Jackson丨艾美捷代理AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u鏈特異性)：特性與應(yīng)用指南

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2025-10-22

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在免疫學(xué)研究中，特異性識(shí)別免疫球蛋白M(IgM)這一在初次免疫應(yīng)答中率先產(chǎn)生的關(guān)鍵抗體，對(duì)于理解B細(xì)胞激活、自身免疫性疾病及感染早期過(guò)程至關(guān)重要。AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u鏈特異性)（貨號(hào)：115-005-020）便是一款經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì)與純化的高特異性工具，能夠精準(zhǔn)地用于檢測(cè)小鼠來(lái)源的IgM分子。本文旨在系統(tǒng)介紹該抗體的核心特性、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)、使用規(guī)范及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

Jackson 總部位于美國(guó)賓夕法尼的蘭卡斯特，距離費(fèi)城大概有40英里。Jackson在1982年由科學(xué)家展開了包括在細(xì)胞生物學(xué)，蛋白質(zhì)化學(xué)，微生物學(xué)，免疫學(xué)及產(chǎn)品開發(fā)實(shí)驗(yàn)研究。 Jackson產(chǎn)品僅用于研究，不用于診斷或治療用途。作為美國(guó)各種二抗生產(chǎn)公司之一，Jackson在各國(guó)設(shè)有幾十家代理。由于其產(chǎn)品效價(jià) 高、種類全、價(jià)格低廉，因而成為各大藥廠、試劑盒生產(chǎn)廠、大型實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)此類試劑的優(yōu)選。其產(chǎn)品主要包括：各種純化的二抗、標(biāo)記的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長(zhǎng)臂生物素、辣根酶和堿磷酶標(biāo)記）等。

一、核心產(chǎn)品特性：卓越的特異性與經(jīng)典格式

本品是一款以山羊作為宿主的全分子IgG抗體，其設(shè)計(jì)核心在于特異性靶向小鼠IgM分子的重鏈。

靶標(biāo)與特異性：該抗體的最大特點(diǎn)在于其u鏈特異性。這意味著它通過(guò)免疫電泳和/或ELISA方法驗(yàn)證，能夠特異性地與小鼠IgM分子的重鏈（u鏈）結(jié)合，而不與小鼠IgG或小鼠免疫球蛋白的輕鏈發(fā)生反應(yīng)。這種對(duì)重鏈的專一性識(shí)別，確保了在含有混合免疫球蛋白的復(fù)雜樣本（如血清）中，能夠準(zhǔn)確無(wú)誤地檢測(cè)出IgM，而不會(huì)受到IgG的干擾。驗(yàn)證同時(shí)表明，未檢測(cè)到其對(duì)非免疫球蛋白血清蛋白的反應(yīng)性，保證了低背景和高信噪比。但需注意，該抗體可能與其他物種的IgM發(fā)生交叉反應(yīng)，在涉及多物種樣本的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)予以考慮。

抗體格式與結(jié)構(gòu)：本品為全I(xiàn)gG形式。抗體分子通過(guò)免疫親和層析技術(shù)從抗血清中分離，保持了完整的天然結(jié)構(gòu)：包含一個(gè)Fc片段和兩個(gè)通過(guò)二硫鍵連接的抗原結(jié)合Fab片段，因此具有二價(jià)結(jié)合能力，親和力更高。其分子量約為160kDa。全I(xiàn)gG抗體形式適用于絕大多數(shù)免疫檢測(cè)流程（如ELISA、WesternBlot、免疫沉淀等），并且在成本效益方面頗具優(yōu)勢(shì)。

克隆性與純化：屬于多克隆抗體，能夠識(shí)別IgMu鏈的多個(gè)表位，通常可提供更強(qiáng)的信號(hào)和更高的檢測(cè)靈敏度。產(chǎn)品通過(guò)將小鼠IgMu鏈抗原偶聯(lián)至瓊脂糖珠上進(jìn)行免疫親和層析純化，從而獲得了J高的純度，有效去除了非特異性抗體和雜蛋白。

標(biāo)記狀態(tài)：本品為未偶聯(lián)形式。這為用戶提供了J大的靈活性，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，自行選擇與不同的報(bào)告分子（如酶HRP、AP，熒光染料Cy3、FITC等）進(jìn)行偶聯(lián)，或者直接用于需要間接檢測(cè)法（使用標(biāo)記的二抗）的實(shí)驗(yàn)方案中。

二、使用、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性指南

物理狀態(tài)與儲(chǔ)存：與常見的凍干粉形式不同，本品以無(wú)菌過(guò)濾液體形式提供。應(yīng)在2-8°C條件下無(wú)菌儲(chǔ)存，避免冷凍。

工作液制備：抗體工作稀釋液建議在使用當(dāng)天新鮮配制。

有效期：自收貨之日起，產(chǎn)品有效期為一年。若經(jīng)性能測(cè)試驗(yàn)證，其活性仍滿足實(shí)驗(yàn)要求，有效期可酌情延長(zhǎng)。

緩沖體系與防腐劑：抗體溶解于pH7.6的0.01M磷酸鈉和0.25MNaCl緩沖液中。值得注意的是，產(chǎn)品未添加任何防腐劑（如疊氮鈉），這使得它非常適用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)或體內(nèi)注射研究，而無(wú)需擔(dān)心防腐劑的細(xì)胞毒性或干擾作用。其無(wú)菌過(guò)濾的處理也進(jìn)一步支持了此類應(yīng)用。

工作濃度建議：對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，推薦的工作濃度為10-20ug/ml。與稀釋倍數(shù)范圍不同，直接提供濃度范圍更具科學(xué)性，因?yàn)樗懦嗽簼舛炔町惖挠绊憽Ｍ瑯樱罴压ぷ鳚舛仁芸乖芏取z測(cè)系統(tǒng)靈敏度等多種因素影響，強(qiáng)烈建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性優(yōu)化。

三、應(yīng)用實(shí)例：在前沿研究中的價(jià)值體現(xiàn)

產(chǎn)品說(shuō)明中引用的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)（關(guān)于半乳糖凝集素-9，Galectin-9）生動(dòng)地展示了該抗體的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值：

在一項(xiàng)旨在鑒定Galectin-9相互作用蛋白的研究中，研究人員使用了FLAG標(biāo)記的重組Galectin-9(rGal9)與磁珠偶聯(lián)進(jìn)行Pull-down實(shí)驗(yàn)。

1.免疫印跡驗(yàn)證：通過(guò)使用lactose將結(jié)合的配體洗脫后，研究者利用這款u鏈特異性的山羊抗小鼠IgM抗體進(jìn)行免疫印跡分析。結(jié)果清晰地顯示，只有在有rGal9存在的條件下，才能特異地檢測(cè)到小鼠IgM被Pull-down，而對(duì)照組則沒有信號(hào)。這直接證明了Galectin-9能夠與IgM結(jié)合。

2.Far-Western分析：在另一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，研究人員將不同細(xì)胞系（包括原代小鼠B細(xì)胞、A20B細(xì)胞等）的裂解物進(jìn)行電泳并轉(zhuǎn)膜，然后直接用FLAG標(biāo)記的rGal9作為探針進(jìn)行Far-Westernblot分析。隨后，再次使用該抗體對(duì)同一張膜進(jìn)行檢測(cè)，作為參照，確認(rèn)了IgM的存在位置，并驗(yàn)證了rGal9與膜上IgM的直接結(jié)合。

這些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有力地證明了本品在復(fù)雜生物學(xué)相互作用研究中的高特異性和可靠性。它不僅能夠用于常規(guī)的免疫檢測(cè)，更能勝任像Pull-down、Far-Western這樣的前沿技術(shù)，是探索IgM相關(guān)生物學(xué)功能的得力工具。

四、WB實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)參考：

Galectin-9 binds IgM-BCR to regulate B cellsignaling.

In Nat Commun on 17 August 2018 by Cao,A.,Alluqmani,N.,et al.

AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u鏈特異性)

Galectin-9 與 IgM-BCR 和 CD45 的結(jié)合

a Pull-down 實(shí)驗(yàn)示意圖：使用與磁珠偶聯(lián)的 FLAG 標(biāo)簽重組 Galectin-9（rGal9）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。與 Galectin-9 相互作用的配體通過(guò)乳糖處理被洗脫，隨后通過(guò)質(zhì)譜法進(jìn)行鑒定。

b 將包被了 rGal9（+rGal9）或未包被 rGal9（-rGal9）的磁珠上經(jīng)乳糖洗脫的蛋白質(zhì)，或在存在（+lac）或不存在（-lac）乳糖的條件下，進(jìn)行 SDS-PAGE，隨后使用 CD45 和 IgM 特異性抗體進(jìn)行免疫印跡分析。

c 對(duì)來(lái)自原代小鼠 B 細(xì)胞（泳道 1）、表達(dá) Hel 特異性 IgM 的 A20 B 細(xì)胞（D1.3；泳道 2）、A20 B 細(xì)胞（泳道 3）和 Jurkat T 細(xì)胞（泳道 4）的細(xì)胞裂解液進(jìn)行裂解，并使用 FLAG 標(biāo)簽的 rGal9 進(jìn)行 Far-western 分析。右側(cè)顯示了針對(duì) CD45 和 IgM 的參考印跡結(jié)果。所示數(shù)據(jù)代表三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。

五、熱門產(chǎn)品

115-605-071	Alexa Fluor 647 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，F(xiàn)cγ 片段特異性（最小 x 胡、Bov、小時(shí) Sr Prot）
115-035-209	過(guò)氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，F(xiàn)cγ 亞類 3 特異性（最小 X 胡，Bov，Rb Sr Prot）
115-035-208	過(guò)氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，F(xiàn)cγ 亞類 2c 特異性（最小 x 胡，Bov，Rb Sr Prot）
115-035-207	過(guò)氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，F(xiàn)cγ 亞類 2b 特異性（最小 X 胡，Bov，Rb Sr Prot）
115-035-206	過(guò)氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，F(xiàn)cγ 亞類 2a 特異性（最小 X 胡，Bov，Rb Sr Prot）
115-035-075	過(guò)氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgM，u鏈特異性（最小 X 胡，Bov，Hrs Sr Prot）
001-000-162	牛血清白蛋白（無(wú) IgG、無(wú)蛋白酶）
015-000-120	普通小鼠血清
115-035-003	過(guò)氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
005-000-121	普通山羊血清
115-585-003	Alexa Fluor 594 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
114-035-003	過(guò)氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗豬 IgG （H+L）
712-585-153	Alexa Fluor 594 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗大鼠 IgG （H+L）（最小 X BoV，Ck，Gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Ms，Rb，Shp Sr Prot）
715-545-150	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗小鼠 IgG （H+L）（最小 X Bov，Ck，Gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Rb，Shp Sr Prot）