研究背景與目的：

背景：以往關(guān)于流感生物標(biāo)志物的研究主要集中在有限的標(biāo)志物子集上，且很少有研究同時考察I型和II型干擾素（IFNs）濃度與其他下游生物標(biāo)志物或炎性細胞因子的關(guān)系。

目的：開發(fā)能夠區(qū)分病毒感染與其他感染，甚至可能區(qū)分不同病毒的生物標(biāo)志物組合。

研究方法：

樣本來源：流感捐贈者和健康捐贈者的血清樣本來自BioIVT和BioChemed，均獲得IRB批準(zhǔn)用于生物標(biāo)志物研究。

測量方法：使用多種免疫測定方法，包括單重ELISA、基于板的化學(xué)發(fā)光多重測定法和電化學(xué)發(fā)光多重測定法，測量了包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-γ等在內(nèi)的多種干擾素和生物標(biāo)志物。

其中，該研究使用了PBL assay的以下產(chǎn)品： 人 IFN-α全亞型ELISA試劑盒（Human IFN-Alpha All Subtype ELISA Kit, High Sensitivity (Serum, Plasma, TCM), PBL-41115-1）、人IFN-β ELISA試劑盒（Human IFN-Beta ELISA Kit, High Sensitivity (Serum, Plasma, TCM), PBL-41415-1）、Human IFN 9-Plex ELISA kit (PBL-51500-1,已停產(chǎn)) 。

統(tǒng)計分析：

捐贈者類別（健康和流感）基于臨床診斷的疾病狀態(tài)確定。樣本中，如果某標(biāo)志物濃度低于給定測定的分析靈敏度，則根據(jù)制造商的檢測限聲明分配一個校正值。通過Mann-Whitney U檢驗比較分層組之間的生物標(biāo)志物群體。在Spearman條件下比較流感隊列中不同生物標(biāo)志物分布之間的相關(guān)性，并排除在相應(yīng)測定中呈現(xiàn)雙陰性結(jié)果的樣本。所有統(tǒng)計分析中，均設(shè)定α值為0.05以界定統(tǒng)計顯著性。

研究解釋：

在流感發(fā)病期間，I型和II型干擾素（IFN-α、β、γ和ω）的上調(diào)普遍存在且高度相關(guān)。CXCL-10、TNF-α、IL-10和新蝶呤水平與綜合干擾素評分（IFN Score）呈正相關(guān)趨勢。更大的流感隊列可以提供更多關(guān)于臨床生物標(biāo)志物相互作用和疾病顯著性的解釋。

研究結(jié)果：

干擾素表達：在流感患者血清中，I型和II型干擾素（IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω）的表達普遍上調(diào)且高度相關(guān)。

其他生物標(biāo)志物：CXCL-10、TNF-α、IL-10和Neopterin水平與綜合干擾素評分（IFN Score）呈正相關(guān)趨勢。

健康對照組：在健康捐贈者中，幾乎檢測不到IFN-α、IFN-β或IFN-ω。

結(jié)論：

· 在流感患者血清中，IFN-α和IFN-ω高度相關(guān)。

· CXCL-10與流感中的IFN評分高度相關(guān)。

· 在健康捐贈者中幾乎檢測不到IFN-α、IFN-β或IFN-ω。

· 更大、信息更完整的患者隊列應(yīng)提供更可靠的結(jié)果。

· 初步的小型研究顯示，乙型肝炎和丙型肝炎捐贈者中未檢測到I型IFN。急性與慢性病毒感染之間的差異？

健康與流感捐贈者人口統(tǒng)計學(xué)信息：

· 健康捐贈者（n=64），男性25人（39.1%），女性39人（60.9%），平均年齡39.0±14.1歲。

· 流感捐贈者（n=38），男性16人（42.1%），女性22人（57.9%），平均年齡43.3±15.9歲。

表1. 健康人群和流感人群的人口統(tǒng)計數(shù)據(jù)。

 表2. 群體間的生物標(biāo)記、統(tǒng)計和可讀性指標(biāo)。

圖1：散點圖概述了健康（灰色，n=64）和流感（紅色，n=38）隊列中個體生物標(biāo)志物水平的中位數(shù)和四分位數(shù)范圍。

圖2：流感（“流感”）患者生物標(biāo)志物分層在健康人群切點（第95百分位）以上（藍色）或以下（紅色）水平的熱圖可視化。

圖3：流感隊列的Spearman相關(guān)指標(biāo)。（A-C）所選生物標(biāo)志物或IFN評分的個體散點圖和解析p值相關(guān)性。(D)配對生物標(biāo)志物之間的Spearman R值。在斯皮爾曼分析中，顯示雙重陰性反應(yīng)的樣品被省略。

研究意義：

臨床應(yīng)用：該研究為開發(fā)用于區(qū)分病毒感染與其他感染或不同病毒感染的生物標(biāo)志物組合提供了初步數(shù)據(jù)支持。

未來方向：更大的流感隊列和更完整的患者信息將提供更可靠的結(jié)果，并為進一步研究急性與慢性病毒感染之間的差異提供基礎(chǔ)。

研究限制：

樣本量：當(dāng)前研究樣本量相對較小，可能影響結(jié)果的普適性和可靠性。

后續(xù)驗證：需要更大規(guī)模的研究來驗證當(dāng)前發(fā)現(xiàn)，并探索其他潛在的生物標(biāo)志物。

參考文獻：

1. Llibre et al. Front. Cell Infect. Microbiol. 2019 Aug 22; 9:296. Alpha and Beta in Flu.

2. Pizzini et al. Influenza Other Respir. Viruses. 2019 Sep 6. Neopterin in Flu.

3. Hoffmann et al. Sci. Rep. 2016 Dec 6; 6:38532. IP-10, IFN-γ in Flu and Pneumonia.