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品牌專題在生命科學領域,尤其是發(fā)育生物學和臨床樣本研究中,研究人員常常面臨一個重大挑戰(zhàn):如何從極有限的生物液體樣本中高效提取細胞外囊泡(EVs)?這類樣本通常獲取困難、體積微小,卻又蘊藏著極為珍貴的生物學信息。System Biosciences(SBI)推出的SmartSEC Mini EV Isolation System(貨號SSEC100A-1),正是為解決這一難題而生——全球首款專為10-100uL微量樣本設計的商業(yè)化EV分離試劑盒。
SmartSEC Mini 細胞外囊泡(EV)分離系統(tǒng)——適用于小體積樣本與發(fā)育生物學研究
最低樣本需求,最大研究洞察

探索EV生物學的新前沿
無論是珍貴的臨床樣本,還是難以收集的發(fā)育生物學模式生物體液,研究人員日益面臨從小體積樣本中分離細胞外囊泡(EVs)的挑戰(zhàn)。為支持這類研究,SBI將我們強大的SmartSEC技術優(yōu)化,推出了首款商業(yè)化試劑盒,專門用于從10–100 uL生物體液中分離EV(見表1)。該SmartSEC Mini EV分離系統(tǒng)已在果蠅、渦蟲、擬南芥以及人、小鼠和大鼠樣本中得到驗證,助您突破EV生物學的研究邊界。
表1. SmartSEC Mini推薦上樣體積
生物體 | 生物體液 | 上樣體積 |
黑腹果蠅 | 血淋巴 | 10 uL |
渦蟲 | 細胞培養(yǎng)液 | 100 uL |
擬南芥 | 質(zhì)外體液 | 50 uL |
人、小鼠、大鼠 | 血清或血漿 | 10-25 uL |
SmartSEC Mini是一項基于色譜法的專利EV分離技術,結合了尺寸排阻色譜(SEC)的所有優(yōu)點——高純度、高得率、優(yōu)異重現(xiàn)性及EV完整性保持——并通過污染物捕獲功能克服了傳統(tǒng)SEC的局限性,實現(xiàn)快速、簡便、低樣本量的EV分離。
產(chǎn)品亮點:
目前市面上唯一可處理低至10 uL樣本的商業(yè)化EV分離試劑盒。
適用于從多種生物體液中分離EV。
已在下述樣本類型中驗證通過:
·黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)
·渦蟲(Planaria)
·擬南芥(Arabidopsis thaliana)
·小鼠
·大鼠
相較于超速離心法,純度和得率更高。
兼容多數(shù)下游應用,如質(zhì)譜分析、Western Blot、納米顆粒追蹤分析(NTA)和透射電子顯微鏡(TEM)。
僅需30分鐘即可完成EV分離
1. 加載生物體液,室溫孵育30分鐘
2. 500 x g離心30秒
3. EV存在于流出液中
4. 可選:添加緩沖液并離心最多2次,以最大化回收率

圖 1.簡單的 SmartSEC Mini 工作流程。
支持數(shù)據(jù):見證SmartSEC Mini如何高效分離多種物種微量體液中的EVs:

圖2. SmartSEC Mini從10 uL果蠅血淋巴中穩(wěn)健分離EVs,Western Blot分析顯示1 ug等價蛋白結果。 常見果蠅外泌體標記物顯示于分子量標記旁。數(shù)據(jù)由哥廷根大學Karen Linnemannstr?m博士提供。
SmartSEC Mini還用于從100uL渦蟲新成層培養(yǎng)基(圖3)和50uL擬南芥(圖4)中分離EV,如圖所示。

圖3. SmartSEC Mini從100 uL渦蟲新胚細胞培養(yǎng)基中穩(wěn)健分離EVs。 數(shù)據(jù)由斯托瓦斯醫(yī)學研究所Vidyanand Sasitharan博士提供。

圖4. SmartSEC Mini從50 uL擬南芥質(zhì)外體液中穩(wěn)健分離EVs。 樣本由加州州立大學東灣分校Claudia Uhde-Stone博士提供。
SmartSEC Mini 能夠?qū)?10 微升小鼠血清(圖 5A、表 2)和 10 微升人類血清(圖 5B、表 2)中的細胞外囊泡進行有效隔離,這一點已通過蛋白質(zhì)印跡數(shù)據(jù)得到證實。此外,SmartSEC Mini 能夠分離出比競爭對手基于超濾技術的細胞外囊泡分離產(chǎn)品更多的細胞外囊泡(表 3)。

圖 5.SmartSEC Mini 可將EV與人和小鼠血清進行完全隔離。
表2. 通過NTA評估,SmartSEC Mini可從10 uL小鼠和10 uL人血清中完全分離EVs。
生物體 | 總得率 | 濃度 | 純度 |
人 | 33.2 ug | 2.7 x 109 顆粒/mL | 1.7 x 107 顆粒/ug |
小鼠 | 25.0 ug | 2.95 x 109 顆粒/mL | 4.7 x 107 顆粒/ug |
表3. SmartSEC Mini 能分離的EV數(shù)量多于競爭對手的產(chǎn)品。

SmartSEC Mini 專門富集 EV 與脂蛋白顆粒和血液微粒,如質(zhì)譜法所示(圖 6 和表 4)。我們使用快速簡便的 SmartSEC Mini 工作流程從 20 uL 人血清中分離 EV,并通過質(zhì)譜分析 EV 相關蛋白。在我們鑒定的 ~600 種蛋白質(zhì)中,使用 FunRich 工具進行的功能富集分析表明,已知超過 50% 的蛋白質(zhì)與外泌體相關,而 <30% 與血液微粒相關,<10% 與脂蛋白顆粒相關(圖 6)。

圖6. 質(zhì)譜分析表明,SmartSEC Mini 能更有效地分離出細胞外囊泡。訪問systembio.com/SmartSEC-Mini 網(wǎng)站,可查看一些分離出的蛋白質(zhì)的列表。
SBI始終致力于將前沿科技創(chuàng)新轉(zhuǎn)化為簡單易用的研究工具,幫助全球科學家推動發(fā)現(xiàn)進程。除了SmartSEC Mini,SBI還提供全系列外泌體和基因編輯研究工具。了解更多信息,請聯(lián)系SBI中國區(qū)代理艾美捷科技!
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