引言

細(xì)胞侵襲是一個(gè)重要的生理現(xiàn)象，不僅在胚胎發(fā)育、免疫過(guò)程和傷口愈合中起著關(guān)鍵作用，也對(duì)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移至關(guān)重要。研究細(xì)胞侵襲的實(shí)驗(yàn)通常使用傳統(tǒng)的侵襲實(shí)驗(yàn)，但基于動(dòng)物的ECM存在挑戰(zhàn)。VitroGel 水凝膠是一種合成的無(wú)動(dòng)物源水凝膠，具有可調(diào)生物物理和生化特性，為細(xì)胞遷移研究提供了便利并支持高通量操作。VitroGel已在乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤等細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)中得到成功應(yīng)用，為細(xì)胞侵襲和運(yùn)動(dòng)研究提供了強(qiáng)大工具。

基于 VitroGel 的細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒評(píng)估高度侵襲性的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 U87-MG 的侵襲性，包括“即用型”和可調(diào)諧的“高濃度”試劑盒，研究了水凝膠機(jī)械強(qiáng)度和功能配體對(duì)細(xì)胞侵襲的影響，還描述了一種新穎獨(dú)特的使用該試劑盒創(chuàng)建的侵襲實(shí)驗(yàn)，能將趨化因子和藥理試劑嵌入基質(zhì)以評(píng)估趨化作用。

材料和方法

細(xì)胞培養(yǎng)

U87-MG膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞在補(bǔ)充有10％胎牛血清（FBS）、1％青霉素-鏈霉素和1％谷氨酰胺的最低必需培養(yǎng)基（MEM 1X）中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80-90％匯合時(shí)進(jìn)行傳代。

細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

即用型，細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-VHM01-1P）

可調(diào)節(jié)，高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel 3D細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC001-1P）

VitroGel RGD細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC003-1P）

VitroGel MMP細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC010-1P）

細(xì)胞侵襲的其他材料

1X磷酸鹽緩沖鹽水（1XPBS）

4％甲醛

臺(tái)盼藍(lán)染色劑

棉簽

鑷子

甲醇

結(jié)晶紫染色劑

微量移液器和低保留移液器吸頭

Zeiss顯微鏡

Image J軟件

方法

1. VitroGel 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（即用型）

1) 使VitroGel水凝膠基質(zhì)和培養(yǎng)基達(dá)到室溫。

2) 向500μL基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基中加入1mL VitroGel水凝膠基質(zhì)溶液，并輕輕吹打5-10次以均勻混合混合物。（保持VitroGel水凝膠基質(zhì)溶液和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基的2:1體積比混合）。*如果使用低鹽濃度的細(xì)胞培養(yǎng)基，例如RMPI 1640培養(yǎng)基，請(qǐng)考慮使用1:1體積比混合。（例如，將500μL VitroGel水凝膠溶液與500μL細(xì)胞培養(yǎng)基混合）。注意：如果需要向水凝膠基質(zhì)中添加補(bǔ)充劑，如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、趨化因子或化學(xué)試劑，請(qǐng)將補(bǔ)充劑的3倍所需濃度添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中。然后可以將細(xì)胞培養(yǎng)基與VitroGel水凝膠溶液混合，以使水凝膠基質(zhì)中的最終補(bǔ)充劑濃度為1X。（例如：制備含有30ng/mL細(xì)胞因子的培養(yǎng)基。將VitroGel水凝膠基質(zhì)溶液與培養(yǎng)基以2:1體積比混合，以獲得水凝膠基質(zhì)內(nèi)10ng/mL細(xì)胞因子的最終濃度）。

3) 向每個(gè)插入物中加入100μL水凝膠混合物，并確保每個(gè)插入物表面均勻分布有水凝膠。注意：如果實(shí)驗(yàn)需要更薄的凝膠來(lái)評(píng)估侵襲，請(qǐng)將每個(gè)插入物的水凝膠體積調(diào)整為50-100μL。

4) 在室溫下讓水凝膠混合物固化20分鐘，然后在水凝膠頂部加入細(xì)胞。

5) 在所需的培養(yǎng)基（即無(wú)血清培養(yǎng)基）中制備細(xì)胞懸液，濃度為1-3 x 10*5細(xì)胞/mL，并在水凝膠頂部加入100μL細(xì)胞懸液。可選的接種方法：為確保細(xì)胞接種在水凝膠表面，首先在水凝膠頂部加入50％的培養(yǎng)基（無(wú)細(xì)胞）。等待5-10分鐘，然后在水凝膠頂部加入剩余50％的含有細(xì)胞的培養(yǎng)基。（例如，首先加入50μL培養(yǎng)基（無(wú)細(xì)胞）；等待10-5分鐘；然后在頂部加入50μl含有2-6 x 10*6細(xì)胞/mL的培養(yǎng)基）。

6) 制備含有感興趣因素（即趨化因子、細(xì)胞因子或血清）的細(xì)胞培養(yǎng)基，并向外孔中加入500μL細(xì)胞培養(yǎng)基。

7) 將細(xì)胞在濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱中于37°C下孵育。

2. 可調(diào)節(jié)，高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒

以下協(xié)議適用于所有VitroGel高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒版本。下面以VitroGel RGD細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒為例。

1) 使VitroGel RGD水凝膠和基礎(chǔ)培養(yǎng)基達(dá)到室溫。

2) 用VitroGel 稀釋溶液將VitroGel RGD水凝膠溶液稀釋至所需濃度。參考表1獲取不同比例的推薦體積。

表1：高濃度水凝膠不同稀釋比例的VitroGel水凝膠溶液、稀釋溶液和細(xì)胞培養(yǎng)基的體積。

3) 將稀釋后的水凝膠溶液與基礎(chǔ)培養(yǎng)基以4:1的比例混合。參考表1以獲取混合的建議體積。提示：如果您需要向水凝膠基質(zhì)中添加細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、趨化因子或化學(xué)試劑等補(bǔ)充劑，將5倍濃度的補(bǔ)充劑加入細(xì)胞培養(yǎng)基中。然后可以將細(xì)胞培養(yǎng)基與稀釋的VitroGel水凝膠溶液以4:1的比例混合，以在水凝膠基質(zhì)中獲得1倍的最終補(bǔ)充濃度。（例如：準(zhǔn)備含有50 ng/mL細(xì)胞因子的培養(yǎng)基。將稀釋后的VitroGel水凝膠溶液與培養(yǎng)基以4:1的體積/體積混合比混合，以在水凝膠基質(zhì)中獲得10 ng/mL細(xì)胞因子的最終濃度）

4) 向每個(gè)插入物中加入 100μL 水凝膠混合物，并確保每個(gè)插入物表面均勻覆蓋有水凝膠。

注意：如果實(shí)驗(yàn)需要更薄的凝膠來(lái)評(píng)估侵襲，請(qǐng)將每個(gè)插入物的水凝膠體積調(diào)整為 50-100μL。

5) 在室溫下讓水凝膠混合物固化 20 分鐘，然后在水凝膠頂部加入細(xì)胞。

6) 在所需的培養(yǎng)基（即無(wú)血清培養(yǎng)基）中制備細(xì)胞懸液，濃度為 1-3 x 10*5 細(xì)胞/mL，并在水凝膠頂部加入 100μL 細(xì)胞懸液。

可選的接種方法：為確保細(xì)胞接種在水凝膠表面，首先在水凝膠頂部加入 50％的培養(yǎng)基（無(wú)細(xì)胞）。等待 5-10 分鐘，然后在水凝膠頂部加入剩余 50％的含有細(xì)胞的培養(yǎng)基。（例如，首先加入 50μL 培養(yǎng)基（無(wú)細(xì)胞）；等待 10-5 分鐘；然后在頂部加入 50μl 含有 2-6 x 10*6 細(xì)胞/mL 的培養(yǎng)基）。

7) 制備含有感興趣因素（即趨化因子、細(xì)胞因子或血清）的細(xì)胞培養(yǎng)基，并向外孔中加入 500μL 細(xì)胞培養(yǎng)基。

8) 將細(xì)胞在濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱中于 37°C 下孵育。

閱讀完整的協(xié)議請(qǐng)點(diǎn)擊這里：https://www.thewellbio.com/product/vitrogel-cell-invasion-assay-kit/

結(jié)果

1. VitroGel 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（即用型）

U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞向血清梯度的侵襲

即用型水凝膠-細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（CAT #IA-VHM01-1P）

插入物：VitroGel 水凝膠基質(zhì)與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基以 2:1 的體積比混合

外孔：MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)血清）或 MEM 含 20％FBS

細(xì)胞：U87-MG 細(xì)胞（每個(gè)插入物 3.8 x 10*4 細(xì)胞）

細(xì)胞孵育時(shí)間：48 小時(shí)

為了進(jìn)行傳統(tǒng)的侵襲實(shí)驗(yàn)，將 VitroGel 水凝膠基質(zhì)與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基以 2:1 的體積比混合。將水凝膠混合物（100μL）加入每個(gè)插入物中，然后在室溫下孵育 20 分鐘以使水凝膠固化。然后將 U87-MG 細(xì)胞（每個(gè)插入物 3.8 x 10*4 細(xì)胞）重懸于 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并放置在涂層插入物的頂部。向外孔中補(bǔ)充 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或補(bǔ)充有 20％FBS 的 MEM 培養(yǎng)基（每孔 500μL，圖 1A）。將培養(yǎng)物在 37°C 下孵育 48 小時(shí)。在細(xì)胞孵育后，我們進(jìn)行了結(jié)晶紫染色以可視化細(xì)胞侵襲（圖 1B-C）。

正如預(yù)期的那樣，與在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比，暴露于補(bǔ)充有 20％FBS 的培養(yǎng)基中的 U87-MG 細(xì)胞顯著侵襲了水凝膠基質(zhì)（圖 1B-C）。這些發(fā)現(xiàn)表明，VitroGel 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒是一種可行的工具，可用于檢查由血清梯度引起的細(xì)胞侵襲。

圖 1. U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞通過(guò) VitroGel 水凝膠基質(zhì)的侵襲由血清梯度引起。

A. 展示侵襲實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)置的示意圖。B. 通過(guò)進(jìn)行結(jié)晶紫染色，然后進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察，可視化 U-87MG 細(xì)胞侵襲。圖像顯示了對(duì)照組（無(wú) FBS）和 20％FBS 條件下的膜插入物。使用 Zeiss 顯微鏡在 10X 放大倍數(shù)下獲得圖像。C. 對(duì)照組和 20％FBS 組之間 U87-MG 細(xì)胞侵襲的倍數(shù)變化。將對(duì)照組歸一化為 1。星號(hào)（*）表示 p<0.05。

通過(guò)將細(xì)胞因子或趨化因子嵌入 VitroGel 水凝膠基質(zhì)中來(lái)評(píng)估細(xì)胞侵襲

即用型水凝膠-細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（CAT #IA-VHM01-1P）

插入物：VitroGel 水凝膠基質(zhì)與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合，有或無(wú) TGF-β1

外孔：MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)血清）或 MEM 含 20％FBS

細(xì)胞：U87-MG 細(xì)胞（每個(gè)插入物 3 x 10*4 細(xì)胞）

細(xì)胞孵育時(shí)間：24 小時(shí)

傳統(tǒng)的侵襲實(shí)驗(yàn)經(jīng)常用于檢查細(xì)胞向位于外孔中的趨化因子或細(xì)胞因子的侵襲。我們通過(guò)將細(xì)胞因子，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β1 嵌入水凝膠中而不是將其放置在外孔中來(lái)適應(yīng)這種方法。此外，將 VitroGel 水凝膠基質(zhì)與補(bǔ)充有 TGF-β1（30ng/mL）的 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基以 2:1 的比例混合（圖 2A）。將水凝膠混合物（100μL）均勻地加入插入物中，并在室溫下固化 20 分鐘。然后將細(xì)胞（3 x 10*4 ）添加到水凝膠頂部，并向外孔中填充 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或含有 20％FBS 的 MEM。將培養(yǎng)物在 37°C 下孵育 48 小時(shí)，然后進(jìn)行結(jié)晶紫染色以評(píng)估細(xì)胞侵襲。

為了確定細(xì)胞侵襲是否是由于 TGF-β1 而不是由于外孔中的 FBS 引起的，我們建立了一個(gè)對(duì)照組，其中水凝膠未補(bǔ)充 TGF-β1，但外孔中含有 20％FBS（圖 2A）。我們觀察到增強(qiáng)的外孔，這與圖 1B 和 1C 中顯示的結(jié)果一致。然而，與外孔中含有無(wú)血清培養(yǎng)基或含 FBS 的培養(yǎng)基的細(xì)胞相比，將 TGF-β1 添加到水凝膠中增加了 U87-MG 細(xì)胞通過(guò)水凝膠的侵襲（圖 2B-C）。這些發(fā)現(xiàn)表明，將細(xì)胞因子或趨化因子嵌入 VitroGel 水凝膠中是一個(gè)很好的平臺(tái)，可以更好地評(píng)估趨化作用。

圖 2. TGF-β1 在 VitroGel 水凝膠基質(zhì)內(nèi)誘導(dǎo) U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲。

A. 展示侵襲實(shí)驗(yàn)設(shè)置的可視化表示。B. 光學(xué)顯微鏡圖像顯示在不同組中進(jìn)行結(jié)晶紫染色后的細(xì)胞侵襲。使用 Zeiss 顯微鏡在 10X 放大倍數(shù)下獲得圖像。C. 每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件下 U87-MG 細(xì)胞侵襲的平均值。

2. VitroGel 高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（可調(diào)節(jié)）

不同水凝膠機(jī)械強(qiáng)度對(duì) U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞侵襲的影響

可調(diào)諧水凝膠-高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

? VitroGel RGD 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（CAT #IA-HC003-1P）

? 插入物：VitroGel RGD 水凝膠以 1:1、1:3 和 1:5 稀釋比例

? 外孔：MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)血清）或 MEM 含 20％FBS

? 細(xì)胞：U87-MG 細(xì)胞（每個(gè)插入物 3 x 10*4 細(xì)胞）

? 細(xì)胞孵育時(shí)間：24 小時(shí)

VitroGel 高濃度水凝膠的獨(dú)特性質(zhì)是，其機(jī)械強(qiáng)度可以通過(guò)使用 VitroGel 稀釋溶液進(jìn)行調(diào)整，以適應(yīng)不同的體外和體內(nèi)方法。根據(jù)稀釋比例，VitroGel 高濃度水凝膠可以實(shí)現(xiàn) 10-4000Pa 的機(jī)械強(qiáng)度（彈性模量）。因此，調(diào)節(jié) VitroGel 高濃度水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度是一種可以適應(yīng)并應(yīng)用于傳統(tǒng)侵襲實(shí)驗(yàn)的方法。

評(píng)估水凝膠的力學(xué)強(qiáng)度是否影響細(xì)胞侵襲，我們使用以下比例將VitroGel RGD與VitroGel稀釋液稀釋: 1:1、1:3和1:5（圖3A）。 水凝膠混合物加入到插入物中，在室溫下孵育20分鐘，懸浮在無(wú)血清培養(yǎng)基中的U87-MG膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞放置在插入物頂部。 外部孔用無(wú)血清培養(yǎng)基或含有20% FBS的培養(yǎng)基覆蓋。 然后，細(xì)胞在37°C下孵育24小時(shí)，隨后使用結(jié)晶紫染色檢查細(xì)胞侵襲。

研究結(jié)果顯示，增加VitroGel RGD的稀釋比允許細(xì)胞侵入水凝膠基質(zhì)，當(dāng)化學(xué)引誘物，如含有血清的培養(yǎng)基放置在外部孔時(shí)（圖3 B-C）。 具體地，我們證明VitroGel RGD與VitroGel稀釋液的1:5稀釋對(duì)水凝膠基質(zhì)的細(xì)胞侵襲最高，其次是1:3和1:1的稀釋比（圖3 B-C）。 這些發(fā)現(xiàn)表明，調(diào)整VitroGel RGD的力學(xué)強(qiáng)度會(huì)影響細(xì)胞對(duì)FBS梯度的運(yùn)動(dòng)能力。

圖 3. 使用 VitroGel RGD 高濃度水凝膠對(duì) U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）細(xì)胞的侵襲。

A. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置的示意圖。B. 顯微鏡圖像顯示 U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞通過(guò) VitroGel RGD 的侵襲。將水凝膠用 VitroGel 稀釋溶液以 1:1、1:3 和 1:5 的比例稀釋。使用 Zeiss 顯微鏡在 10X 放大倍數(shù)下獲得圖像。C. 對(duì)于 VitroGel RGD 的每種稀釋，F(xiàn)BS 組相對(duì)于無(wú) FBS 組的細(xì)胞侵襲倍數(shù)變化。將無(wú) FBS 組歸一化為 1。星號(hào)表示 p < 0.05。

向 VitroGel 高濃度水凝膠中添加細(xì)胞因子、趨化因子和生長(zhǎng)因子以研究細(xì)胞侵襲

可調(diào)諧水凝膠-高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel 3D 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（CAT #IA-HC001-1P）

VitroGel RGD 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒（CAT #IA-HC003-1P）

插入物：VitroGel 3D 和 VitroGel RGD 水凝膠以 1:3 稀釋比與 TGF-β1 或無(wú) TGF-β1

外孔：MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)血清）或 MEM 含 20％FBS

細(xì)胞：U87-MG 細(xì)胞（每個(gè)插入物 3 x 10*4 細(xì)胞）

細(xì)胞孵育時(shí)間：48 小時(shí)

VitroGel 高濃度水凝膠易于使用，可針對(duì)各種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)行定制，包括傳統(tǒng)的侵襲實(shí)驗(yàn)。與 VitroGel 即用型水凝膠類似，細(xì)胞因子、趨化因子或生長(zhǎng)因子可以摻入 VitroGel 高濃度水凝膠中以測(cè)定細(xì)胞侵襲。因此，我們通過(guò)將 TGF-β1 嵌入 VitroGel 3D 和 VitroGel RGD 高濃度水凝膠中來(lái)評(píng)估 U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞對(duì)細(xì)胞因子梯度的侵襲。

為了檢查 U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞向 TGF-β1 梯度的侵襲，我們首先用 VitroGel 稀釋溶液對(duì)每種水凝膠進(jìn)行 1:3 稀釋。隨后，將水凝膠混合物與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或補(bǔ)充有 TGF-β1（30ng/mL）的 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基以 4:1 的比例混合。將稀釋的水凝膠添加到插入物中，并允許固化 20 分鐘，然后將細(xì)胞懸液添加到水凝膠的頂部。在外孔中放置無(wú)血清培養(yǎng)基或補(bǔ)充有 20％FBS 的培養(yǎng)基。將細(xì)胞在 37°C 下孵育 48 小時(shí)。之后，通過(guò)進(jìn)行結(jié)晶紫染色來(lái)評(píng)估細(xì)胞侵襲。

TGF-β1 在水凝膠中的添加刺激了 U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲。此外，我們觀察到，與含有 TGF-β1 的 VitroGel 3D 相比，將 TGF-β1 嵌入 VitroGel RGD 中有利于細(xì)胞侵襲。與圖 3B 和 3C 中的發(fā)現(xiàn)一致，我們表明，在外孔中含有血清的培養(yǎng)基促進(jìn)了水凝膠中不含 TGF-β1 的組中的細(xì)胞侵襲。總之，結(jié)果表明，細(xì)胞因子、趨化因子或生長(zhǎng)因子可以摻入 VitroGel 高濃度水凝膠中以評(píng)估細(xì)胞侵襲。

圖 5. TGF-β1 在 VitroGel 3D 和 VitroGel RGD 中促進(jìn) U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲。

A. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置的可視化表示。培養(yǎng)物孵育 48 小時(shí)。B. 顯微鏡圖像顯示 U87-MG 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞通過(guò) VitroGel 3D 和 RGD 的侵襲。每種水凝膠用 VitroGel 稀釋溶液以 1:3 的比例稀釋，然后與 MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或含有 TGF-β1（30ng/mL）的 MEM 以 4:1 的比例混合。使用 Zeiss 顯微鏡在 10X 放大倍數(shù)下獲得圖像。C. 對(duì)于每種水凝膠，TGF-β1 在水凝膠和 FBS 組相對(duì)于無(wú) FBS 組的細(xì)胞侵襲倍數(shù)變化。將無(wú) FBS 組歸一化為 1。

結(jié)論

本應(yīng)用說(shuō)明中呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)表明，無(wú)論是現(xiàn)成的VitroGel 水凝膠基質(zhì)，還是可調(diào)節(jié)的VitroGel “高濃度”水凝膠均可用于傳統(tǒng)的侵襲試驗(yàn)。

VitroGel水凝膠基質(zhì)是研究人員的絕佳選擇，其實(shí)驗(yàn)不需要調(diào)整水凝膠的力學(xué)強(qiáng)度或特定的生物功能配體來(lái)研究細(xì)胞侵襲。相反，VitroGel高濃度水凝膠是可調(diào)節(jié)的；因此，當(dāng)與VitroGel稀釋液結(jié)合時(shí)，彈性模量的力學(xué)強(qiáng)度可調(diào)整至4000帕。我們的研究結(jié)果顯示，增加高濃度VitroGel水凝膠（VitroGel RGD與VitroGel稀釋液）的稀釋比增強(qiáng)了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲，表明力學(xué)強(qiáng)度影響細(xì)胞侵襲。此外，VitroGel高濃度水凝膠帶有特定的生物功能配體，如MMPs、RGD等，允許評(píng)估這些因素在細(xì)胞侵襲中的作用。這項(xiàng)研究表明，水凝膠中的生物功能配體影響膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲。

正如先前提到的，可與現(xiàn)成的VitroGel 細(xì)胞侵襲試劑盒和可調(diào)節(jié)的VitroGel 高濃度細(xì)胞侵襲試劑盒一起使用的新穎而獨(dú)特的應(yīng)用是添加細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子或藥理劑。因此，我們采用了這種方法來(lái)評(píng)估膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞對(duì)水凝膠內(nèi)TGF-β1梯度的侵襲。我們的研究結(jié)果表明，水凝膠中的TGF-β1刺激了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的侵襲，從而證明了在VitroGel水凝膠中結(jié)合因子是評(píng)估趨化作用的強(qiáng)大方法。總的來(lái)說(shuō)，基于VitroGel的細(xì)胞侵襲試劑盒構(gòu)成了一個(gè)功能強(qiáng)大且靈活的系統(tǒng)，可適用于各種侵襲試驗(yàn)應(yīng)用場(chǎng)景。

鏈接到使用的產(chǎn)品

細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

即用型，細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-VHM01-1P）

可調(diào)節(jié)，高濃度細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)試劑盒：

VitroGel 3D細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC001-1P）

VitroGel RGD細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC003-1P）

VitroGel MMP細(xì)胞侵襲試劑盒（Cat#IA-HC010-1P）

參考文獻(xiàn)

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