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PARP11,也被稱為聚(ADP-核糖)聚合酶11或ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶11(ARTD11,ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶白喉毒素樣11),是PARP家族的一部分。ADP-核糖基化,即向蛋白質(zhì)添加ADP-核糖,是一種可逆的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,主要涉及DNA損傷響應(yīng)(DDR)通路。單ADP-核糖基化(稱為MARylation)是添加一個ADP-核糖單元。PARP11通過在β-TrCP(β-transducin重復(fù)序列蛋白)上進行MARylation來調(diào)節(jié)I型干擾素(IFN-I)受體IFNAR1。β-TrCP作為一種E3泛素連接酶,能夠泛素化IFNAR1。在細胞毒性T淋巴細胞(CTLs)中,IFNAR1的下調(diào)發(fā)生在免疫抑制性腫瘤微環(huán)境(TME)存在的情況下,這一過程由PARP11介導(dǎo)。通過敲除PARP11可以抵消這一現(xiàn)象,使用經(jīng)過工程改造以滅活PARP11的嵌合抗原受體(CAR)CTLs在實體瘤治療中顯示出更高的療效。因此,通過遺傳或藥理手段靶向PARP11可能為實體瘤的治療提供新的途徑。
PARP11化學發(fā)光檢測試劑盒旨在用于檢測PARP11(聚(ADP-核糖)聚合酶11)的活性,適用于篩選和分析應(yīng)用。該PARP11檢測試劑盒采用便捷的96孔板格式,包含足夠進行100次酶反應(yīng)的重組純化PARP11酶(氨基酸8-338)、反應(yīng)底物和PARP檢測緩沖液。
組蛋白蛋白被固定在96孔板上。隨后,將生物素標記的NAD?混合物(稱為PARP底物混合物)與PARP11酶在優(yōu)化的檢測緩沖液中孵育。然后,孔板用鏈霉親和素-HRP處理,隨后加入ELISA化學發(fā)光底物以產(chǎn)生化學發(fā)光,可使用化學發(fā)光讀取器進行測量。化學發(fā)光信號與PARP11活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PARP11化學發(fā)光檢測試劑盒:
貨號:80561
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶11、聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶11、PARP11、PARP-11
試劑盒格式:化學發(fā)光
適用物種:人
儲存/穩(wěn)定性:按照指示儲存時,該檢測試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)表現(xiàn)最佳。
應(yīng)用:研究酶動力學。
篩選小分子抑制劑,用于藥物發(fā)現(xiàn)和高通量篩選(HTS)應(yīng)用。
運輸溫度:-80℃
所需材料但未提供
1x PBS(磷酸鹽緩沖液)緩沖液
PBST緩沖液(1x PBS,含0.05%吐溫-20)
可讀取化學發(fā)光的發(fā)光儀或微孔板讀取器
可調(diào)節(jié)微量移液器及無菌吸頭
旋轉(zhuǎn)或搖擺平臺
結(jié)果示例:

圖:Talazoparib對PARP11活性的抑制作用。
將PARP11與Talazoparib(#78318)的濃度逐漸增加進行孵育。使用Bio-Tek微孔板讀取器測量發(fā)光強度。
文獻參考:
Zhang H., et al., 2022 Nature Cancer 3: 808-820.
Munoz I. and Beavis P., 2022 Nature Cancer 3: 790-792.
Brooks D., et al., 2023 Current Opinion in Chemical Biology 77:102402.
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