Jackson丨艾美捷代理Cy3標記AffiniPure驢抗山羊IgG（H+L）多克隆抗體：特性與應用指南

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時間：2025-10-22

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在免疫熒光、免疫組織化學、Western Blot等現(xiàn)代免疫檢測技術中，高特異性、高靈敏度的二級抗體是實驗成功的關鍵因素之一。Cy3標記AffiniPure驢抗山羊IgG（H+L）多克隆抗體（貨號：705-165-003）便是這樣一款經(jīng)過精心設計與純化的工具性抗體，廣泛應用于以山羊來源的一抗為靶標的檢測體系中。本文旨在對該抗體的核心特性、使用規(guī)范及應用優(yōu)勢進行系統(tǒng)性的梳理與介紹。

Jackson 總部位于美國賓夕法尼的蘭卡斯特，距離費城大概有40英里。Jackson在1982年由科學家展開了包括在細胞生物學，蛋白質(zhì)化學，微生物學，免疫學及產(chǎn)品開發(fā)實驗研究。 Jackson產(chǎn)品僅用于研究，不用于診斷或治療用途。作為美國各種二抗生產(chǎn)公司之一，Jackson在各國設有幾十家代理。由于其產(chǎn)品效價高、種類全、價格低廉，因而成為各大藥廠、試劑盒生產(chǎn)廠、大型實驗室采購此類試劑的優(yōu)選。其產(chǎn)品主要包括：各種純化的二抗、標記的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長臂生物素、辣根酶和堿磷酶標記）等。

一、核心產(chǎn)品特性

這是一款以驢作為宿主的全分子IgG抗體，通過免疫親和層析技術純化而得。其設計目標是特異性識別山羊的免疫球蛋白G。

靶標與特異性：該抗體主要與山羊IgG的全分子（包括重鏈H和輕鏈L）發(fā)生反應。此外，它也能識別山羊其他免疫球蛋白的輕鏈，展現(xiàn)出對輕鏈的廣泛特異性。經(jīng)過嚴格的免疫電泳和/或ELISA驗證，未檢測到其對非免疫球蛋白血清蛋白的交叉反應，這保證了其在復雜樣本中檢測的特異性。然而，需要注意的是，該抗體可能與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應，這是在實驗設計，特別是涉及多物種樣本時需要考慮的重要因素。

抗體格式與結構：本品為全IgG形式。這意味著抗體分子保持了完整的結構，包含一個Fc片段和兩個通過二硫鍵連接的抗原結合Fab片段，因此具有二價結合能力。其分子量約為160 kDa。全IgG抗體形式適用于絕大多數(shù)免疫檢測流程，并且在成本效益方面具有優(yōu)勢。

克隆性與純化：屬于多克隆抗體，能夠識別抗原的多個表位，通常能提供更強的信號。產(chǎn)品通過將抗原偶聯(lián)至瓊脂糖珠上進行免疫親和層析純化，從而確保了高純度，有效去除了非特異性抗體和其他血清蛋白的干擾。

熒光標記：抗體與花青素染料Cy3共價偶聯(lián)。Cy3在橙色-紅色熒光染料中表現(xiàn)出眾，具有亮度高、光穩(wěn)定性強、背景熒光低的特點。其最大激發(fā)波長和最大發(fā)射波長分別為550 nm和570 nm。這一光譜特性與傳統(tǒng)的四甲基羅丹明異硫氰酸酯（TRITC）幾乎完全一致，因此可以使用標準的TRITC濾光片組在熒光顯微鏡下進行觀察。Cy3可作為TRITC的一種更明亮的替代品。在激光共聚焦顯微鏡應用中，Cy3可被氬離子激光器（514 nm或528 nm譜線）、氦氖激光器（543 nm譜線）或汞燈（546 nm譜線）有效激發(fā)。

二、重要警告與使用注意事項

一個關鍵的警告信息關乎實驗的背景信號和抗體效價。產(chǎn)品說明明確指出，牛血清白蛋白（BSA）和脫脂奶粉中可能含有IgG。而本二級抗體（驢抗山羊）能夠與牛、羊、馬等多種物種的IgG發(fā)生反應。因此，若使用BSA或奶粉作為封閉劑或抗體稀釋液，其中的牛IgG會與二級抗體結合，從而導致背景信號顯著升高，并消耗二級抗體，降低其有效滴度。

為解決這一問題，推薦使用與標記二級抗體宿主物種相同的正常血清進行封閉。具體而言，建議使用5%（v/v）的正常驢血清。這種封閉策略能最大程度地減少由二級抗體非特異性結合引起的背景。

三、使用、儲存與穩(wěn)定性指南

物理狀態(tài)與初始處理：產(chǎn)品以凍干粉形式提供，應在2-8°C條件下儲存。復溶時，請參照產(chǎn)品說明書加入指定體積的超純水。若復溶后溶液不澄清，可進行離心處理。

工作液制備與短期儲存：工作稀釋液應在使用當天新鮮配制。復溶后的未稀釋原液在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周。

長期儲存方案：為確保長期穩(wěn)定性，建議采取以下兩種方案之一：

將復溶后的抗體分裝成小份，并于-70°C或更低的溫度下冷凍保存，并避免反復凍融。

加入等體積的甘油（ACS級或更高純度），使其最終濃度為50%，然后以液體形式儲存于-20°C。此方法可防止凍結，便于取用。

有效期：復溶后的抗體有效期為一年。若經(jīng)測試驗證其性能仍符合實驗要求，有效期可酌情延長。

緩沖體系：抗體溶解于pH 7.6的0.01M磷酸鈉和0.25M NaCl緩沖液中，并添加了15 mg/ml的無IgG、無蛋白酶牛血清白蛋白作為穩(wěn)定劑，以及0.05%的疊氮化鈉作為防腐劑。

工作濃度建議：對于大多數(shù)應用，推薦的稀釋范圍在1:100至1:800之間。需要強調(diào)的是，最佳稀釋度受多種因素影響，如抗原密度、組織或細胞的通透性等。因此，實際操作中必須通過預實驗進行經(jīng)驗性優(yōu)化，以確定特定實驗條件下的最適稀釋比例。

四、在多標實驗中的應用策略

Cy3標記的抗體在多重熒光標記實驗中J具價值：

與FITC/FAM等綠色熒光染料配對：在進行雙標實驗時，雖然Cy3與FITC可以配對使用，但強烈建議為FITC通道使用窄帶通發(fā)射濾光片，以最大限度地減少Cy3信號在FITC通道中的串色。

與Alexa Fluor 647等遠紅熒光染料配對：在共聚焦顯微鏡下，Cy3亦可與Alexa Fluor 647配對進行多重標記。

更優(yōu)的多標方案建議：產(chǎn)品說明中指出，若進行多重標記，Rhodamine Red-X可能是一個比Cy3更佳的選擇，因為其熒光發(fā)射光譜恰好位于綠色熒光染料（如Alexa Fluor 488）和遠紅熒光染料（如Alexa Fluor 647）之間，能更有效地進行光譜分離，減少通道間的相互干擾。140篇文獻中被引用

Cy3標記AffiniPure驢抗山羊IgG（H+L）多克隆抗體

五、熱門產(chǎn)品

705-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗山羊 IgG （H+L）
111-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
115-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
705-035-147	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 驢抗山羊 IgG （H+L）（min x Ck，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Ms，Rb，大鼠 Sr Prot）
111-035-003	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
112-035-003	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）
115-035-003	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
305-035-003	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 兔抗山羊 IgG （H+L）
711-095-152	FITC標記驢抗兔IgG(H+L)多克隆抗體
111-095-003	熒光素（FITC）偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
112-095-003	熒光素（FITC）偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）
115-095-003	熒光素（FITC）偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
705-165-003	Cy3標記AffiniPure驢抗山羊IgG（H+L）多克隆抗體
711-165-152	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗兔 IgG（H+L）（最小 X Bov，Ck，Gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Ms，大鼠，Shp Sr Prot）
715-165-150	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗小鼠抗小鼠 IgG （H+L）（min x bov，ck，gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Rb，Shp Sr Prot）
111-165-003	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
115-165-003	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
200-582-156	Alexa Fluor 594 偶聯(lián) IgG 組分單克隆小鼠抗地高辛
115-005-020	AffiniPure 山羊抗小鼠 IgM，μ鏈特異性
112-005-167	AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）（最小 X 胡，Bov，小時，Ms，Rb Sr Prot）
115-005-044	AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG + IgM （H+L）
713-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗綿羊 IgG （H+L）
111-035-003	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
109-115-098	R-藻紅蛋白偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗人 IgG，F(xiàn)cγ 片段特異性（min x bov，hrs，Ms Sr Prot）
711-165-152	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗兔 IgG（H+L）（最小 X Bov，Ck，Gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Ms，大鼠，Shp Sr Prot）
017-000-121	普通驢精華液
001-000-162	牛血清白蛋白（無 IgG、無蛋白酶）
115-035-003	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
211-032-171	過氧化物酶偶聯(lián) IgG 組分單克隆小鼠抗兔 IgG，輕鏈特異性（min x bov，gt，arm hms，hrs，胡，ms，大鼠，shp ig）
115-035-003	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
111-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
115-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
115-035-174	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，輕鏈* 特異性（最小 x Bov，Gt，Hrs，胡，Rb，大鼠，shp ig）