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Biogradetech:免疫球蛋白Y(IgY)親和純化填料

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2023-11-03     
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免疫球蛋白Y(Immunoglobulin Y,IgY)是鳥類(如雞、鴨等)血清和蛋黃中的主要免疫球蛋白,可以識(shí)別和結(jié)合特定的抗原,鳥類通過產(chǎn)生IgY來應(yīng)對感染和疾病,保護(hù)自身免受病原體的侵害。與免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)相比,IgY顯示出明顯的結(jié)構(gòu)差異,其包含三個(gè)恒定的重結(jié)構(gòu)域(與哺乳動(dòng)物的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域相反),并且缺少輕鏈和重鏈之間的鉸鏈區(qū)域。IgY具有更長的半衰期,可以在鳥類體內(nèi)更長時(shí)間地提供免疫保護(hù)。此外,IgY還具有較強(qiáng)的耐熱性和耐酸性,這使得它在某些應(yīng)用中具有優(yōu)勢。由于IgY的特殊性質(zhì)和廣泛的應(yīng)用前景,研究人員和產(chǎn)業(yè)界對其進(jìn)行了廣泛的研究和開發(fā)。利用鳥類產(chǎn)生的IgY抗體,可以開發(fā)出各種應(yīng)用,包括抗體生產(chǎn)、免疫診斷、生物制藥等。同時(shí),IgY親和層析樹脂也被廣泛應(yīng)用于IgY的純化和富集過程中,以獲得高純度的IgY。


Immunoglobulin Y.png


Biogradetech可同時(shí)提供高品質(zhì)的IgY親和層析介質(zhì)和預(yù)裝柱,可以快速、簡單從樣本中純化IgY:

類別貨號(hào)規(guī)格原理
IgY親和層析介質(zhì)C-BETB012-10mL10mL高剛性嗜硫親和層析介質(zhì),對于分子量較大的IgY有較高的結(jié)合載量,其原理是利用電子供體和電子受體之間的相互作用來分離純化生物分子,這種作用力在高鹽環(huán)境中得以加強(qiáng),在低鹽環(huán)境下減弱。
C-BETB012-100mL100mL
C-BETB012-50mL50mL
C-BETB012-250mL50mL
C-BETB012-500mL250mL
C-BETB012-1L1L
IgY親和層析預(yù)裝柱C-BETB012-1mL-Column1mL-Column
C-BETB012-5mL-Column5mL-Column


使用方法如下:

溶液制備

結(jié)合緩沖液:0.02 M PB,0.5 M K 2 SO 4 ,pH 7.5,0.45 μm 濾膜過濾。 

洗脫緩沖液:0.02 M PB,pH 7.5,0.45 μm 濾膜過濾。 

再生液:0.02 M PB,30%異丙醇,pH 7.5。  



平衡使用 3-5 倍柱體積(以下簡稱 CV)的 buffer A 清洗柱子,再使用 3-5 CV 的 buffer C 清洗,最后使用 3-5 CV 的 buffer A 平衡(平衡至基線)。

上樣根據(jù)介質(zhì)載量和工藝需求選擇合適的樣品量進(jìn)行上樣(固體樣品請使用 buffer A 配制,液體樣品可使用 buffer A 進(jìn)行透析)。

淋洗:使用 3-5 CV 的 buffer A 清洗柱子(淋洗至基線)。

洗脫:使用 15 CV 的 buffer B 進(jìn)行洗脫,并根據(jù)紫外峰收集洗脫樣品。可以采用線性洗脫和階梯式梯度洗脫兩種方式進(jìn)行。

再生:在進(jìn)行一定次數(shù)的使用后(具體使用次數(shù)和上樣中的污染物有關(guān)),需要對柱子進(jìn)行再生,以下提供一種方法:首先用 3-5 CV 的純水清洗層析柱,然后可用 0.02 M PB+30%異丙醇,pH 7.5 清洗 7-10 CV,再用純水清洗 7-10 CV,最后用 20%乙醇沖洗 2-3 CV,并置于 4-30 ℃環(huán)境中保存。

在位清洗:為了避免不同樣品間的相互干擾,或者當(dāng)介質(zhì)污染比較嚴(yán)重時(shí)(反壓增加),需要對介質(zhì)進(jìn)行在位清洗。 

(1)對于以離子鍵結(jié)合的蛋白,可用 2-3 CV 以上的 2 M NaCl 清洗,并用 3 CV 以上的純 水沖洗。 

(2)對沉淀蛋白、以疏水性結(jié)合的蛋白或脂蛋白,可用 2-3 CV 的 1M NaOH 清洗(10-20 min),并用 5-10 CV 平衡液和 3 CV 以上的純水沖洗。 

(3)對疏水性結(jié)合的蛋白、脂蛋白和脂類物質(zhì),可用 5-10 CV 的 70%乙醇或 30%異丙醇 清洗(15-20 min),并用 5-10 CV 的純水沖洗。 此外,也可用 2 CV 含去污劑的堿性或酸性溶液清洗。如用 0.1-0.5%的非離子去污劑+0.1 M 乙酸沖洗 1-2 h,并用 5-10 CV 的 70%乙醇沖洗去除去污劑,然后用 5-10 CV 的純水沖洗。  


Biogradetech是全球生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合,包括細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到全球生物研究機(jī)構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧,他們以高質(zhì)量、可靠性和服務(wù)而聞名。   


作為Biogradetech在中國的區(qū)域獨(dú)家代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Biogradetech產(chǎn)品以及客戶訂制化服務(wù)。歡迎大家隨時(shí)聯(lián)系我們!  


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