PARPtrap? PARP1和PARP2聯(lián)合檢測試劑盒是一種均質(zhì)熒光偏振（FP）檢測，旨在用于高通量篩選（HTS）格式中測量PARP1（聚(ADP-核糖)聚合酶1）和PARP2（聚(ADP-核糖)聚合酶2）DNA復(fù)合物的形成，從而實現(xiàn)對PARP1/2捕獲的測量。該試劑盒采用便捷的384孔板格式，包含足夠進(jìn)行400次酶反應(yīng)的純化重組PARP1酶、PARP2（氨基酸2-583）、熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈、NAD?和PARPtrap?檢測緩沖液。

熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈?zhǔn)切⌒蜔晒馓结槪梢栽谌芤褐凶杂尚D(zhuǎn)，因此具有較低的熒光偏振（FP）。在沒有核糖基化的情況下，PARP1/2與其熒光探針結(jié)合，形成一個較大的復(fù)合物。在NAD?存在的情況下，PARP1/2發(fā)生自身核糖基化并從熒光寡核苷酸雙鏈上解離，隨后可以再次自由旋轉(zhuǎn)（低FP）。在PARP1/2抑制劑存在的情況下，PARP1/2可以被“捕獲”在熒光寡核苷酸雙鏈上，從而導(dǎo)致較高的FP。FP信號的增加與PARP1/2的捕獲成正比。

艾美捷BPS Bioscience-PARPtrap -PARP1和PARP2聯(lián)合檢測試劑盒：

貨號：78317

同義詞：聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶2、ADPRT、PARP2、聚(ADP-核糖)聚合酶1、聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶、PARP1、PARP-1、PARP-2

試劑盒格式：熒光偏振

適用物種：人

靶點：PARP1、PARP2

儲存/穩(wěn)定性：按照指示儲存時，該檢測試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

應(yīng)用：篩選能夠增強PARP1/2捕獲到DNA上的小分子，用于藥物發(fā)現(xiàn)和高通量篩選（HTS）應(yīng)用，以及IC50的測定。

運輸溫度：-80℃

所需材料但未提供

無核酸酶蒸餾水

可調(diào)節(jié)微量移液器及無菌吸頭

旋轉(zhuǎn)或搖擺平臺

能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器（λex=470 nm（5 nm帶寬）和在λem=518 nm（10 nm帶寬）處檢測）

結(jié)果示例：

圖：Talazoparib、AZD5305、Olaparib和Veliparib對PARP1捕獲到DNA的影響。

在Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305（#78318）濃度逐漸增加的情況下，測量PARP1捕獲到DNA上的情況。“無化合物”對應(yīng)于“低FP對照”，“無NAD?”對應(yīng)于“高FP對照”條件。

文獻(xiàn)參考：

Murai J., et al., 2014 Molecular Cancer Therapeutics 13: 433-443

Murai J., et. al., 2012 Cancer Research 72: 5588-5599

Zandarashvili L., et al., 2020 Science 368(6486): 6367

Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.  

Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.??