PDE10A1檢測(cè)試劑盒是一種熒光偏振（FP）均相384孔板檢測(cè)試劑盒，專(zhuān)為篩選和分析PDE10A1（磷酸二酯酶10A1）抑制劑而設(shè)計(jì)。該檢測(cè)利用了一種特定的熒光磷酸鹽結(jié)合納米顆粒。試劑盒包含足夠的純化重組PDE10A1、熒光探針、PDE檢測(cè)緩沖液、結(jié)合劑和稀釋液，用于400次反應(yīng)。  

檢測(cè)使用了標(biāo)記有熒光素的環(huán)狀鳥(niǎo)苷酸單磷酸（cAMP-FAM用于PDE10A1），其中磷酸基團(tuán)參與環(huán)狀核苷酸的構(gòu)成。這是一種非常小的分子，旋轉(zhuǎn)速度快（低FP）。PDE10A1催化環(huán)狀核苷酸中磷酸二酯鍵的水解，釋放出磷酸基團(tuán)。在第二步中，自由的磷酸基團(tuán)被特定的磷酸結(jié)合納米珠（結(jié)合劑）識(shí)別，形成一個(gè)大復(fù)合物，其運(yùn)動(dòng)受到限制（高FP）。FP與PDE10A1活性成正比。

在200 nM FAM-環(huán)狀-3',5'-AMP底物存在的情況下，PDE10A1與逐漸增加濃度的罌粟堿共同孵育。使用Tecan M1000熒光微孔板讀取器測(cè)量熒光偏振。結(jié)果以活性百分比表示，其中在沒(méi)有抑制劑（陽(yáng)性對(duì)照）的情況下，F(xiàn)P被設(shè)定為100%。  

艾美捷BPS Bioscience-PDE10A1檢測(cè)試劑盒：

貨號(hào)：60385

同義詞：PDE10-A1、PDE  

試劑盒格式：熒光偏振  

物種：人類(lèi)  

提供形式：PDE10A1抑制劑篩選檢測(cè)試劑盒采用方便的384孔板格式，包括純化的PDE10A1酶、熒光標(biāo)記的PDE10A1底物（cAMP）、結(jié)合劑和用于400次酶反應(yīng)的PDE檢測(cè)緩沖液。  

所需材料但未提供：  

可調(diào)節(jié)微量移液器及無(wú)菌吸頭  

旋轉(zhuǎn)或搖動(dòng)平臺(tái)  

能夠測(cè)量熒光偏振的熒光微孔板讀取器（激發(fā)波長(zhǎng)λex=470 nm（5 nm帶寬），發(fā)射波長(zhǎng)λem=528 nm（10 nm帶寬））  

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性：按照指導(dǎo)儲(chǔ)存時(shí)，該檢測(cè)試劑盒在收到后6個(gè)月內(nèi)可達(dá)到最佳性能。  

應(yīng)用：用于研究酶動(dòng)力學(xué)，以及在高通量篩選（HTS）應(yīng)用中篩選小分子抑制劑以進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)。  

運(yùn)輸溫度：-80°C（干冰）  

僅供研究使用

禁忌事項(xiàng)：  

檢測(cè)中DMSO的最終濃度不應(yīng)超過(guò)1%。  

具有熒光特性的化合物可能會(huì)根據(jù)其光譜激發(fā)和發(fā)射特性干擾結(jié)果。  

建議單獨(dú)測(cè)試化合物，以確定其是否可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生潛在干擾。

檢測(cè)結(jié)果示例：

圖：在200 nM FAM-環(huán)狀-3', 5'-AMP底物存在的情況下，PDE10A1與逐漸增加濃度的罌粟堿共同孵育。使用Tecan M1000熒光微孔板讀取器測(cè)量熒光偏振。結(jié)果以活性百分比表示，其中在沒(méi)有抑制劑（陽(yáng)性對(duì)照）的情況下，熒光偏振（FP）被設(shè)定為100%。

文獻(xiàn)參考：

Nishi A., et al., 2010 Pharmacol. Sci. 114:6-16.

Omori K., et al., 2007 J. Circulation Res. 100:309-327.