除極少數(shù)情況外，哺乳動物的IgG型抗體由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈組成，它們通過二硫鍵相互連接。每條鏈都包含特定物種的恒定區(qū)和可變序列，可變序列決定了抗原結合特性，如親和力和特異性 （圖1） 。

科研中常用的抗體是多克隆抗體或單克隆抗體

圖1：哺乳動物IgG由兩條重鏈和兩條輕鏈組成。重鏈和輕鏈均包含特定物種的恒定區(qū)和可變序列，這些序列負責目標識別。

多克隆抗體

多克隆抗體是由具有不同可變序列的抗體分子組成的混合物，因此它們的抗原結合特性也各不相同 （圖2）。多克隆抗體通常是通過免疫動物的血清獲得的。【動物免疫后，激活的B細胞分化為漿細胞，最終產(chǎn)生大量的可溶性抗體。這些高度特化的細胞攜帶了分泌抗體的遺傳信息。】

為了收獲盡可能多的含抗體的血清，通常會犧牲宿主動物，而漿細胞以及特定抗體的遺傳信息也隨之丟失。因此，所獲得的抗血清是一種有限的資源。只有通過重新免疫更多的動物，才能獲得新的抗血清，這不可避免地會導致一定程度的批次差異，無論新材料經(jīng)過多么嚴格的驗證。

單克隆抗體

單克隆抗體由具有相同抗原識別特性的相同抗體分子組成 （圖3）。1975年，引入了雜交瘤技術。在此方法中，將產(chǎn)生抗體的B細胞與骨髓瘤細胞系融合，以生成所謂的雜交瘤細胞，這些細胞可以無限繁殖。每個雜交瘤克隆產(chǎn)生的抗體都具有相同的特性。這種技術的優(yōu)勢顯而易見。不再需要每次從頭開始廣泛表征和驗證新的抗血清批次。無需費力地調(diào)整協(xié)議以適應變化的抗體特性。隨著時間的推移，科學界積累的驗證數(shù)據(jù)保持有效，并導致一種越來越被表征且有價值的研究試劑。然而，即使是通過雜交瘤技術產(chǎn)生的單克隆抗體也存在一定的局限性。它們可能會發(fā)生遺傳轉移，從而導致特異性和親和力的不期望變化。一般來說，單克隆抗體的遺傳信息是未知的，必須通過謹慎的細胞庫管理來最小化抗體特性的變化。一些雜交瘤細胞系可能會變得不穩(wěn)定，停止表達抗體。

圖2：多克隆抗體是由同一物種的抗體分子組成的混合物，它們針對同一目標，但具有不同的可變目標識別序列。

 圖3：單克隆抗體是具有相同恒定區(qū)和可變序列的相同抗體分子。

重組抗體

重組抗體是通過使用已知抗體編碼基因在體外生產(chǎn)的單克隆抗體。可以通過雜交瘤測序獲得抗體的重鏈和輕鏈的編碼序列。將這些序列克隆到表達載體中，并將其轉染到哺乳動物宿主細胞系中以表達抗體。可以生成穩(wěn)定轉染的細胞克隆，并調(diào)整和優(yōu)化表達。

一旦抗體被克隆，就可以對其進行改造。可以通過突變可變序列來改變結合特異性和親和力。可以將一個物種的恒定區(qū)替換為另一個物種的恒定序列，從而產(chǎn)生嵌合重組抗體（圖4）。這些經(jīng)過基因工程改造的嵌合重組抗體保留了原始抗體克隆的所有抗原識別特性（圖5）。

圖4：通過將單克隆抗體的恒定區(qū)替換為另一個物種的恒定序列，獲得嵌合重組抗體。

重組抗體與單克隆抗體相比具有以下優(yōu)勢：

它們是在高度定義和控制的條件下生產(chǎn)的無限資源，批次間差異極小。從細胞培養(yǎng)上清液中純化時無需犧牲動物。序列是已知的，因此抗體不會因遺傳轉移而發(fā)生變化。相反，有多種抗體工程選項可用于根據(jù)特定實驗需求調(diào)整抗體。Synaptic Systems提供了一個不斷增加的嵌合重組抗體系列，其恒定區(qū)來自兔子、豚鼠、大鼠、人類和雞。它們都源自表現(xiàn)良好的小鼠或大鼠單克隆抗體，并且可以與常規(guī)的物種特異性二抗結合使用。因此，它們是您手中有價值且可靠的研究工具，具有卓越的性能。

IHC 大鼠腦

 圖5：嵌合重組抗體保留了其原始單克隆抗體的所有抗原結合特性，如代表性實驗的比較實驗圖所示。IHC圖像顯示了用單克隆小鼠抗IBA1抗體234 011和源自IBA1抗體234 011的嵌合重組雞抗IBA1抗體234 009對大鼠腦切片進行的免疫染色（IBA1 =紅色，DAPI =藍色）。

IHC-P 小鼠腦

圖5a：IHC-P圖片展示了利用單克隆小鼠抗VGLUT2抗體135 421和新出現(xiàn)的嵌合重組豚鼠抗VGLUT2抗體135 418對小鼠腦切片進行的間接免疫染色（VGLUT2 =棕色，蘇木精=藍色）。

ICC 神經(jīng)元

圖5b：在ICC實驗中，使用c-Fos抗體226 017（大鼠單克隆）和c-Fos抗體226 008（兔重組）對大鼠海馬神經(jīng)元進行間接免疫染色（c-Fos =紅色，MAP2 188 002（多克隆兔抗血清）和MAP2 188 011（單克隆小鼠純化IgG）=綠色，DAPI=藍色）。

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