可提供的Oligo級別(從科研級到GMP級)

Eurogentec自豪地推出Track寡核苷酸作為您合理定價的解決方案。憑借超過25年的寡核苷酸制造經(jīng)驗，Eurogentec確保提供從科研級別到商業(yè)化級別的高質(zhì)量產(chǎn)品和服務。

Track寡核苷酸提供所需的可追溯性，包括在整個生產(chǎn)過程中使用的設備、參與的人員以及其他重要的制造規(guī)格。而且，所有這些都以實惠的價格！

使用Track寡核苷酸，您擁有了大多數(shù)診斷市場應用所需的可追溯性：實驗室服務（健康、農(nóng)業(yè)、獸醫(yī)、環(huán)境）、醫(yī)院實驗室、農(nóng)業(yè)實驗室、MDx公司~

Eurogentec的Oligo在骨架、修飾、規(guī)格和純化方面提供了廣泛的選擇范圍。超過300種修飾和幾個純度級別可供選擇。

Oligo骨架

堿基: Eurogentec 不僅提供經(jīng)典的 DNA 堿基和 RNA 堿基寡核苷酸，也可以提供其他的骨架如 LNA，2’-O-Me 等滿足您的需求。

LNA (鎖核苷酸) 是一種雙環(huán)結構的堿基，在內(nèi)環(huán) C3' 位置形成剛性的鎖狀結構，有利于與 RNA 形成 A 型螺旋雙螺旋結構。這種特殊的結構賦予 LNA 與互補的 DNA 和 RNA 模板雜交時更強的熱穩(wěn)定性，適用于需要較高的特異性和/或重復性的雜交檢測。

2’-O-Me RNA 可以部分耐受多種核糖核酸酶和脫氧核糖核酸酶。它們與互補 RNA 鏈形成的雜交鏈比 DNA/RNA 雜交鏈更穩(wěn)定。它們是反義探針的理想選擇。

2’-O-(2-甲氧基乙基) 或稱2’-O-MOE 除一個類似 RNA 的化學結構，此外還有一個甲氧基乙酯附著在 2’-O 位置。在這個位置上的化學基團賦予寡核苷酸骨架最高的核酸酶抗性，以及比經(jīng)典的 RNA 分子更好的結合親和力，有助于在反義研究中的應用。

連接：

Phosphodiester——磷酸二酯鍵(默認連接) 連接核糖 3' 端碳原子和 5' 端碳原子。

Phosphorothioate——硫代磷酸二酯鍵 取代非橋氧原子的硫原子，增強了化學鍵的核酸酶抗性。

Methylphosphonate*——甲基磷酸二甲酯鍵 是非離子性核酸酶抗性的連接。甲基膦酸二甲酯/ RNA 雙鏈不會被 RNaseH 識別。

*只適用于DNA堿基。

Oligo修飾

寡核苷酸可以在合成過程中直接添加修飾，或者在合成后進行修飾

1. 直接修飾

1)3’端修飾

由于自動寡核苷酸合成是從 3’ 端到 5’ 端的，只有在相應的固體載體（CPG柱）可用且修飾與合成過程中所用的化學物質(zhì)相相容時，才有可能添加這些修飾。典型的例子是 3’phosphate，3’Biotin，3’FAM，3’DDQ I，3’BHQ-1 等。

2)5’端和中間修飾

很多修飾可以直接引入在 5' 端或通過亞磷酰胺引入到寡核苷酸的內(nèi)部位置。然而這些修飾需要能夠耐受某些嚴酷的裂解脫保護條件，包括極強的堿性 pH 值。典型的例子是 5’Biotin，5’Phosphate，5’ Cholesterol，5’FAM，8-OxodA，Biotin-dT，DABCYL-dT 等。

2. 合成后修飾

合成后的修飾可能影響反應的收率。低產(chǎn)量可能是由于多種修飾和/或強烈的二級結構。兩大合成后反應用來引入敏感染料或不存在的亞磷酰胺化合物。在第一種情況下，標簽是共軛氨基修飾的寡核苷酸（3’，5’ 或在 dT 堿基上）使用氨基反應的版本（N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS）在大多數(shù)情況下）。

第二種可能性（原來也用于分子信標的合成）是一個馬來酰亞胺改性標簽巰基修飾的寡核苷酸的加入。

Oligo純化方式選擇：

任何純化方法的首要目的都是為了去除由于去保護基團和其他合成副產(chǎn)物而產(chǎn)生的雜質(zhì)。請參考每種修飾的最適純化方法。如果您不確定哪種純化方法適合您的應用，請注明“Recommended Single Purification”（需支付額外費用），我們將為您選擇最佳純化方式。

不同修飾建議的純化方式：

不同長度Oligo修飾建議的純化方式：

 合成規(guī)格與實際產(chǎn)量的關系，請參考：

額外的QC

MALDI-TOF Mass Spectrometry: 這種方法提供了廣范圍（最長至60個堿基）的有關長度、脫保護產(chǎn)品和帶有修飾的寡核苷酸的標記的最準確的信息。

RP-HPLC: 這是一種非常有效的技術，它提供了從15至40個堿基的寡核苷酸純度水平的量化信息。

IEX-HPLC: 這種技術特別適合于從15至40個堿基寡核苷酸的量化純度水平。

Capillary Gel Electrophoresis(CGE): 這種方法適用于非常精確地評估超過40個堿基的寡核苷酸的純度。

Fluorescence analysis: 這種非破壞性的物理技術提供了有關熒光寡核苷酸的定性信息。

MALDI-TOF Mass Spectrometry sequencing:這種方法提供了高分辨率的結果，快速的樣品分離，并消除與凝膠系統(tǒng)相關的壓縮。這是精確核酸測序的方法。

交貨形式:

干粉: 所有合成的寡核苷酸默認以干粉交貨。

退火: siRNA 或克隆 linkers 默認是經(jīng)過退火的。

預混合: 相同量的正義鏈和反義鏈寡核苷酸可以混合包裝在一個管中。

包裝:

2 mL 管: 默認情況下，每條寡核苷酸都包裝在單獨提供的2 毫升管中。更大容積的管可以按要求運輸（15毫升，50毫升）。

96-孔平板: Cluster tubes, well plate 和 deep well plate。

384-孔平板: 特別適合超過96條寡核苷酸的高通量實驗的需求。

分裝: 所有已溶液狀態(tài)發(fā)貨的寡核苷酸可以按要求分裝 (從 50 ul 到 1000 ul)。