液體活檢（Liquid biopsy）是傳統(tǒng)組織活檢的非侵入性的替代方法，樣本類型包括血液、血漿/血清、腦脊液、尿液、唾液等。液體活檢樣本含有非常低濃度的無(wú)細(xì)胞核酸以及細(xì)胞外囊泡/外泌體。

液體活檢有助于癌癥研究：無(wú)細(xì)胞核酸“生物標(biāo)志物（biomarkers）”可用于檢測(cè)和監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)展；

（1）細(xì)胞凋亡或壞死引起的細(xì)胞死亡會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物泄漏到循環(huán)系統(tǒng)（cfDNA/cfRNA 來(lái)源）；

（2）允許檢測(cè)健康細(xì)胞 VS 疾病狀態(tài)細(xì)胞。

尿液作為液體活檢的樣本類型：

（1）血液中存在的所有物質(zhì)都會(huì)通過(guò)腎臟的過(guò)濾，并可以在尿液中排出=實(shí)時(shí)健康狀況；

（2）含有多種成分，如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、RNA、ctDNA、EVs、脫落細(xì)胞、蛋白質(zhì)、代謝物；用于疾病檢測(cè)和診斷的重要生物標(biāo)志物。

尿液成分：

①細(xì)胞DNA和cfDNA——可用于胎兒DNA篩查；

②循環(huán)腫瘤DNA——用于疾病監(jiān)測(cè)和治療結(jié)果；

③細(xì)胞RNA和cfRNA（miRNA）——生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)；

④蛋白質(zhì)——監(jiān)測(cè)疾病狀態(tài)；

⑤外泌體RNA——生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)。

與血液相比的特點(diǎn)：

①非傳染性；

②類似于血漿/血清的核酸譜；

③易于處理；

④蛋白質(zhì)濃度低；

⑤非侵入性；

⑥沒(méi)有用于分析前處理的標(biāo)準(zhǔn)化protocol。

Norgen Biotek為尿液DNA和RNA研究提供完整的工作流程解決方案：

樣品保存：

（1）樣本通常在二級(jí)設(shè)施中收集，溫度為-70℃；

（2）由于在收集階段時(shí)核酸的快速降解和微生物的生長(zhǎng)，尿液必須在運(yùn)輸前立即處理或冷凍；（尿液中的cfDNA主要通過(guò)核酸酶活性降解；尿液中的細(xì)菌生長(zhǎng)）；

（3）尿液樣本變化很大，并受健康狀況和收集時(shí)間等因素的影響。

冷凍尿液的壞處：

（1）豐富的蛋白質(zhì)的沉淀 = 核酸的顯著損失；

（2）細(xì)胞破裂 = 基因組核酸污染；

（3）冷鏈運(yùn)輸 = 昂貴，困難

（4）Norgen的收集和保存尿液的產(chǎn)品可以保存：①DNA、cfDNA；②脫落的細(xì)胞；③RNA、cfRNA；④細(xì)菌細(xì)胞；⑤外泌體；⑥病毒；⑦同時(shí)滅活細(xì)菌、真菌和病毒。

（5）相比于其他競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手：Norgen保存分析物的時(shí)間室溫下2 年以上。

Norgen的尿液樣本分離提取試劑盒：Norgen根據(jù)樣本類型提供專門(mén)的RNA和DNA試劑盒；

使用Norgen尿液提取試劑盒的優(yōu)勢(shì)：

（1）無(wú)苯酚氯仿；

（2）無(wú)載體RNA；

（3）為任何下游應(yīng)用提供無(wú)抑制劑樣品；

（4）無(wú)分子量區(qū)別或GC序列偏好；

（5）捕獲用于生物標(biāo)志物研究中的小RNA。

漿液形式（Slurry）VS 柱提法（Spin Column）:

Norgen基于專利的碳化硅樹(shù)脂技術(shù)，提供2種形式：漿液形式（Slurry）與柱提法（Spin Column）

（1）漿液形式（Slurry）通常用于大體積的血漿、血清和尿液；樣品與懸浮在緩沖液中的樹(shù)脂混合；

（2）對(duì)于新客戶，我們通常推薦柱提法（Spin Column）；樣品通過(guò)預(yù)先裝有樹(shù)脂的色譜柱。

尿液RNA純化：

（1）從各種尿樣體積中分離RNA；

（2）簡(jiǎn)單、快速的protocol；

（3）可用于選擇性分離外泌體RNA、cfRNA、基因組/細(xì)菌RNA或總RNA的試劑盒；

（4）無(wú)苯酚-氯仿；

（5）無(wú)載體RNA；

（6）無(wú)抑制劑RNA；

尿液DNA純化：

（1）從各種尿樣體積中分離DNA；

（2）簡(jiǎn)單、快速的protocol；

（3）可用于選擇性分離cfDNA、基因組/細(xì)菌DNA或總DNA的試劑盒；

（4）無(wú)苯酚-氯仿；

（5）有效去除PCR抑制劑。

尿液外泌體純化：

• 完整尿外泌體的純化和富集；

• 多樣化的尿樣輸入量；

• 無(wú)需耗時(shí)的超速離心；

• 無(wú)沉淀試劑或過(guò)夜孵育；

（5）與多物種的尿液兼容；

（6）不含RNA結(jié)合蛋白；

（7）適用于多種下游應(yīng)用。

Norgen的尿液外泌體純化與超速離心法（外泌體純化金標(biāo)準(zhǔn)）：

與超速離心相比，Norgen 的外泌體純化技術(shù)產(chǎn)生更高純度和尺寸特異性的外泌體。

核酸定量：

（1）常規(guī)核酸質(zhì)量檢測(cè)方法不夠靈敏；

（2）尿液和其他類型的液體活檢樣本中的cf-DNA和cf-RNA含量非常低；

（3）尿液中cf-DNA或cf-RNA的典型產(chǎn)量為 1-100 pg/μL (~0.001 - 0.1ng/uL)；

（4）因此，無(wú)法使用典型的DNA/RNA定量方法（特別是 Nanodrop）進(jìn)行定量；

（5）低豐度RNA的定量：請(qǐng)參閱Application Note 47 - Revised Guidelines for RNA Quality Assessment for Diverse Biological Sample Input.

艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商，為您推薦獨(dú)家代理Norgen Biotek品牌的各種尿液樣本提取純化試劑盒。產(chǎn)品僅限用于科研學(xué)術(shù)研究用途，不得用于醫(yī)療與診斷。

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