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谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA試劑盒:雙抗體夾心法,精準定量

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-02-05     
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GSTp檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),用于定量檢測倉鼠(CHO)細胞樣本中的谷胱甘肽S-轉移酶π(GSTp)。僅供研究使用,不得用于診斷程序。

 

艾美捷谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA試劑盒【#41-GSTHA-E01】檢測原理:

在此檢測中,樣本中的GSTp與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗GSTp抗體發(fā)生反應。經(jīng)洗滌去除未結合的蛋白質后,加入檢測抗體,即生物素偶聯(lián)的抗GSTp抗體,形成復合物。洗滌后,加入辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)的鏈霉親和素,形成復合物。再經(jīng)洗滌后,通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)來測定復合物。結合的酶量與樣本中GSTp的濃度成正比;因此,450 nm處的吸光度是測試樣本中GSTp濃度的量度。可以通過標準曲線(由標準品構建)來估算測試樣本中GSTp的量,并根據(jù)樣本稀釋情況進行校正。

 

谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA試劑盒組成:

谷胱甘肽(CHO)GSTp ELISA試劑盒

試劑盒及其組分的有效期在包裝標簽上注明。如果按照本試劑盒說明書儲存和使用,所有組分在有效期內應保持穩(wěn)定。

 

所需材料(未提供):

精密移液管(2 ?L至1000 ?L),用于制備和分裝稀釋液

試管

噴壺或微孔板清洗/吸引器

蒸餾水或去離子水

能在450 nm處讀數(shù)的微孔板讀數(shù)儀

用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿

用于樣本收集的離心機

計時器

微孔板振蕩器

 

樣本稀釋:

檢測要求每個測試樣本在使用前進行稀釋。每次進行檢測時,所有樣本都應進行雙份檢測。推薦的稀釋倍數(shù)僅為建議。稀釋倍數(shù)應基于未知樣本的預期濃度,使得稀釋后的樣本落在標準曲線的動態(tài)范圍內。如果不確定樣本水平,在運行整個板之前,強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。在使用前立即稀釋樣本。

CHO培養(yǎng)提取樣本——推薦起始稀釋倍數(shù)為1:20。要制備樣本的1:20稀釋液,將15 ?L樣本轉移至285 ?L的1X稀釋液中。充分混合。

 

結果計算:

從所有孔的測試值中減去平均背景值(標準零的平均吸光度讀數(shù))。

對每個標準品的重復讀數(shù)取平均值,并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計算機軟件來處理數(shù)據(jù),構建標準曲線。也可以使用二階多項式(二次)或其他曲線擬合;然而,它們將提供數(shù)據(jù)的擬合精度較低。

從標準曲線上估算測試樣本值。根據(jù)稀釋因子進行校正,以得出原始樣本中GSTp的濃度。


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