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BPS Bioscience:多聚ADP核糖水解酶(PARG)熒光檢測試劑盒

發布者:艾美捷科技    發布時間:2023-11-28     
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作為DNA損傷應答的首要應答因子,PARP1和PARP2(多聚ADP核糖聚合酶,Poly ADP-ribose polymerases,PARPs)能夠感知DNA中的單鏈斷裂,并結合到受損區域,然后在自身蛋白骨架、組蛋白和其他修復蛋白上添加多聚腺苷二磷酸核糖(poly-ADP ribose,PAR)鏈,以招募和激活它們。PAR化的PARP隨后與DNA分離,使其他蛋白質能夠啟動修復過程。通過蛋白質PARG(多聚ADP核糖水解酶,Poly ADP-riboseglycohydrolase)去除PAR鏈,將PARP恢復到其非活性形式,準備再次感知DNA損傷。因此,PARG在DNA修復過程中發揮著關鍵作用,包括堿基切除修復和單鏈斷裂修復,通過從PARP修飾的蛋白質中去除PAR鏈,實現DNA修復和這些關鍵蛋白質的再利用。PARG活性的失調已被認為與各種疾病,包括癌癥有關。針對PARG進行治療作為一種潛在的策略,已經越來越受到關注,可以增加癌細胞對誘導DNA損傷的藥物的敏感性。抑制PARG活性會增加蛋白質上的PAR積累,并干擾DNA修復機制,最終導致細胞死亡。因此,開發PARG抑制劑作為治療藥物已成為癌癥治療的有前景的方法,特別是與放療和化療等誘導DNA損傷的藥物聯合使用。  

PARPs.png


  PARG熒光酶活性測定試劑盒采用簡單直觀的熒光測定方法,旨在檢測多聚ADP核糖水解酶(PARG)的水解酶活性,用于篩選和分析應用。PARG熒光酶活性測定試劑盒包含足夠的純化重組PARG酶、底物和測定緩沖液,還包含PARG抑制劑PDD00017273作為PARG活性的對照。  


PDD00017273.png


貨號78858-1(96 次)78858-2(384次)
名稱PARG Fluorogenic Assay Kit 多聚ADP核糖水解酶(PARG)熒光檢測試劑盒
檢測原理PARG與含有熒光基團的ADP核糖底物共孵育,其中熒光團因核糖的存在淬滅。在PARG作用下,熒光基團被釋放出來,在λ=502 nm處可檢測到熒光(激發波長為λ=385 nm)。因此熒光強度與PARG水解酶活性成正比。
應用研究酶動力學并篩選小分子抑制劑,用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用
結果圖

PARG.png

PARG的梯度活性:在5uM熒光性PARG底物中增加酶的孵育量

PDD0001727-1.png

抑制劑對PARG活性的抑制作用:在PARG抑制劑PDD00017273濃度增加的情況下,測檢測PARG活性

  

PARG的活性及抑制劑篩選檢測都依賴于酶活性蛋白的質量。這些檢測方法都會使用在Sf9細胞中產生并親和純化的112 kDa全長His-標記的PARG重組蛋白。蛋白質濃度使用Bradford/BCA分析確定。每個新批次的蛋白質都通過熒光測定確認其活性。

貨號101726
名稱PARG, His-Tag Recombinant 多聚ADP核糖水解酶(PARG)重組蛋白,His標簽
序列His-2-976(end)
純度≥70%
表達系統Sf9
應用對于酶動力學研究、篩選抑制劑和選擇性分析非常有用
SDS-PAGE

101726.png

活性

PARG, His-Tag Recombinant.png

 

PARG作為參與PAR鏈降解的分解酶,釋放出ADP-核糖和寡聚(ADP-核糖)鏈。PAR的穩態平衡受到PAR聚合酶家族(PARPs)和PARG的調節,以應對細胞應激條件,如DNA損傷應答(DDR)。PARG的活性與炎癥、缺血、中風和癌癥等細胞反應相關。PARG在乳腺癌中過度表達,并與腫瘤生長和存活相關。降低PARG活性可以增強當前癌癥治療(如化療和放療)的效果,因此使用選擇性抑制劑抑制PARG成為癌癥和免疫療法中有前景的方法。更多PARG相關產品詳詢艾美捷科技!   


BPS bioscience總部坐落于世界最大之一的美國圣地亞哥生命科學研究機構和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司為藥物研發用重組酶類的提供了最大選擇之一。  


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