Jackson丨艾美捷代理AlexaFluor488標(biāo)記驢抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗體：高特異性免疫熒光檢測(cè)

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2025-10-21

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在免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等現(xiàn)代生物技術(shù)中，選擇一款高性能的次級(jí)抗體是獲得高信噪比、高靈敏度結(jié)果的關(guān)鍵。Cy3 AffiniPure驢抗兔IgG(H+L)多克隆抗體（貨號(hào)：711-165-152）

正是這樣一款專為苛刻實(shí)驗(yàn)要求設(shè)計(jì)的工具。它不僅具備對(duì)兔源一抗的高效識(shí)別能力，更以其卓越的交叉吸附特性與先進(jìn)的Cy3熒光標(biāo)記，成為多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中橙色熒光通道的理想選擇。

Jackson 總部位于美國賓夕法尼的蘭卡斯特，距離費(fèi)城大概有40英里。Jackson在1982年由科學(xué)家展開了包括在細(xì)胞生物學(xué)，蛋白質(zhì)化學(xué)，微生物學(xué)，免疫學(xué)及產(chǎn)品開發(fā)實(shí)驗(yàn)研究。 Jackson產(chǎn)品僅用于研究，不用于診斷或治療用途。作為美國各種二抗生產(chǎn)公司之一，Jackson在各國設(shè)有幾十家代理。由于其產(chǎn)品效價(jià) 高、種類全、價(jià)格低廉，因而成為各大藥廠、試劑盒生產(chǎn)廠、大型實(shí)驗(yàn)室采購此類試劑的優(yōu)選選。其產(chǎn)品主要包括：各種純化的二抗、標(biāo)記的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長(zhǎng)臂生物素、辣根酶和堿磷酶標(biāo)記）等。

一、核心特性：精準(zhǔn)靶向與極低的交叉反應(yīng)性

該抗體以驢作為宿主，特異性靶向兔的免疫球蛋白G。作為“全分子IgG”抗體，其結(jié)構(gòu)完整，包含一個(gè)Fc片段和兩個(gè)通過二硫鍵連接的抗原結(jié)合Fab片段，形成分子量約為160kDa的二價(jià)結(jié)構(gòu)。這種完整結(jié)構(gòu)使其在與抗原結(jié)合時(shí)具有更高的親合力，適用于絕大多數(shù)免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，并且是性價(jià)比最高的抗體形式。

其特異性標(biāo)注為IgG(H+L)，這意味著它不僅能識(shí)別兔IgG的重鏈，也能與其輕鏈結(jié)合。由于輕鏈在不同類和亞類的免疫球蛋白中是共享的，因此該抗體能夠與兔的各種IgG亞類，以及其他類型的兔免疫球蛋白發(fā)生廣泛反應(yīng)，確保了檢測(cè)的全面性。

本產(chǎn)品最顯著的優(yōu)勢(shì)在于其經(jīng)過嚴(yán)格處理的最小交叉反應(yīng)性。通過ELISA和/或固相吸附測(cè)試，已確保該抗體與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠和綿羊的血清蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)降至最低。這一特性對(duì)于在復(fù)雜組織樣本（如包含多種細(xì)胞或血清成分的樣本）中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的研究者至關(guān)重要，它能有效避免由非特異性結(jié)合導(dǎo)致的高背景，從而獲得更清晰、更可靠的特異性信號(hào)。當(dāng)然，它仍有可能與未列出的其他物種免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中需予以考慮。

二、高性能熒光標(biāo)記：CyanineCy3

該抗體的標(biāo)記物是CyanineCy3，一種性能優(yōu)異的橙紅色熒光染料。其最大激發(fā)波長(zhǎng)和最大發(fā)射波長(zhǎng)分別為550nm和570nm。

與傳統(tǒng)的四甲基羅丹明相比，Cy3具有更亮、更耐光漂白以及背景更低的顯著優(yōu)勢(shì)。在應(yīng)用上，Cy3展現(xiàn)出極高的靈活性：

*兼容傳統(tǒng)濾光片：Cy3的激發(fā)和發(fā)射光譜與TRITC幾乎完全相同，因此可以直接使用實(shí)驗(yàn)室中常見的TRITC濾光片組進(jìn)行觀察，無需額外配置。

*適配多種光源：它可以被氬離子激光器、氦氖激光器或汞燈有效激發(fā)，使其能夠廣泛應(yīng)用于流式細(xì)胞儀、共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡等平臺(tái)。

*適用于多色標(biāo)記：Cy3可以與綠色熒光染料進(jìn)行雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)，但需注意使用窄帶通發(fā)射濾光片來收集綠色熒光信號(hào)，以最大限度減少Cy3信號(hào)的串?dāng)_。此外，Cy3也可以與遠(yuǎn)紅色熒光染料（如AlexaFluor 647）配對(duì)，用于共聚焦顯微鏡下的多色標(biāo)記。不過，文章也建議，若要在綠色與遠(yuǎn)紅色染料之間尋找一個(gè)最佳的中間選擇，RhodamineRed-X可能是比Cy3更優(yōu)的方案，因其光譜分離效果更佳。

三、高純度制備與穩(wěn)定保存方案

該抗體通過免疫親和層析技術(shù)進(jìn)行純化，確保了產(chǎn)品的高純度與高特異性。產(chǎn)品以凍干粉形式提供，應(yīng)在2-8°C下干燥保存。

使用前，需按照產(chǎn)品說明書加入指定體積的去離子水進(jìn)行重懸。若溶液不夠澄清，建議進(jìn)行離心處理。重懸后的液體在2-8°C下可作為原液穩(wěn)定保存約6周。

對(duì)于長(zhǎng)期保存，推薦以下兩種策略：

1.分裝深凍：將重懸后的抗體分裝至小管中，于-70°C或更低的溫度下冷凍保存，并嚴(yán)格避免反復(fù)凍融。

2.甘油保存：在抗體原液中加入等體積的甘油（最終濃度為50%），然后以液體形態(tài)儲(chǔ)存于-20°C。

自重新水化之日起，產(chǎn)品的有效期為一年。若經(jīng)測(cè)試，抗體在特定應(yīng)用中的性能仍符合要求，此有效期可適當(dāng)延長(zhǎng)。產(chǎn)品的基礎(chǔ)緩沖體系為0.01M磷酸鈉和0.25M氯化鈉，pH值7.6。其中添加了15mg/ml的無IgG、無蛋白酶牛血清白蛋白作為穩(wěn)定劑，并含有0.05%的疊氮鈉作為防腐劑。

四、使用建議與實(shí)驗(yàn)優(yōu)化

產(chǎn)品給出的建議工作稀釋度范圍是1:100至1:800。然而，必須明確指出，這僅是一個(gè)推薦的起始點(diǎn)，最佳的稀釋倍數(shù)必須通過使用者自身的實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕?jīng)驗(yàn)性確定。

影響最終工作濃度的因素繁多，主要包括：

*抗原密度：目標(biāo)蛋白在樣本中的表達(dá)水平。

*樣本類型與處理方式：是細(xì)胞、石蠟切片還是冰凍切片，以及通透處理方法。

*一抗的濃度與孵育條件。

*信號(hào)檢測(cè)設(shè)備的靈敏度與配置。

因此，為了獲得信噪比最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，強(qiáng)烈建議研究者在實(shí)際應(yīng)用中，圍繞建議范圍進(jìn)行梯度稀釋測(cè)試，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來精確校準(zhǔn)最適合自身?xiàng)l件的工作濃度。900篇文獻(xiàn)中被引用

五、產(chǎn)品圖片

AlexaFluor488標(biāo)記驢抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗體：高特異性免疫熒光檢

實(shí)驗(yàn)采用源于出生后0-3天（P0-P3）乳鼠的原代混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物，并對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞中間絲蛋白GFAP（Sigma G3893）與間隙連接蛋白Connexin 43（Santa Cruz sc-9059）進(jìn)行了染色。

染色信號(hào)通過使用Jackson ImmunoResearch公司的二抗——驢抗小鼠Alexa488（715-546-150）與驢抗兔Cy3（711-165-152）進(jìn)行可視化顯示。

本研究由荷蘭神經(jīng)科學(xué)研究所的Carlyn Martina-Mamber與Elly M. Hol完成。

六、熱門產(chǎn)品

115-005-020	AffiniPure 山羊抗小鼠 IgM，μ鏈特異性
112-005-167	AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）（最小 X 胡，Bov，小時(shí)，Ms，Rb Sr Prot）
115-005-044	AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG + IgM （H+L）
713-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗綿羊 IgG （H+L）
111-035-003	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
109-115-098	R-藻紅蛋白偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗人 IgG，F(xiàn)cγ 片段特異性（min x bov，hrs，Ms Sr Prot）
711-165-152	Cy3 偶聯(lián) AffiniPure 驢抗兔 IgG（H+L）（最小 X Bov，Ck，Gt，GP，Sy Hms，Hrs，胡，Ms，大鼠，Shp Sr Prot）
017-000-121	普通驢精華液
001-000-162	牛血清白蛋白（無 IgG、無蛋白酶）
115-035-003	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
211-032-171	過氧化物酶偶聯(lián) IgG 組分單克隆小鼠抗兔 IgG，輕鏈特異性（min x bov，gt，arm hms，hrs，胡，ms，大鼠，shp ig）
115-035-003	過氧化物酶偶聯(lián)的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
111-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
115-545-003	Alexa Fluor 488 偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
115-035-174	過氧化物酶偶聯(lián) AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG，輕鏈* 特異性（最小 x Bov，Gt，Hrs，胡，Rb，大鼠，shp ig）
017-000-121	普通驢精華液