簡(jiǎn)介

    多克隆抗體

    單克隆抗體

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幾乎沒(méi)有例外，哺乳動(dòng)物IgG型抗體由兩條完全相同的重鏈和兩條完全相同的輕鏈通過(guò)雙硫鍵連接在一起。每條鏈都包含一個(gè)物種特異的恒定區(qū)和一個(gè)可變序列區(qū)，此可變序列決定了抗原結(jié)合特性，例如親和性和特異性(Amzel and Poljak, 1979)（圖1）。

用于科學(xué)研究的抗體制劑通常是多克隆抗體或者單克隆抗體。

SySy多克隆抗體

多克隆抗體由抗體分子混合物組成，由于其可變序列區(qū)的不同，因此它們的抗原結(jié)合特性也不同（圖2）。多克隆抗體通常從免疫動(dòng)物的血清中獲得(Benner et al., 1981; Wootla et al., 2014)。

在動(dòng)物免疫之后，激活的B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞而最終生成大量可溶抗體。每一個(gè)高度特化的細(xì)胞都攜帶著分泌抗體的遺傳信息(Benner et al., 1981; Wootla et al., 2014)。

為了收獲最大量含有抗體的血清，宿主動(dòng)物通常被犧牲，因此包含特定抗體遺傳信息的漿細(xì)胞也會(huì)丟失。

因此，最終獲得的抗血清是非常有限的資源。新的抗血清只能通過(guò)重新免疫更多動(dòng)物獲得。無(wú)論新材料驗(yàn)證的有多徹底，這樣都不可避免地會(huì)導(dǎo)致一些批次間差異。

SySy單克隆抗體

單克隆抗體包括完全相同的抗體分子，它們分享相同的抗原識(shí)別特性(圖3)。

在1975年，雜交瘤技術(shù)被引進(jìn)(Koehler and Milstein, 1975, Koehler and Mistein, 1976)。在這種方法中，抗體產(chǎn)出B細(xì)胞跟一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞株融合在一起，從而生成所謂的可無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞。每個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆生成具有相同特性的同一抗體。這種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)非常明顯。新批次的抗血清不再需要每次從頭開(kāi)始進(jìn)行廣泛的表征和驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)方案也不再需要費(fèi)力地去適應(yīng)不斷改變的抗體特性。即使隨著時(shí)間的推移，科學(xué)界積累的驗(yàn)證數(shù)據(jù)依然可以保持它們的有效性。這樣也使更多研究試劑具有更好的特性和價(jià)值。

然而，由雜交瘤技術(shù)生成的單克隆抗體仍然有一些限制。它們會(huì)經(jīng)歷遺傳漂變，從而導(dǎo)致在特異性和親和性上一些不期望的變化。總之，單克隆抗體的遺傳信息是未知的，并且抗體特性的細(xì)微變化通過(guò)周密的細(xì)胞庫(kù)已被最小化。某些雜交瘤細(xì)胞已被證明是不穩(wěn)定的并且已被停止用來(lái)表達(dá)抗體。

SySy重組抗體

重組抗體是通過(guò)使用已知的抗體編碼基因，離體生成的單克隆抗體。一個(gè)抗體輕鏈和重鏈的編碼序列可通過(guò)例如雜交瘤測(cè)序獲得。序列可被克隆為表達(dá)載體，隨后被轉(zhuǎn)染入哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞株進(jìn)行抗體表達(dá)。最后穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞克隆可被生成，并且表達(dá)可被調(diào)整和優(yōu)化(Kuhnert and Reinhart, 2016)。

一旦抗體被克隆，就有可能對(duì)其進(jìn)行修飾。可變序列可被突變來(lái)改變結(jié)合特性或者親和性。來(lái)自一個(gè)物種的恒定區(qū)可被來(lái)自另一物種的恒定序列代替，從而產(chǎn)生了嵌合重組抗體(Sahagan et al., 1986; Zalutsky et al., 1996)（圖4）。這些通過(guò)基因工程改造的嵌合重組抗體保留了原抗體克隆的所有抗原識(shí)別特征（圖5)。

與單克隆抗體相比，重組抗體有許多優(yōu)勢(shì)

重組抗體是在高度定義和控制的條件下生成的，具有最小批次間差異的無(wú)限資源。從細(xì)胞培養(yǎng)上清中純化而來(lái)，所以不需要犧牲動(dòng)物。序列是已知的，所以抗體不會(huì)由于遺傳漂變而變化。相反的是，抗體工程有了更多的選擇使一個(gè)抗體能去適應(yīng)特定實(shí)驗(yàn)要求。Synaptic Systems可提供越來(lái)越多樣的嵌合重組抗體，其恒定區(qū)來(lái)源于兔，豚鼠，大鼠，人類及雞。他們都來(lái)自于我們表現(xiàn)優(yōu)良的小鼠或兔單克隆抗體，并且可與常規(guī)物種特定二級(jí)抗體結(jié)合。Synaptic Systems 重組抗體是非常有價(jià)值，可靠的具有卓越表現(xiàn)的科研工具。

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參考文獻(xiàn)

Amzel and Poljak, 1979: Three-dimensional structure of immunoglobulins. PMID: 89832

Benner et al. 1981: Immunoglobulin isotype expression. II. Frequency analysis in mitogen-reactive B cells. PMID: 6975718

Wootla et al., 2014: Polyclonal and monoclonal antibodies in clinic. PMID: 24037837

Koehler and Milstein, 1975: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. PMID: 1172191

Koehler and Milstein, 1976: Derivation of specific antibody-producing tissue culture and tumor lines by cell fusion. PMID: 825377

Kuhnert and Reinhart, 2016: Advances in recombinant antibody manufacturing. PMID: 26936774

Shahagan et al., 1986: A genetically engineered murine/human chimeric antibody retains specificity for human tumor-associated antigen. PMID: 3088107

Zalutsky et al., 1996: Chimeric anti-tenascin antibody 81C6: increased tumor localization compared with its murine parent. PMID: 8832699

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