人類IDO1細(xì)胞基檢測試劑盒旨在監(jiān)測在培養(yǎng)細(xì)胞中外源表達(dá)的人類IDO1的活性。試劑盒包含一個(gè)可用于轉(zhuǎn)染的表達(dá)載體，用于全長人類IDO1（hIDO1）的表達(dá)。表達(dá)后，hIDO1能夠催化L-色氨酸（L-Trp）轉(zhuǎn)化為犬尿氨酸（Kyn），后者被釋放并在檢測介質(zhì)中容易被檢測到。試劑盒還包含專門的檢測介質(zhì)以及激活hIDO1所需的全部成分。

L-色氨酸（L-Trp）是一種必需氨基酸，對于哺乳動物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成必不可少，而L-Trp轉(zhuǎn)化為犬尿氨酸（Kyn）的途徑已被牢固確立為先天和適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。L-Trp代謝為Kyn通過剝奪免疫細(xì)胞的L-Trp以及釋放具有免疫抑制功能的L-Trp降解產(chǎn)物，維持免疫抑制微環(huán)境。吲哚胺2,3-雙加氧酶（IDO1和IDO2）是這一途徑中的兩個(gè)限速酶，在許多腫瘤中被上調(diào)，為癌細(xì)胞提供了免疫逃逸的途徑。

艾美捷BPS Bioscience-IDO1細(xì)胞檢測試劑盒：

貨號：72031

同義詞：吲哚胺2,3-雙加氧酶1、IDO、IDO2、IDO檢測、IDO1檢測

適用物種：人類

儲存/穩(wěn)定性：按照說明儲存時(shí)，自收到之日起至少6個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。試劑盒各組分需不同的儲存條件。請確保各組分到達(dá)后儲存于適當(dāng)?shù)臏囟取?/p>

應(yīng)用：在細(xì)胞環(huán)境中篩選hIDO1酶的抑制劑。注意：表達(dá)載體是為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染協(xié)議設(shè)計(jì)的。它不適用于細(xì)菌中的轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增。

運(yùn)輸溫度：-80°C（干冰）

警告：避免凍融循環(huán)。

所需材料（但試劑盒未提供）：

HEK293細(xì)胞（或其他合適的哺乳動物細(xì)胞系）及相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基

96孔組織培養(yǎng)板

哺乳動物細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染試劑

6.1 N三氯乙酸（Sigma #T0699）

冰醋酸（Sigma #320099）

透明96孔板

能夠在λ=470 490 nm處測量吸光度的分光光度計(jì)

INCB024360（BPS產(chǎn)品編號#27338），10 mM DMSO母液（可選的IDO1抑制劑參考品）

結(jié)果展示

圖：結(jié)果以吸光度百分比形式展示。未用抑制劑處理的hIDO1轉(zhuǎn)染細(xì)胞的歸一化吸光度設(shè)定為100%。INCB024360的IC50值約為6.9 nM。

文獻(xiàn)參考：

1. Yue, E., et al., J. Med. Chem. 2009; 52: 7364–7367.

2. Liu, X., et al., Blood. 2010; 115(17): 3520-3530.