隨著干細(xì)胞治療和基于類器官藥物開發(fā)技術(shù)的進(jìn)步，基質(zhì)膠在3D細(xì)胞培養(yǎng)和類器官中扮演著關(guān)鍵的角色，為其提供營養(yǎng)和支持。此外，基質(zhì)膠還廣泛應(yīng)用于血管生成和體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。基底膜提取物（BME）是一種含有細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的基質(zhì)膠，其中包含膠原蛋白、層粘連蛋白、巢蛋白和硫酸肝素蛋白聚糖等成分。基底膜基質(zhì)膠對細(xì)胞的生長、結(jié)構(gòu)和行為等方面具有至關(guān)重要的影響，能促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和血管形成等。因此，它常被用作3D細(xì)胞培養(yǎng)的底物，也應(yīng)用于血管生成測定、類器官培養(yǎng)和腫瘤藥物研究等領(lǐng)域。  

Biogradetech基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì)（Basement Membrane, BM）。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）是多細(xì)胞有機(jī)體中細(xì)胞周圍由多種大分子組成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。   

Biogradetech基底膜基質(zhì)（Basement Membrane Matrix）是一種可溶性的基質(zhì)膠。它通過基因編輯技術(shù)將多種表達(dá)膠原蛋白的基因序列插入經(jīng)過永生化處理的小鼠腫瘤細(xì)胞系中制備而成。隨后，將這些細(xì)胞系接種到小鼠體內(nèi)形成移植瘤，并通過多道純化工藝提取蛋白混合物。該基質(zhì)的主要成分包括層粘連蛋白、膠原蛋白IV、硫酸肝素糖蛋白和巢蛋白，還包括TGF-β、EGF、IGF-1、bFGF和基質(zhì)金屬蛋白酶等，以及在腫瘤中自然出現(xiàn)的其他生長因子。這些蛋白混合物在37℃條件下形成凝膠，為細(xì)胞的3D生長提供了適宜的伸展空間和豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，有利于各種類型的細(xì)胞進(jìn)行3D生長和誘導(dǎo)分化。在室溫條件下，基質(zhì)膠能夠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有助于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。  

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重要Tips：處理基質(zhì)膠時，保持低溫!

Biogradetech基質(zhì)膠在低于10°C的溫度下，由于能量不足無法促使共價鍵結(jié)合，因此呈現(xiàn)液體狀態(tài)。而在22℃至37℃之間，它的大分子間的共價鍵可以快速結(jié)合并聚合成膠體，形成凝膠狀。這種凝膠化的基質(zhì)膠不僅作為細(xì)胞的重要底物，有利于細(xì)胞附著和提供支架和營養(yǎng)物質(zhì)，還具備類似于體內(nèi)環(huán)境的微環(huán)境，有助于細(xì)胞的3D生長。基質(zhì)膠的濃度和完整性常常會影響體外細(xì)胞的行為。因此，在使用基質(zhì)膠時，選擇適當(dāng)?shù)奶幚矸椒ê桶环椒ㄊ侵陵P(guān)重要的，這有助于提高2D和3D培養(yǎng)方法的穩(wěn)定性并改善細(xì)胞的行為。 

由于Biogradetech基質(zhì)膠在超過10°C的條件下會開始凝膠化，我們建議在分裝和使用基質(zhì)膠時采用基質(zhì)膠分裝低溫指示冰盒、吸頭預(yù)冷低溫指示冰盒、移液管、吸頭和離心管等器具。當(dāng)Biogradetech基質(zhì)膠處于液體狀態(tài)時，可以輕松進(jìn)行稀釋和其它操作。但需要注意的是，2至8°C溫度的波動可能會導(dǎo)致Biogradetech基質(zhì)膠發(fā)生微小的物理性質(zhì)變化。這些變化最終可能會影響所培養(yǎng)的細(xì)胞的健康生長、分化和運(yùn)動能力。   

 在分裝Biogradetech基質(zhì)膠時，需要注意如下：

1. 將基質(zhì)膠儲存在-20℃的條件下可以保持其穩(wěn)定性。建議將基質(zhì)膠分裝成最小使用量（通常為200μL或500μL），并儲存在-20℃的冰箱中備用。請避免將其儲存在自動除霜的冰箱中。

2. 將Biogradetech基質(zhì)膠插入碎冰中，然后放置于4°C的冰箱中，在冰上過夜進(jìn)行解凍，這樣可以在穩(wěn)定的低溫環(huán)境中緩慢而充分地使基質(zhì)膠融化。

3. Biogradetech基質(zhì)膠在4°C的冰箱中存放時間不應(yīng)超過一天。

4. 在使用之前，所有需要使用的耗材和工具都必須在冰上進(jìn)行預(yù)冷處理，盡量保持操作的迅速進(jìn)行。

5. 在稀釋基質(zhì)膠時，建議使用在冰上預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基或pH值為7.4的PBS溶液。