常規(guī)免疫沉淀（IP）的痛點(diǎn)：

免疫沉淀（IP）后的免疫印跡（WB）過程中必然涉及到免疫沉淀用一抗(多為IgG)的變性，因此如果使用傳統(tǒng)的二抗(非還原和還原型的IgG均能檢測到)會(huì)在印跡膜上出現(xiàn)雜帶的干擾，也就是說，由于傳統(tǒng)的二抗能與還原型的IgG結(jié)合，在印跡膜上顯示出~55kDa的重鏈條帶和~23kDa的輕鏈條帶，這些均為非特異性條帶，對免疫印跡結(jié)果的分析帶來很大干擾。

為什么要選擇TrueBlot ？

TrueBlot^?產(chǎn)品線旨在解決在對免疫沉淀 (IP) 或共免疫沉淀 (Co-IP) 樣品進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡時(shí)遇到的常見實(shí)驗(yàn)問題。TrueBlot^?二抗的獨(dú)特檢測特性可識別天然（非還原）形式的 IgG而不是還原形式的 IgG，以消除 IP 抗體變性重鏈和輕鏈的干擾，當(dāng)與TrueBlot^? IP微珠搭配使用時(shí)，TrueBlot^?產(chǎn)品系列可助您輕松獲得可重現(xiàn)的、出版質(zhì)量的IP/Co-IP-Western印跡結(jié)果。

TrueBlot產(chǎn)品介紹及結(jié)果展示：

1. HRP標(biāo)記TrueBlot^TM系列二抗

TrueBlot^TM系列二抗為美國ROCKLAND公司的專利產(chǎn)品，因?yàn)門rueBlotTM系列二抗能夠特異性的結(jié)合帶有天然二硫鍵結(jié)構(gòu)的IgG(Goat, Mouse或Rabbit)，因此能夠僅檢測非還原型的IgG（一抗IgG天然構(gòu)象）。

使用TrueBlot^TM系列二抗則可避免上述情況，特異地檢測出免疫沉淀而得的抗原(如下圖）。

由結(jié)果可知：用傳統(tǒng)的HRP標(biāo)記二抗檢測時(shí)會(huì)出現(xiàn)輕鏈和重鏈條帶，而用TrueBlot^TM二抗檢測時(shí)則沒有，表明TrueBlot^?二抗僅識別天然（非還原）狀態(tài)的一抗，消除重鏈和輕鏈條帶的干擾，以為免疫沉淀樣品提供準(zhǔn)確、出版質(zhì)量的WB結(jié)果。

2. 熒光標(biāo)記TrueBlot二抗：

Fluorescent TrueBlot是一款功能強(qiáng)大、特異性高的產(chǎn)品，可與近紅外染料搭配使用。

3. TrueBlot^TM系列微球

TrueBlot產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、完全排除的免疫沉淀用一抗重輕鏈的干擾，結(jié)果清晰、準(zhǔn)確，特異性強(qiáng)；

2、使用簡單，僅將傳統(tǒng)的二抗替換成TrueBlot^TM系列二抗即可。

注意要點(diǎn)：

1、需對免疫沉淀物進(jìn)行徹底還原；

2、免疫印跡時(shí)需用牛奶作為封閉液，而不能用BSA(牛血清白蛋白)，因?yàn)楹笳叩姆忾]作用不強(qiáng)；

3、當(dāng)用Rabbit IgG TrueBlot^TM對免疫印跡膜進(jìn)行檢測時(shí)，要先用anti-IgG微球來進(jìn)行免疫沉淀步驟，而不能使用Protein A或Protein G微球，因?yàn)楹笳吲cRabbit IgG有很強(qiáng)的親合力，會(huì)引起污染。

TrueBlot系列產(chǎn)品推薦：

*上述產(chǎn)品僅限用于科研學(xué)術(shù)研究用途，不得用于醫(yī)療與診斷。

如何做好IP/Co-IP實(shí)驗(yàn)，TrueBlot產(chǎn)品選擇指南：

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