谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）是一類具有過氧化物酶活性的酶家族，其主要生物學(xué)作用是保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷。它通過清除細(xì)胞內(nèi)的游離過氧化物，幫助防止細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化。GPX在谷胱甘肽還原酶（GR）的協(xié)同作用下催化以下反應(yīng)：

簡單、直接且高通量的GPX活性測定方法應(yīng)用廣泛。BioAssay Systems改進(jìn)的測定方法直接測量酶偶聯(lián)反應(yīng)中NADPH的消耗量。在340 nm處測量的吸光度降低與樣品中的酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyChrom 谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)  

靈敏且準(zhǔn)確。使用10 uL樣品。線性檢測范圍：40到800 U/L GPX活性。

應(yīng)用  

直接測定：生物樣本中的GPX活性。  

藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學(xué)：藥物對(duì)GPX活性的影響。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）  

檢測緩沖液：25 mL  

谷胱甘肽還原酶（GR）：250 uL  

谷胱甘肽：干燥  

NADPH：干燥  

校準(zhǔn)液：500 uL  

過氧化物溶液：50 uL

儲(chǔ)存條件  

試劑盒在運(yùn)輸過程中使用冰袋包裝。收到后請將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月，復(fù)溶后3周。

注意事項(xiàng)  

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)，請遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)操作注意事項(xiàng)。詳細(xì)信息請參考材料安全數(shù)據(jù)表（MSDS）。

樣本準(zhǔn)備  

所有樣本應(yīng)澄清且無任何渾濁或顆粒。液體樣本（例如非溶血血清、血漿）可以直接檢測。將組織（10 mg）或細(xì)胞（10?）在200 uL冷PBS中勻漿，然后以14,000 rpm離心10分鐘以沉淀雜質(zhì)。使用澄清的上清液進(jìn)行檢測。如果不能立即檢測，將上清液在-80°C下冷凍（穩(wěn)定1個(gè)月）。

計(jì)算方法  

使用4分鐘時(shí)的吸光度（OD）值進(jìn)行NADPH標(biāo)準(zhǔn)品測定。從標(biāo)準(zhǔn)品值中減去空白值（#4）。將ΔOD值與標(biāo)準(zhǔn)品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并確定標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。計(jì)算樣品的ΔOD值（ΔODS = OD0- OD4）和背景對(duì)照的ΔOD值（ΔODB = OD0 - OD4）。計(jì)算樣品的GPX活性：

其中，1000用于將毫摩爾轉(zhuǎn)換為微摩爾，n為樣品稀釋因子。  

注意：如果計(jì)算出的GPX活性高于800 U/L，或者樣本孔的初始OD340nm值大于1.5，請用去離子水（dH2O）稀釋樣本并重新檢測。將結(jié)果乘以稀釋因子。  

單位定義：一個(gè)單位是指在pH 7.6和室溫下，每分鐘產(chǎn)生1微摩爾GSSG的GPX量。

文獻(xiàn)參考：

1. Medina-Leendertz, S., et al. (2018). Melatonin decreases oxidative stress in Drosophila melanogaster exposed to manganese.Investigacion Clinica, 59(3), 230-241. Assay: Glutahione peroxidase in D. melanogaster tissues.

2. Hirahara, I et al. (2020). Hypermetabolism of glutathione, glutamate and ornithine via redox imbalance in methylglyoxal-induced peritoneal injury rats. Journal of Biochemistry, 167(2), 185-194.

3. Vieira da Silva, I et al. (2021). Glutamine and cystine-enriched diets modulate aquaporins gene expression in the small intestine of piglets. PloS One, 16(1), e0245739.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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