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產(chǎn)品英文名稱：Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)

產(chǎn)品中文名稱：低生長(zhǎng)因子，基質(zhì)膠（類器官，3D培養(yǎng)）

貨號(hào)：A-MGL01

規(guī)格：5mL、10mL

儲(chǔ)存條件：≤-20°C  

產(chǎn)品描述：

Biogradetech貨號(hào)A-MGL01低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠是一種連續(xù)的特殊細(xì)胞外基質(zhì)薄膜，形成了內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞與其相鄰基質(zhì)之間的界面。基質(zhì)膠在發(fā)育和傷口愈合過(guò)程中會(huì)被降解和再生。它不僅支持細(xì)胞和細(xì)胞層，還對(duì)組織結(jié)構(gòu)起著重要作用，影響細(xì)胞的粘附、遷移、增殖和分化。基質(zhì)膠對(duì)轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞的侵襲具有重要阻隔作用。 

Biogradetech貨號(hào)A-MGL01低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）腫瘤中純化得到的可溶性基質(zhì)膠。低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠在37°C下形成重組基底膜基質(zhì)膠。低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠的主要成分包括層粘連蛋白、膠原IV、接觸蛋白和肝素硫酸酯蛋白聚糖。  

適用范圍：

除了適用于標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠可用的應(yīng)用外，Biogradetech低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠也適用于對(duì)基質(zhì)膠制備要求較高的研究應(yīng)用，例如對(duì)管狀骨細(xì)胞信號(hào)優(yōu)化的研究。它還被用于研究原代小鼠哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞的基因表達(dá)（減少生長(zhǎng)因子引起的背景信號(hào)）。  

產(chǎn)品參數(shù)：

1. 來(lái)源：小鼠腫瘤；

2. 顏色：含酚紅的基質(zhì)膠呈黃粉色，無(wú)酚紅的基質(zhì)膠呈半透明淡黃色；

3. 形態(tài)：標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠在4°C下溶解為透明液體；高濃度基質(zhì)膠在0°C下溶解后為透明液體，長(zhǎng)時(shí)間放置于4°C后會(huì)半凝膠化。

4. 濃度：蛋白質(zhì)濃度范圍為8至26 mg/mL。

5. 內(nèi)毒素：≤ 4.5 EU/mL

6. 凝膠時(shí)間：室溫下5-30分鐘凝膠，當(dāng)溫度從22°C升至37°C時(shí)，凝膠形成速度加快。

包被涂層方法：

打造成功的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境，關(guān)鍵在于選擇合適的基質(zhì)膠。其中，基質(zhì)膠的包被涂層方法對(duì)于不同的應(yīng)用需求有所不同。下面，我們將介紹基質(zhì)膠的包被涂層步驟，幫助您輕松應(yīng)對(duì)各種細(xì)胞培養(yǎng)挑戰(zhàn)。 

將Biogradetech貨號(hào)A-MGL01低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠在2-8°C的冰箱中過(guò)夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同，因此建議在解凍過(guò)程中將基質(zhì)膠放在冰上保持低溫。解凍后的基質(zhì)膠在15°C以上的溫度中很快凝固；在使用基質(zhì)膠時(shí)，保持其在冰上以防止過(guò)早凝膠化。 

基質(zhì)膠有許多不同厚度和濃度的應(yīng)用。對(duì)于一些應(yīng)用，如內(nèi)皮細(xì)胞形成類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)（管狀結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)）、大鼠主動(dòng)脈組織分化為類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)（主動(dòng)脈環(huán)形成實(shí)驗(yàn)）、上皮器官樣結(jié)構(gòu)或腫瘤器官樣結(jié)構(gòu)的形成，需要較厚的凝膠，也就是厚層凝膠法。而對(duì)于一些應(yīng)用，如原代細(xì)胞的擴(kuò)增，需要薄層涂層而不是厚凝膠，因此應(yīng)使用薄層凝膠法。  

厚層凝膠法：

1. 按上述方法解凍基質(zhì)膠；

2. 緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3. 向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入200-300μL/cm²基質(zhì)膠，平鋪均勻，注意避免產(chǎn)生氣泡；

4. 將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，等待 30 min 形成凝膠即可使用。

薄層包被法：

1. 按上述方法解凍基質(zhì)膠；

2. 緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋。建議將基質(zhì)膠稀釋為1:100以用于原代細(xì)胞的擴(kuò)增。對(duì)于你的應(yīng)用，可能需要經(jīng)驗(yàn)性地確定最佳涂層濃度；

4. 加入適量體積的該溶液覆蓋整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板表面。建議加入300μL/cm²的溶液；

5. 將培養(yǎng)板放置在室溫，孵育至少1h；

6. 吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。

通過(guò)以上步驟，您可以根據(jù)不同的細(xì)胞培養(yǎng)需求，靈活選擇適合的基質(zhì)膠涂層方法。無(wú)論是厚凝膠還是薄層涂層，都能為您的細(xì)胞研究提供穩(wěn)定的3D培養(yǎng)支持，助您取得優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。趕快嘗試基質(zhì)膠涂層方法，提升您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)效果吧！