PD-L1/TCR激活劑CHO重組細(xì)胞系是組成型表達(dá)人PD-L1的CHO-K1細(xì)胞系（程序性細(xì)胞死亡1配體1、CD274或B7同源物1（B7-H1），GenBank登錄號(hào)NM_014143）和工程TCR（T細(xì)胞受體）激活劑。

在共培養(yǎng)試驗(yàn)中，該細(xì)胞系用抗PD-1和抗PD-L1中和抗體進(jìn)行了功能驗(yàn)證。

艾美捷PD-L1/TCR激活劑-CHO重組細(xì)胞系（#60536）：

細(xì)胞培養(yǎng)協(xié)議

細(xì)胞解凍

1. 從液氮儲(chǔ)存中取出一個(gè)細(xì)胞瓶，保持在干冰上直到準(zhǔn)備解凍。

2. 準(zhǔn)備解凍時(shí)，將冷凍細(xì)胞瓶在37°C水浴中輕輕搖動(dòng)約60秒。一旦細(xì)胞解凍（可能比60秒稍快或稍慢），立即將瓶?jī)?nèi)全部?jī)?nèi)容物迅速轉(zhuǎn)移到一個(gè)空的50 ml錐形管中。

**注意：細(xì)胞在37°C水浴中停留過(guò)久會(huì)導(dǎo)致活力迅速喪失。

3. 使用10 ml的血清學(xué)移液管，將10 ml預(yù)熱的解凍培養(yǎng)基3緩慢加入含有細(xì)胞的錐形管中。解凍培養(yǎng)基3應(yīng)逐滴加入，同時(shí)輕輕搖動(dòng)錐形管以允許溫和混合，避免滲透性沖擊。

4. 立即以300 x g離心5分鐘，移除培養(yǎng)基，用5 ml預(yù)熱的解凍培養(yǎng)基3重懸細(xì)胞。

5. 將重懸的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25瓶或T75瓶中，在37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

6. 培養(yǎng)24小時(shí)后，檢查細(xì)胞的貼壁和活力情況。更換為新鮮的解凍培養(yǎng)基3，并繼續(xù)在37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直到細(xì)胞準(zhǔn)備好進(jìn)行傳代。

7. 細(xì)胞應(yīng)在完全匯合前進(jìn)行傳代。在第一次傳代及后續(xù)傳代中，使用生長(zhǎng)培養(yǎng)基3A。

細(xì)胞傳代

1. 吸去培養(yǎng)基，用不含Ca2+/Mg2+的磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌細(xì)胞，并用0.25%胰蛋白酶/EDTA將細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離。

2. 細(xì)胞脫落后，加入生長(zhǎng)培養(yǎng)基3A并轉(zhuǎn)移到試管中。

3. 以300 x g離心5分鐘，移除培養(yǎng)基，用生長(zhǎng)培養(yǎng)基3A重懸細(xì)胞。

4. 按推薦的傳代比例1:10至1:20每周兩次接種到新的培養(yǎng)容器中。

細(xì)胞凍存

1. 吸去培養(yǎng)基，用不含Ca2+/Mg2+的PBS洗滌細(xì)胞，并用0.25%胰蛋白酶/EDTA將細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離。

2. 細(xì)胞脫落后，加入生長(zhǎng)培養(yǎng)基3A并計(jì)數(shù)細(xì)胞。

3. 以300 x g離心5分鐘，移除培養(yǎng)基，用4°C的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基（BPS Bioscience #79796）重懸細(xì)胞，濃度約為2×10^6個(gè)細(xì)胞/ml。

4. 將1 ml細(xì)胞懸液分裝到每個(gè)冷凍管中，將試管放入保溫容器中緩慢冷卻，并在-80°C下過(guò)夜保存。

5. 第二天將試管轉(zhuǎn)移到液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

注意：建議在早期傳代時(shí)擴(kuò)增細(xì)胞，并至少凍存10管以備后續(xù)使用。

PD-L1/TCR激活劑-CHO重組細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：

TCR激活劑-CHO重組細(xì)胞系 60539 2瓶

PD-1, FLAG-Avi-His-Tag（人）HiP? 71198 50 ?g

抗PD-L1抗體，PE標(biāo)記 71128 50 ?g

PD1:PD-L1 TR-FRET檢測(cè) 72032 96次反應(yīng)

PD1:PD-L1細(xì)胞基礎(chǔ)抑制劑篩選試劑盒 79377 96次反應(yīng)