 陽性退化軸突末端。第 II 層包含密集堆積的 DAPI 陽性活顆粒細(xì)胞。第 III 層包含 FJC 陽性去殼錐體細(xì)胞和 DAPI 陽性活錐體細(xì)胞的混合物。照片由 Larry Schmued 博士提供。

FJC 表現(xiàn)出最大的信噪比和最高的分辨率。這轉(zhuǎn)化為對退化神經(jīng)元具有最大對比度和親和力的染色，使其成為定位退化神經(jīng)細(xì)胞體以及遠(yuǎn)端樹突、軸突和末端的理想選擇。該染料具有很強的抗褪色性，并且?guī)缀跖c所有組織學(xué)處理和染色方案兼容。

熒光染料 Fluoro-Jade B （FJB） 與其純化程度更高的兄弟 FJC 一樣，是一種陰離子熒光素衍生物，可用于對正在變性的神經(jīng)元進行組織學(xué)染色。FJB 與 FJC 的不同之處在于，它是一種略不精細(xì)的化學(xué)配方，因此它不能提供與 FJC 相同水平的信噪比或高分辨率。盡管如此，F(xiàn)JB 仍然被廣泛使用，并且作為退化神經(jīng)元甚至神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物效果非常好（參見 Damjanac M 等人，2007 年）。FJB 的方案與 FJC 幾乎相同，并且 FJB 與其他幾種標(biāo)記程序兼容，包括免疫熒光和熒光尼氏技術(shù)。

Biosensis Fluoro-Jade B 和 C 示蹤試劑有以下規(guī)格可供選擇：

注意：TR-150-FJ 相當(dāng)于 Merck-Millipore 的停產(chǎn)產(chǎn)品 AG310，R-160-FJ相當(dāng)于 Merck-Millipore 的停產(chǎn)產(chǎn)品 AG325。

用 Amylo-Glo 和 HQ-O 識別淀粉樣蛋白斑塊

Amylo-Glo 即用型稀釋 （RTD） 染色試劑 （TR-300-AG） 設(shè)計用于對組織切片中的淀粉樣蛋白斑塊進行染色。由于其獨特的化學(xué)和光譜特性，該標(biāo)記物與其他常規(guī)標(biāo)記物（如硫黃素 S 和剛果紅）相比具有幾個優(yōu)勢（Schmued L等人，2012 年）。使用 Amylo-Glo 在生理條件下會產(chǎn)生非常亮的藍(lán)色紫外線激發(fā)染色劑，當(dāng)用其他濾光片照射時不會滲出。其亮度使其成為低倍率定量研究的理想選擇，而其獨特的激發(fā)/發(fā)射曲線和溫和的染色條件使其成為多種免疫熒光標(biāo)記研究組合的理想選擇。Amylo-Glo RTD 與新鮮、冷凍和福爾馬林固定的免疫組織化學(xué)或免疫細(xì)胞化學(xué)兼容，由于其高熒光強度、高抗光漂白性和獨特的紫外通道熒光特性，它特別適用于共聚焦和多重標(biāo)記。

左圖：三重暴露允許在 AD/Tg 小鼠的海馬體中同時定位 Amylo-Glo 陽性淀粉樣蛋白斑塊（藍(lán)色）、GFAP 陽性肥大星形膠質(zhì)細(xì)胞（綠色）和活化的小膠質(zhì)細(xì)胞（紅色）。紫外線、藍(lán)光和綠光照明相結(jié)合。

右：在 AD/Tg 小鼠海馬的齒狀回區(qū)域用溴化乙錠尼氏（細(xì)胞體）復(fù)染劑（紅色）標(biāo)記淀粉樣斑塊（藍(lán)色）的淀粉樣蛋白斑塊（藍(lán)色）。

含 EtBr 復(fù)染劑的 Biosensis Amylo-Glo RTD 淀粉樣蛋白斑塊染色試劑 （TR-400-AG） 試劑盒利用溴化乙錠復(fù)染劑，以一種快速有效的方式可視化細(xì)胞核和細(xì)胞體，同時在紫外線照射下，可一步評估淀粉樣蛋白斑塊和細(xì)胞/組織定位。

HQ-O 即用型稀釋 （RTD） 示蹤試劑設(shè)計用于標(biāo)記石蠟包埋或新鮮切割的冷凍組織切片中的淀粉樣斑塊。作為一種熒光鋅螯合劑，HQ-O 是獨一無二的，因為它利用了淀粉樣蛋白斑塊中已知存在的濃縮鋅。對 HQ-O 的研究表明，只有在鋅存在下聚集合成的 Aβx-42 時，才能看到熒光斑塊狀結(jié)構(gòu)。在藍(lán)光激發(fā)下，斑塊結(jié)構(gòu)在腦實質(zhì)中呈亮綠色熒光，與 Aβ 抗體染色后觀察到的斑塊結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。HQ-O RTD 染色試劑與其他熒光基團兼容，如 DAPI、Hoechst 和溴化乙錠，以及熒光顯微鏡發(fā)射光譜在藍(lán)色和/或紅色發(fā)射范圍內(nèi)的熒光標(biāo)記抗體。由于其鋅螯合特性，HQ-O RTD^TM染色試劑可以顯示血管內(nèi)的球狀結(jié)構(gòu)和血管內(nèi)白細(xì)胞。

D：在海馬體的 CA4 區(qū)域內(nèi)，使用 GFAP 抗體進行共標(biāo)記證明了肥大的星形膠質(zhì)細(xì)胞（橙色）與它們通常周圍的淀粉樣斑塊（綠色）之間的關(guān)系。用 TRITC 熒光團觀察 GFAP 免疫反應(yīng)性。

E：在阿爾茨海默病患者的皮層中可以看到三個淀粉樣斑塊（綠色）。

F：人類 AD 患者皮層中的血管斑塊示例。

HQ-O RTD 染色試劑與硫黃素 S 等舊的藍(lán)光激發(fā)染色劑相比具有多種優(yōu)勢：

• HQ-O 與淀粉樣蛋白原纖維和噬菌斑結(jié)合，無需通過獨特的鋅結(jié)合特性進行確認(rèn)

• 與硫黃素 S、硫黃素 T 和剛果紅相比，具有更高的對比度和分辨率

• 具有緊密的激發(fā)和發(fā)射光譜，無激發(fā)物滲漏，可輕松進行清晰的多重標(biāo)記研究

• 使用常見的藍(lán)光（FITC 熒光）濾光片 （E_麥克斯475 納米）

• 與 FFPE 和冷凍組織切片兼容

• 比任何其他非紫外線淀粉樣染料更容易、更銳利、更亮！

Biosensis 淀粉樣蛋白噬菌斑示蹤試劑有以下規(guī)格可供選擇：

用Black-Gold II鑒定正常和致病的髓鞘

Black-Gold II 是一種鹽代磷酸鹽復(fù)合物，可將髓鞘定位在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)。Black Gold II 即用型稀釋 （RTD） 染色試劑盒可定位髓鞘，包括單個纖維和髓束，并可選擇通過甲苯胺藍(lán)復(fù)染劑共定位細(xì)胞體。黑金 II 標(biāo)記的有髓纖維在明場照明下看起來幾乎是黑色的，而甲苯胺藍(lán) O 標(biāo)記的細(xì)胞尼氏體是藍(lán)色的。

Black Gold II 可以顯示和表征與暴露于多種神經(jīng)毒物相關(guān)的特定髓鞘變化，包括紅藻酸、軟骨藻酸、3-硝基丙酸、氟金和異煙肼。Black Gold II 還可以與其他組織化學(xué)標(biāo)志物結(jié)合使用，包括尼氏染色、逆行轉(zhuǎn)運熒光示蹤劑和神經(jīng)元變性的熒光標(biāo)志物。Black-Gold II 的相關(guān)優(yōu)勢包括高分辨率、高對比度、組織化學(xué)處理時間短、多功能性和一致的可重復(fù)性。

左圖：8 個月大的 Ad-Tg 小鼠海馬體的明場照明 （60X）。髓鞘病理可以在淀粉樣蛋白斑塊內(nèi)和周圍觀察到。相鄰顆粒和多晶型細(xì)胞的細(xì)胞體呈藍(lán)色，而單個髓鞘纖維呈近黑色。照片由 L. Schmued 博士提供。

右：延髓中人腦 K 位點降鈣素基因相關(guān)肽樣免疫反應(yīng)性（黑色）和髓鞘染色（紅色，Black-Gold II 染色試劑盒，Biosensis），顯示背柱核 Locus K 和脊髓三叉神經(jīng)質(zhì)明膠的相似神經(jīng)化學(xué)和結(jié)構(gòu)組織（Del Fiacco M. et al.， 2018）。

Biosensis正常和致病性髓鞘示蹤試劑有以下大小可供選擇：